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时间:2018-04-30
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1、不同浓度有机碘对人甲状腺细胞增殖影响赵妍,蔺新英,郭冬梅,王淑娥,刘晓婷【关键词】有机碘(DIT);甲状腺细胞(TEC);增殖 摘要:目的研究不同浓度的有机碘(DIT)对体外培养的人甲状腺细胞(TEC)增殖情况的影响,并且和无机碘(KI)进行比较,以探讨一种更安全有效的补碘制剂。方法取甲状腺腺瘤旁正常甲状腺组织,应用原代细胞培养技术进行细胞培养,以不同浓度(10-8~10-3mol/L)的DIT和KI刺激单层培养的甲状腺细胞,采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法测定各组甲状腺细胞的增殖情况。结果低浓度的KI对人甲
2、状腺细胞生长没有影响,而中、高浓度的KI对细胞生长具有抑制作用,并且呈现剂量-时间依赖关系;与对照组相比,浓度越高,时间越长,抑制越明显。DIT组只有在高浓度才对甲状腺细胞出现抑制作用,并且DIT各剂量组与KI各剂量组在同一剂量水平进行两两比较发现,DIT对细胞的抑制作用明显轻于KI对细胞的抑制作用。结论高浓度的碘可以抑制甲状腺细胞的生长,DIT对细胞生长的抑制低于KI,即DIT对细胞的损伤较KI轻。 关键词:有机碘(DIT);甲状腺细胞(TEC);增殖 EffectofDITonproliferation
3、ofhumanthyrocytesinvitro Abstract:ObjectiveToinvestigatetheinfluenceofDITontheproliferationofhumanthyrocytesandpareDITenttoUSIthatanthyroidepitheliumcellsfrompara-adenomanormaltissuesfromthyroidadenomapatientsol/LDITorKI.MTTmethodployedtoobtaintheproliferat
4、ionofculturedhumanthyrocytes.ResultsKIofmiddleandhighdosecaninhibithumanthyrocytestoproliferateandexhibitdose-effectandtime-effectrelationships.DITofonlyhighdosecaninhibithumanthyrocytesproliferate.InthesamedoseofDITandKI,theeffectofDITanthyrocytestoprolifer
5、ateandtheeffectofDITislessthanKI.DIThasmoresecuritythanKI. Keyin内送至细胞培养室进行细胞培养,甲状腺组织去除包膜及结缔组织后,D-Hanks液反复冲洗,并剪成1mm×1mm×1mm左右的碎块,03%的胶原酶在37℃水浴条件下消化100~150min,然后以025%的胰蛋白酶消化15min左右。200目不锈钢网筛过滤,离心后去上清液,用RPMI-1640培养液(含10%小牛血清,1mU/ml促甲状腺激素(TSH),100U/ml青霉素,100U/m
6、l链霉素)调整细胞浓度至2×105/ml,接种到培养瓶中。置于37℃培养3d,细胞贴壁后继续培养4d。隔日换液1次,以去除未贴壁的非甲状腺细胞。 1.3四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)实验将甲状腺细胞传代培养于96孔培养板中,每孔200μl,置于37℃,5%CO2培养箱中培养24h后,弃原培养液,换成每孔100μl无血清培养液,继续培养24h,使各孔细胞同步化。然后弃去培养液,每孔加入200μl含不同浓度KI或DIT(10-8~10-3mol/L)的RPMI-1640培养液(含10%小牛血清),每一种浓度设6个细胞
7、孔,对照组加200μl不含碘的培养液,置37℃、5%CO2培养箱中静置培养。分别于24,48,72h后测定各孔的吸光度(A)值,测定波长为490nm。并计算增殖率 增殖率(%)=实验组A值对照组A值×100%。 14统计分析实验中的所有数据均采用±s表示,应用SPSS115统计软件对研究结果进行处理,组间均值比较采用方差分析,F值检验。 2结果 21不同浓度DIT和KI在24h后对甲状腺细胞生长的影响甲状腺细胞在加入不同碘制剂培养24h后显示,DIT10-3mol/L浓度组A值低于正常对照组,差异有统计
8、学意义;与KI各剂量组在同一剂量水平进行两两比较,DIT10-7、10-5,10-4、10-3mol/L浓度组A值均高于同一浓度的KI组,差异有统计学意义;KI10-5、10-4、10-3mol/L浓度组A值低于正常对照组,差异有统计学意义(图1)。 22不同浓度DIT和KI在48h后对甲状腺细胞生长的影响培养48h后,DIT10-3mol/L浓度组A值低于正常对照组,差异有统计学意
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