il18基因转染对小鼠卵巢癌ovhm细胞体内成瘤的影响

《il18基因转染对小鼠卵巢癌ovhm细胞体内成瘤的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、IL18基因转染对小鼠卵巢癌OVHM细胞体内成瘤的影响：崔澄郝淑维白小嘉李新伟周强程建新单保恩【摘要】目的分析转染IL18基因后，对小鼠卵巢癌OVHM细胞体内成瘤的影响，初步探讨IL18基因转染治疗卵巢癌的应用价值。方法将逆转录病毒携带的小鼠IL18基因成功转染至OVHM（OVHM/IL18），以空载体转染的OVHM（OVHM/LXSN）和野生型（OVHM）作为对照，于裸鼠皮下分别接种细胞，观察各组种植瘤生长情况，计算成瘤率；HE染色及电镜分别观察病理组织切片的形态学改变。结果三组裸鼠的成瘤率相同，但OVHM/IL

2、18组成瘤时间较晚，随瘤龄增长肿瘤生长缓慢；瘤组织较小、界限清楚，血供不丰富，瘤细胞数量少、恶性程度较低，可见中性粒细胞、淋巴细胞浸润及细胞凋亡、组织坏死现象。OVHM组和OVHM/LXSN组的瘤组织较大、与周围组织界限不清，血管丰富，瘤细胞密集、恶性程度较高。结论IL18基因成功转染后，可能通过促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管形成及促进免疫浸润等机制，达到抑制肿瘤生长、降低卵巢癌恶性程度的抗瘤作用。【关键词】IL18；基因转染；OVHM；成瘤；裸鼠　　【Abstract】ObjectiveToinvestigateth

3、eeffectofIL18genetransfectionontumorigenesisofmouseovariancancercelllineOVHM,andtodiscussthepreliminaryvalueofIL18genetransfectionintreatmentofovariancancer.MethodsOVHMedasOVHM/IL18,andtheiceororigenesisorphologyoftumorcellintissueicroscope.ResultsAfterinoculate

4、drespectively,theratiosoftumorigenesisilarinthreemicegroups.ButinOVHM/IL18group,thelatentperiodoftumorigenesisorgroortissueallerandhadalimitedboundary,thenumberofbloodvesselandtumorcellsalignanceoftumorcellsphocytesorphologyofapoptosisicroscope.HoortissuesofOVHMan

5、dOVHM/LXSNgroupsberofbloodvesselandtumorcellsore,themalignanceoftumorcellsorigenesisofOVHMinvivoorcells,perhapsthroughotherindirectkillingpathorigenesis;Nudemouse　　白介素18（interleukin18，IL18）是具有抗瘤作用的重要免疫调节因子［1］，随着卵巢组织从正常向良性及恶性肿瘤的转变，组织中IL18mRNA及蛋白表达递减直至缺如［2］。提示，若能纠

6、正卵巢癌细胞中此因子的缺陷表达，则可有效诱导IL18的抗瘤效应。因此，本文研究了IL18基因成功转染至小鼠卵巢癌OVHM细胞后，对体内成瘤的影响，初步探讨使用IL18基因对卵巢癌进行基因治疗的可行性。　　1材料与方法　　1.1细胞株、动物及主要仪器OVHM由日本大阪大学医学院HiromiFuji培养皿中，以终浓度400mg/L的G418进行阳性克隆筛选，200mg/LG418维持逐步扩大培养，20d后分别获得转染小鼠IL18的OVHM/IL18和空载体转染OVHM/LXSN细胞。最后经IL18mRNA及蛋白合成、

7、分泌的检测，鉴定转染成功。　　1.3荷OVHM肿瘤小鼠模型的建立及成瘤观察将15只BALB/c/nu裸鼠随机分为三组：OVHM/IL18组，OVHM/LXSN组（空载体对照），OVHM组（野生型对照），5只/组。分别取对数生长期的细胞，于裸鼠右前肢皮下接种（2×106个/只）。每日观察小鼠的饮食、活动等一般状况及肿瘤生长情况。游标卡尺测量瘤体的长径（a）与短径（b），计算测量当日的肿瘤体积：V=a×b2/2。于接种后4周末处死，完整剥离肿瘤，称取瘤重，计算成瘤率。　　1.4荷瘤小鼠肿瘤组织的形态学观察瘤组织经10%福尔马林

8、固定，常规石蜡包埋切片后HE染色观察。另一部分瘤组织，经4%戊二醛锇酸双重固定、脱水、浸透、包埋、聚合、切片、染色后，透射电镜下观察。　　1.5统计学处理数据均以（±s）表示，采用SPSS11.5统计软件进行方差分析。显著性检验水准α=0.05。　　2结果　　2.1IL18基因转染对裸