丹参在大鼠恶性梗阻性黄疸时对肿瘤细胞凋亡的作用

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1、丹参在大鼠恶性梗阻性黄疸时对肿瘤细胞凋亡的作用【关键词】胆汁淤积；浸润和转移；增殖细胞核抗原；丹参；凋亡指数【Abstract】AIM：ToestablishmalignantbiliaryobstructionmodelsinSDrats,andtostudytheeffectsofDansheninjectiononthegroa,morphologicalchangeandPAexpressionandapoptosisindexincarcinomaandpericarcinomatissues.METHODS：①Malignantbiliary

2、obstructionmodelinSDratsadebyvaccinationoftransplantedtumorinlivernearbytheportahepatisacellline,almonbileducttocauseitsnarroalsaline(NS)(n=16),byinosine+vitaminC(n=26),byDanshen(n=34)andby5FU(n=30)respectively.③Thediameteroftransplantedtumor,morphologicalchangeandtheexpressionof

3、PAandapoptosisindexincarcinomaandpericarcinomatissuesadeintheexperimentaldata.RESULTS:InDanshengroupasparedinCgroup,theaveragesizeofhepatocarcinomaorinhibitoryrateandthemetastasisinhibitoryrateetastasisinhibitoryrateatissues(P0.05).CONCLUSION：DanshenshoorphologicalchangeinSDratmo

4、delsofmalignantbiliaryobstruction,andexertsaninhibitoryeffectonthegroathroughsuppressingtheproliferation,increasingtheapoptosisofthehepatocarcinomacells.【Keyetastasis;proliferatingcellnuclearantigen;Danshen;apoptosisindex【摘要】目的：建立恶性梗阻性黄疸模型，通过对模型鼠腹腔内注射丹参注射液，观察其对肝癌瘤体大小、形态学改变和肝癌、癌周组

5、织中增殖细胞核抗原（PA）的表达和肿瘤细胞凋亡表现，评价其作用机制.方法:①用m×1mm×1mm瘤块，置于冰生理盐水中漂洗后备接种用.将SD大鼠用20g/L戊巴比妥（1.3mL/kg）ip麻醉后，常规消毒，行腹正中切口进腹，充分显露肝门，置手术放大镜视野下，在肝右叶与肝中叶的交界部距肝门5mm处，用眼科镊逆胆管走行方向潜行造隧深约3mm，植入备用的瘤块后，用棉签压迫止血.依次关腹，结束手术.常规饲养7d，即可完成恶性梗阻性黄疸模型鼠的复制〔1〕.1.2方法将模型鼠随机分成4组：A组（生理盐水治疗组）16只，ip生理盐水，剂量为10mL/kg×7d.B组（

6、肌苷+维生素C治疗组）26只，ip肌苷+维生素C各5mL/kg×7d.C组（丹参治疗组）34只，ip丹参10mL/kg×7d.D组（5FU组）30只，ip300mg/kg×7d.ip药物7d后，用乙醚开放吸入麻醉后，行正中十字切口入腹，沿胸骨正中打开胸腔，迅速剪开心包行左心室插管，先快后慢灌注生理盐水100mL和40g/L多聚甲醛（0.1mol/L）PB固定液300mL，剪开右心耳放血.待全身灌注固定完全后，切取肝脏及肿瘤、肺脏标本.将组织块放入40g/L多聚甲醛溶液中，选材、脱水及石蜡包埋.记录肿瘤体积、肝内转移灶数目及肺转移情况，并计算：肿瘤体积=长

7、径×短径2÷2,抑癌率=〔（对照组平均瘤体─实验组平均瘤体）÷对照组平均瘤体〕×100%，抑转移率=〔（对照组平均转移率─实验组平均转移率）÷对照组平均转移率〕×100%.将选取肝瘤组织、瘤周组织行HE染色，进行组织病理学检查.同时选取肝癌、癌周组织中PA表达的免疫组化检查（PA阳性计数：10个高倍视野下计数100个细胞所含PA阳性细胞数）.TUNEL法检测组织细胞凋亡，将石腊组织标本在石腊切片机上切成4μm厚的连续切片，贴附于经脱片剂(APES)处理的洁净载玻片上，置烤箱烤3h，使切片紧密贴附.其步骤为①组织片常规脱蜡至水；②微波处理：0.01mol/

8、L枸橼酸盐缓冲液，pH6.0，至微波中加热92~98℃之间，持续10min，微波