人肝癌细胞原位种植裸鼠后vegf的表达论文

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1、人肝癌细胞原位种植裸鼠后VEGF的表达论文.freels，endothelium，vascular;endothe-lialgroent，progression，groetastasis.METHODSTinedtheconcentrationofVEGFintheliversafteroneetime，adeangiographyofliver.RESULTSTherelationshipbetent，progression，groetastasiseplicated.CONCLUSIONVEGFiscloselyrelatedtothedevelop-ment，groe

2、tastasisofcancer.Themoretumorvesselsareseen，thehighertheexpressionofVEGFmaybe.0引言众所周知，肿瘤的生长、局部浸润、及远处转移与瘤血管的形成关系密切.人们发现血管内皮生长因子（VEGF）能提高血管的渗透性并促进毛细血管的生成.据报道，VEGF在许多人类肿瘤中都可表达，如:颅内的星形细胞瘤、鼻咽癌、肾癌、乳腺癌等等［1，2］.多篇文献亦报道VEGF在肝癌中有过表达，但VEGF与肿瘤血管的形成之间的关系及机制并不十分清楚［3-7］.在本研究中，我们将人的肝癌细胞HCC-7721原位种植于裸鼠肝脏内，采

3、用血管造影的方法观察肿瘤进程中肝脏血管尤其是动脉的变化.分别于1，2，3，4gkg-1ip麻醉后，于右上腹切口，逐层分离暴露肝右叶，注入浓缩瘤细胞0.08～0.1mL，平均细胞数5×106个，逐层缝合备用.自鼠尾静脉手推注入760gL-1泛影葡胺0.5mL，1s注完，注射的同时开始拍片，拍片速度为每秒四幅.血管造影后，立刻剪开裸鼠胸腔，暴露心脏，用6号针头由左室进入主动脉，生理盐水30mL冲洗，40gL-1多聚甲醛50mL灌注固定后，取出肝脏置于40gL-1多聚甲醛中保存.1.2方法组织切片HE染色.将所需标本取出，放入20gL-1蔗糖液中浸泡24h，直至组织完全沉淀，冰冻

4、切片机将标本切片，厚度为20μm，室温干燥后用0.01molL-1kPBS冲洗，置于含有3mLL-1TritonX100的0.01molL-1kPBS内30min，再用0.01molL-1kPBS冲洗后加入anti-VEGF抗体，孵育24h后，依步骤加入二抗及显色剂.2结果各组成瘤率均为100%，1m，数目2～7个;3m;4m，分布更广泛和密集，相互间有融合，其中有2例肝脏明显变形变硬，此组裸鼠消瘦明显.，2.1动脉造影自尾静脉注入造影剂后，造影剂经下腔静脉至心脏，主动脉、腹主动脉、肝动脉依次显影.正常组5例均显示肝动脉各级分枝清晰、锐利，无扭曲及压迫征象.术后1RNA在肝

5、恶性肿瘤中有表达，其水平与肿瘤血管形成的程度密切相关.Takuji等［6］认为VEGF的表达与血管造影的结果一致.但Choa等［5］甚至报道约有0.59肝癌细胞中VEGF的表达与周围肝组织基本相同甚或更低.我们采用免疫组织化学方法在肝癌生长1，2，3直至4m，此组血管造影显示肝血管开始有所改变，VEGF的表达较高，其中1例有团状血管形成，VEGF的表达在此组内最高.随着瘤灶的进一步长大、融合，术后3or［J］.Hepathology，1996;23（3）:455-464.［2］MotohiroN，Sho-ichiY，Shin-ichiH.Possibleparticipat

6、ionofautocrineandparacrinevascularendothelialgro，1995;270（47）:28316-28324.［3］KunioS，NorioH，YasuhideM.Expressionofvascularperme-abilityfactor/vascularendothelialgroanhepa-tocellularcarcinoma［J］.CancerRes，1996;56:3004-3009.［4］AtsushiN，EdiB，MarianneK.Hypoxiainducesvascularen-dothelialgroanend

7、othelialcells［J］.JBiolChem，1995;270（52）:31189-31195.［5］OsamaNA，AkiraY，YukikoS.Clinicalsignificanceofmi-crovesseldensityandvascularendothelialgroaandsurroundingliver:Possibleinvolvementofvascularendothelialgroorprogressioninhepatocellularcarcinoma［J］.Hepatology