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1、砂生槐种子水提物对荷瘤小鼠免疫功能的影响：郭君，马兴铭，安方玉，田卫花【摘要】 目的研究砂生槐种子水提取物对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法以S180荷瘤小鼠为研究对象，砂生槐种子水提取物不同剂量连续灌胃给药10d，分别测定其抑瘤率、胸脾指数、自然杀伤细胞、白细胞介素-2（IU-2）水平。结果砂生槐种子水提取物在1200mg/kg，2400mg/kg剂量组时，其抑瘤率分别为34.9%，41.4%；用药灌胃后，白细胞介素-2（IU-2）含量及NK细胞杀伤活性均显著提高（P＜0.01）。结论砂生槐种子水提取物可通过提高荷瘤小鼠免疫功能
2、而发挥抗肿瘤作用。【关键词】砂生槐种子水提取物抗肿瘤免疫活性调节 Abstract:ObjectiveTostudytheeffectofSophoramoorcroftiana(SMSethodsS180-bearingmiceor,indexesofthymusandspleen,activityofNKandthelevelofIL－2g/kgSMS）泛指豆科槐属，又名西藏“狼牙刺”“刺紫”。据报道，砂生槐具有抑菌、抗病毒、抗心律失常、调节免疫等多种药理学作用［1］。以往对其营养成分的分析［2，3］的报道较为多见，马兴铭
3、等［4］体外实验结果显示，砂生槐种子生物碱能诱导SCG-7901细胞凋亡的作用，但对砂生槐种子水提取物（SI-1640培养基由美国Invitrogen公司提供；小牛血清购自杭州四季青生物有限公司；白细胞介素-2（IL-2）放射免疫检测试剂盒购自华美生物工程公司；环磷酰胺（CTX）购自江苏恒瑞医药股份有限公司（批号06050821）；分析纯二甲亚砜（DMSO）为金山化工厂产品。 2方法 2.1肿瘤模型的建立 将接种肿瘤细胞后7d生长良好的小鼠，颈椎脱臼处死，置75%的酒精中浸泡10min，置超净工作台，从腹腔抽出的乳白色腹水
4、，用无菌生理盐水按1∶4比例配制成癌细胞悬液（2×106/ml）。将该肿瘤细胞悬液对实验小鼠进行造模，每只小鼠右腋窝皮下接种0.2ml。以上均在无菌环境中操作。 2.3测肿瘤抑制率停药后第2天处死小鼠，剥离完整肿瘤组织，电子天平称量瘤体湿重（精确到0.01g）并计算肿瘤生长抑制率。 抑瘤率（%）=荷瘤对照组平均瘤重-给药组平均瘤重荷瘤对照组平均瘤重×100% 肿瘤组动物平均质量小于1表示肿瘤生长不良，实验组小鼠死亡率超过20%表示药物所致毒性。 2.4观察对小鼠免疫器官的影响。灌胃给药结束后次日解剖小鼠取出胸腺，脾脏，计
5、算脏器重量、脏器指数。脏器指数=免疫器官质量/体质量×1000 2.5荷瘤小鼠NK细胞杀伤靶活性的测定常规制备脾脏细胞，制成浓度为5×106个/ml的细胞悬液。与96孔板每孔中分别加入100μl脾细胞悬液和（YAC-1细胞，靶细胞（YAC-1细胞，浓度为1×106个／ml,效靶比值为50：1），设靶细胞自然释放组和最大释放对照组（YAC-1细胞100μl+1%NP-40100μl）。每样本设3个重复孔，培养16h后，吸出各孔上清100μl加入另一细胞培养板中，置37℃10min,每孔加入新鲜配置的低物液100μl，室温、避光反
6、应10～15min,再加入1.0mol/L柠檬酸终止液30μl，酶标分析仪570nm波长处测定A值，按以下公式计算NK细胞杀伤靶活性。NK细胞活性（%）＝（实验组A-自然释放组A）/（最大释放组A-自然释放组A）×100%。 2.6细胞因子测定采用小鼠白细胞介素-2放免试剂盒，严格按照说明书操作。 2.7统计学方法 用SPSS10.0统计软件分析。检测结果采用±s表示，各组间均数比较采用单因素方差分析，实验组与对照组间均数比较用独立样本t检验。 3结果 3.1抑瘤率实验显示，砂生槐种子水提取物1200mg/kg，240
7、0mg/kg剂量组对S180小鼠的生长具有一定抑制作用，抑瘤率分别为34.9%，41.4%。与荷瘤对照组比较有显著性差异(P<0.01)。结果见表1。表1SMSSSSSSSS］.上海：上海科技出版社，1999：204. ［2］李玉祥.西藏砂生槐种子的生物学特性及综合利用［J］.自然资源学报,1993，8（5）：75. ［3］许毓英,王涛,王错,等.西藏砂生槐种子营养成分的初步研究［J］.自然资源学报,1992,7（4）：379. ［4］马兴铭,李红玉,尹少甫,等.砂生槐种子生物碱诱导SCG-7901细胞凋亡的实验研究
8、［J］.中草药,2004，26（8）：654. ［5］单保恩,张金艳,杜肖娜,等.白花蛇舌草的免疫学调节活性和抗肿瘤的活性［J］.中国中西医结合杂志，2001，20（5）：370. ［6］Roeraseinhibitors［J］.AntiancerRes，2
