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时间:2018-05-01
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1、人参皂苷提取物对小鼠酒精性肝损伤的防治作用 人参为五加科植物人参PanaxginsengC.A.Mey.的干燥根,红参是人参经过高温炮制后得到的加工品。人参具有抗氧化、抗衰老、提高机体免疫力及护心保肝等药理作用。乙醇在体内主要经肝脏代谢,其代谢物乙醛及代谢过程中产生的活性氧会对肝脏造成损害,长期饮酒和过量饮酒,会造成乙醇在体内堆积,对肝脏造成不同程度的损伤,损伤程度从轻到重表现为脂肪肝、肝纤维、肝硬化[1],引起机体内天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、三酰甘油(TG)
2、、丙二醛(MDA)等生化指标水平增高。人参皂苷是红参的主要活性成分,《中国药典》和国家标准均以人参皂苷为红参的考核指标。近年来,有研究发现红参具有保肝功能[2-3],本文旨在研究人参皂苷提取物对小鼠酒精性肝损伤的防治作用,揭示作用机制,为红参的临床应用提供依据。 1材料与与仪器 1.1仪器 InfiniteM200pro酶标仪(瑞士帝肯);Lecia-DM2500微生物显微镜,德国Lecia公司。 1.2药物与试剂 鲜人参,为5年生,产自吉林省抚松县,由长春中医药大学王淑敏教授鉴定为五
3、加科人参属人参PanaxginsengC.A.Meyer干燥根;联苯双酯滴丸(浙江万邦药业有限公司,批号A02130407);56°北京红星二锅头酒(北京红星二锅头酒厂,批号20140224);ALT试剂盒、AST试剂盒、MDA试剂盒、GSH试剂盒(南京建成生物工程研究所,批号20150112);TG试剂盒(浙江东瓯生物工程有限公司,批号2015040104)。 1.3实验动物 清洁级ICR雄性小鼠,体质量20~22g,由吉林大学基础医学院动物实验中心提供,动物合格证号:SCXK-(
4、吉)2014-005. 2实验方法 2.1红参炮制 称取鲜人参约300g,用纱布包好,放入蒸参箱,在60min升温到100℃后蒸制6h,蒸制完毕后置于50℃烘干箱内烘干。将烘干后的红参研碎成粉,过80目筛。 2.2人参皂苷提取物(Ginsengsaponinextracts,GE)制备 称取红参粉末,加入8倍量80%乙醇,超声提取(500DA、GSH含量测定。 2.7肝组织病理学检查 取小鼠肝脏右叶置于10%中性福尔马林中进行固定,经一定梯度浓度的乙醇脱水、石蜡包埋、切片进行HE染
5、色,用显微镜观察肝组织病理变化。 2.8数据处理 应用SPSS19.0统计软件进行统计分析,采用单因素方差分析,组间比较采用最小显着差数法(LSD),数据均以x±s表示。共2页:12 3结果 3.1小鼠状况观察 试验期间,GE中剂量组及阳性组死亡小鼠4只,其余各组死亡小鼠2只。对照组小鼠精神状态正常,毛色正常,模型组小鼠毛色较差,造模期间,ig给予白酒后20min左右,出现醉酒状态,不自主行为增多,爬行不稳,有些小鼠呈现昏睡状态,给药组小鼠给予白酒20min后,醉酒状态较
6、模型组稍好。 3.2体质量及肝脏系数变化 各组小鼠体质量无统计学差异,与对照组相比,模型组小鼠肝质量增大(P<0.05),表明长期饮酒和乙醇的堆积造成小鼠肝脏受损肿大,质量增加可能与肝脏内脂肪堆积或其他物质生成有关。给药组小鼠肝脏系数相较模型组有明显降低(P<0.05),GE高、中、低剂量组均有降低,但组间变化趋势不明显,GE对酒精引起的小鼠肝脏受损肿大有一定的缓解作用。见表1. 3.3对小鼠血清ALT、AST、TG的影响 与对照组相比,模型组小鼠血清ALT(P<0.0
7、5)、AST(P<0.05)、TG(P<0.01)含量明显升高;与模型组相比,GE高、中剂量组ALT含量降低(P<0.01),GE各剂量组均能降低AST和TG水平(P<0.01),联苯双酯组可明显降低ALT、AST水平。但GE高、中、低剂量组组间呈现的量效关系不明显。长期白酒灌胃会造成小鼠血清ALT、AST、TG含量增高,GE可明显降低血清TG的含量,对ALT、AST含量降低有一定作用,说明GE对小鼠酒精性肝损伤有一定保护作用。见表2. 3.4对小鼠肝脏MDA、GSH的
8、影响 小鼠肝匀浆MDA含量结果显示,模型组小鼠MDA含量高于对照组(P<0.01),GE各剂量组MDA含量低于模型组(P<0.01)。模型组GSH含量低于对照组(P<0.01),GE各剂量组GSH含量高于模型组(P<0.01),GE可降低MDA含量,增加GSH含量,说明其可在一定程度上抵御肝脏内的氧化作用,从而保护肝脏进一步损伤。见表3. 3.5病理观察结果 正常组肝细胞结构正常,肝细胞条索排列整齐;模型组肝细胞变性坏死,有炎性细胞浸润,脂泡小而密集;联苯双酯组炎性
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