探讨滇白珠水提物对copd氧化应激的影响

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1、探讨滇白珠水提物对COPD氧化应激的影响　　目前认为，慢性阻塞性肺疾病（COPD）的发病机制与气道炎症有关，同时蛋白酶-抗蛋白酶失衡、氧化-抗氧化失衡亦起重要作用。抗氧化治疗是目前防治的重要靶点之一。滇白珠为我国西南地区使用的草药，在湖南西部也有分布。研究证明，滇白珠含有机酸、苷类、黄酮类、木脂素、槲皮素类等多种化合物，具有活血化瘀、通络止痛、清热解毒等功效，用于治疗慢性气管炎、风湿性关节炎、风寒感冒等.本研究利用滇白珠水提物干预COPD大鼠后检测超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二醛（MDA）浓度的变化，探讨滇白珠水提物对COPD氧化应激的影响。　　1材料与方法　　

2、　　1.1实验动物选取雄性SD大鼠36只（湖南省长沙市开福区东创实验动物科技服务部购买，编号HNACSDC20120292），鼠龄12周；平均体质量（278.0±26.0）g.将大鼠随机分为对照组、模型组和用药组，各12只。　　1.2COPD模型制备采用气管内两次注入脂多糖（LPS）和反复烟熏的方法制作COPD大鼠模型.在第1、14天向3组大鼠气管内缓慢注入LPS200μg（200μl），将其放入自制的有机玻璃烟熏箱内，在右上角开通1个直径1cm的通气孔。　　将点燃的香烟（长沙卷烟厂生产的白沙牌香烟）通过三通管将烟雾吸入100ml的注射器中

3、，关闭吸烟通路一端，再打开三通管的另一端将烟雾注入烟熏箱内进行大鼠被动吸烟，2次/d,16支/次，30min/次，2次间隔4h以上。用药组吸烟8d后，于每天吸烟前利用灌胃针给大鼠灌滇白珠水提物1.0g/kg,加0.9%氯化钠溶液至2ml.对照组于同一时间灌胃等量0.9%氯化钠溶液。3组处理时间均为28d.　　1.3滇白珠水提物提取滇白珠采集于湖南省湘西凤凰腊尔山镇两林乡。称取滇白珠干燥全株800g,切碎，浸泡，水煎3次，30min/次，合并水滤液，浓缩为1g/ml（生药），得到滇白珠水提物。　　1.4支气管肺泡灌洗液（BALF）收集将大鼠麻醉后仰卧固定于操作台，切开

4、胸部后暴露气管及双肺，结扎右主支气管，用套管针穿刺至左肺，反复3次缓慢注入3ml无菌0.9%氯化钠溶液后，回吸并用纱布过滤，得到BALF.　　1.5SOD活性和MDA浓度测定试剂盒均购自武汉博士德生物有限公司，检测方法按试剂盒说明书进行。血浆MDA测定采用硫代巴比妥酸比色法，酶性抗氧化剂SOD活性测定采用化学比色法。　　1.6病理标本处理取右肺下叶，4%中性多聚甲醛固定，石蜡包埋，苏木精-伊红染色（HE），光镜下观察形态学改变。　　1.7统计学方法采用SPSS13.0软件包进行统计学分析，计量资料以（x±s）表示，多组间比较采用方差分析，以P<0

5、.05为差异有统计学意义。　　2结果　　　　2.1　　3组肺组织血浆SOD和MDA比较3组肺组织血浆SOD和MDA浓度比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；其中对照组SOD浓度高于用药组，用药组SOD浓度高于模型组，差异均有统计学意义（P<0.05）；模型组MDA浓度高于用药组，用药组MDA浓度高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05,见表1）.【表1】　　　　2.2　　3组BALF中SOD和MDA比较3组BALF中SOD和MDA浓度比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；其中对照组SOD浓度高于用药组，用药组SOD浓度高于模型组，

6、差异均有统计学意义（P<0.05）；模型组MDA浓度高于用药组，用药组MDA浓度高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05,见表2）.【表2】　　　　2.3病理改变　　肉眼观察模型组大鼠可见肺颜色苍白，体积增大。HE染色光镜下观察，可见支气管黏膜上皮脱落、纤毛倒伏，管壁大量的淋巴细胞、单核巨噬细胞浸润，肺泡扩张，有大囊泡形成。用药组大鼠炎症程度轻，肺泡壁断裂、大囊泡形成少.　　3讨论　　　　目前，COPD的发病机制仍未完全阐明，其发生涉及多个方面，大量研究表明氧化应激在COPD发生机制中起到重要作用。氧化应激是指由于氧化剂增多和/或抗氧化剂减少导致的氧

7、化/抗氧化失衡状态。MDA是氧化过程中最终产物之一，由不饱和脂肪酸分解而来，包含3个或多个双键.1997年，我国学者用动物模拟COPD模型证明了血清MDA浓度明显升高.本研究在建模过程中应用滇白珠水提物干预后发现用药组大鼠肺组织血浆和血清MDA浓度较模型组明显降低，较对照组升高，表明滇白珠水提物可以减轻COPD气道氧化损伤，改善慢性炎症。病理学切片显示支气管和肺组织病理损伤较模型组减轻，说明滇白珠水提物在一定程度阻止COPD病理进程。　　SOD是机体清除超氧阴离子惟一的抗氧化酶，在一定程度上表示了机体的抗氧化能力.本研究结果表明，与对照组相比，模型组大鼠BALF