丹参对肝癌致鼠梗阻性黄疸时vegf表达的影响

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1、丹参对肝癌致鼠梗阻性黄疸时VEGF表达的影响【摘要】目的：建立恶性梗阻性黄疸模型，通过对模型鼠ip丹参注射液，观察其对肝癌瘤体大小、抑癌率及抑转移率和肝癌、癌周、临近肝叶及肺组织中血管内皮生长因子（VEGF）的表达，评价其作用.方法：用3、抑癌率（41.7%）及抑转移率(59.7%，81.1%)增高（P0.01）；与5FU组相比，平均瘤体却较大（P0.01）.在抑癌率及抑肝转移率方面，丹参组除抑肺转移率外与5FU组相比无差异.丹参组VEGF在肝癌组织和癌周组织中的表达率分别低于生理盐水组（P0.01）、肌苷+VC组（P0.01）和5FU组（P

2、0.05）.结论：丹参在肝癌致梗阻性黄疸时，通过促进肝癌细胞分化成熟、抑制肝癌细胞增殖、降低肝癌组织和癌周组织中VEGF表达，而对肿瘤发展起抑制作用.　　【关键词】黄疸，阻塞性；疾病模型，动物；肝肿瘤；m×1mm×1mm瘤块，置于冰生理盐水中漂洗后备接种用.将SD大鼠用20g/L戊巴比妥（1.3mL/kg）ip麻醉后，常规消毒，行腹正中切口进腹，充分显露肝门，置手术放大镜视野下，在肝右叶与肝中叶的交界部距肝门5mm处，用眼科镊逆胆管走行方向潜行造隧深约3mm，植入备用的瘤块后，用棉签压迫止血.依次关腹，结束手术.常规饲养7d，即可完成模型鼠的

3、复制〔1〕.将不合格的模型鼠剔除（接种失败、腹腔接种及无黄疸者）后，随机分成4组：A组（生理盐水治疗组）24只，ipNS，剂量为10mL/kg×7d.B组（肌苷+VC治疗组）40只，ip肌苷、VC各5mL/kg×7d.C组（丹参治疗组）40只，ip丹参10mL/kg×7d.D组（5FU组）40只，ip300mg/kg×7d.结果实际得到观察数为A组16只、B组26只、C组34只及D组30只.将4组实验鼠分别ip不同药物7d后，用乙醚开放吸入麻醉后，行正中十字切口入腹，沿胸骨正中打开胸腔，迅速剪开心包行左心室插管，先快后慢灌注生理盐水100mL

4、和40g/L多聚甲醛（0.1mol/L）PB固定液300mL，剪开右心耳放血.待全身灌注固定完全后，切取肝脏及肿瘤、肺脏标本.将组织块放入40g/L多聚甲醛溶液中，选材、脱水及石蜡包埋.记录肿瘤体积、肝内转移灶数目及肺转移情况，并计算：肿瘤体积=长径×短径2÷2，抑瘤率=〔（对照组平均瘤体-实验组平均瘤体）÷对照组平均瘤体〕×100%，抑转移率=〔（对照组平均转移率─实验组平均转移率）÷对照组平均转移率〕×100%.将选取肝瘤组织、瘤周组织、邻近肝近肝叶（左内叶）及肺组织行HE染色，进行组织病理学检查；同时选取肝癌、癌周中VEGF表达的免疫组

5、化检查.统计学处理：计量资料以x±s表示，使用SSPS11.0统计软件对多组计量资料进行KruskalWallisH检验，对计数资料进行R×C表χ2检验，P0.05认为差异有统计学意义.　　2结果　　2.1形态学观察A组肝癌生长良好，异型性高，瘤体大于1cm3时可见瘤体中心部干酪样坏死；癌周血管丰富，管径大小不一，分布密集(Fig1).B组肝癌生长良好，异型性高，瘤体体积大于1cm3时可见瘤体中心部干酪样坏死；癌周血管丰富，管径大小不一，分布密集.C组肝癌生长不良，异型性低，成熟分化比率高，肝癌组织中癌细胞呈片状病变区，周边部以细胞凋亡为主，

6、而中心部以细胞坏死为主.瘤体体积小于1cm3时就可见瘤体中心部干酪样坏死；癌周血管稀少，管径大小均匀，散在分布.D组肝癌生长不良，但异型性高.瘤体体积大于1cm3时才可见瘤体中心部干酪样坏死；癌周血管稀少，管径大小不一，分布集中.　　2.2肝癌生长转移的影响丹参组抑瘤率明显高于肌苷+VC保肝对照组(P0.01)；而与5FU抗癌对照组抑瘤率相比，虽数值上较低，但无统计学意义.丹参组抑制肝内转移率和抑制肺部转移率明显高于肌苷+VC保肝对照组(P0.01）；与5FU抗癌对照组相比，在抑制肝内转移率方面数值相近；而在抑制肺部转移率方面，数值上高于5F

7、U组，但差异无统计学意义(Tab1).表1各组模型鼠腹腔内不同药物注射对肝癌生长转移的影响（略）　　2.3肝癌、癌周、临近肝叶（肝左内叶）组织VEGF的表达丹参治疗组肝癌、癌周VEGF(Fig2)的表达例数均明显低于生理盐水组(Fig3)和肌苷+VC组(P0.01）.而在临近肝叶（肝左内叶）及肺组织中丹参组VEGF的表达例数与生理盐水组和肌苷+VC组相比，无统计学意义.与5FU抗癌对照组相比，虽数值上表达较低，但无统计学意义(Tab2).表2肝癌、癌周、临近肝叶及肺组织中VEGF的表达（略）　　3讨论　　恶性梗阻性黄疸是普外科常见症候群，其发

8、病肝脏局部而危及全身脏器，引起不可逆的病理生理改变，故在围手术期处理方面历来受到医学界的高度重视.VEGF是主要的促血管生长因子，是肿瘤血管形成的关键因素〔2〕，是