定心胶囊对房颤大鼠血栓素b2及基质金属蛋白酶9的影响

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1、定心胶囊对房颤大鼠血栓素B2及基质金属蛋白酶9的影响张彦,张艳,杨硕,宋婷婷,礼海【摘要】目的观察定心胶囊对房颤大鼠血栓素B2(TXB2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的影响,探讨其预防房颤的作用机理。方法采用氯化钙-乙酰胆碱混合液以鼠尾静脉给药的方式建立房颤的动物模型。筛选典型房颤心电图表现的大鼠,随机分为房颤模型组、定心胶囊治疗组、维拉帕米对照组及正常组。定心胶囊治疗组、维拉帕米对照组给药4周后,测定血清中TXB2、MMP-9的含量。结果定心胶囊治疗组与房颤模型组比较,血清中TXB2、MMP-9的含量明显降低,均P<0.05,差异有统计学意义;定心

2、胶囊治疗组与西药对照组比较,房颤大鼠血清中TXB2、MMP-9的含量均降低,且定心胶囊治疗组优于西药对照组。结论定心胶囊能降低血清中TXB2、MMP-9的含量,是防治房颤的有效药物。【关键词】定心胶囊;房颤;血栓素B2;基质金属蛋白酶9;大鼠Abstract:ObjectiveToresearchtheeffectofDingxincapsuleonthelevelofTXB2andMMP-9inrats,andexplorethemechanismoftreatingandpreventingatrialfibrillation(AF)byTCM.Me

3、thodAFanimalmodelchloride-acetylcholinemixedliquidincoccygealveinofrats.Theratslyinto4groups:AFmodelgroup(M-group),Dingxincapsulegroup(D-group),verapamilgroup(V-group),normalgroup(N-group).TXB2andMMP-9easured4,andiseffectiveintreatingandpreventingatrialfibrillation.  Keyg/片,东北制药总

4、厂提供,批号20050322。氯化钙-乙酰胆碱混合液,辽宁中医药大学动物实验室配制。  2实验方法  2.1分组随机选取10只作为正常对照组,其余90只进行造模。造模成功的大鼠随机分为模型组、定心胶囊治疗组、维拉帕米对照组,每组选取8只进行实验。  2.2造模采用氯化钙-乙酰胆碱混合液以鼠尾静脉给药的方式建立房颤的动物模型[1]。用3%的戊巴比妥钠30mg/kg进行腹腔注射麻醉,待其昏迷后,先描记大鼠的正常心电图(记录标准肢导联)。将大鼠尾部的鳞毛刮净后注射氯化钙-乙酰胆碱混合液1mL/kg(每1mL中含Ach33μg、CaCl210mg,新鲜配制),描

5、记大鼠此时的心电图(记录标准肢导联)。常规喂饲料与水,连续给药4周,停药后做心电图(记录标准肢导联)。心电图有典型房颤改变者为房颤成功模型。  2.3给药正常组、模型组每日1次灌服同等容积的生理盐水;定心胶囊治疗组灌服相当于16.2g/(kg·d)原药材的定心胶囊,每日2次;西药对照组灌服相当于4.5mg/(kg·d)的维拉帕米,每日2次,共用药4周。  2.4指标测定  2.4.1血清血栓素B2的测定  各组大鼠用药4周后,在3%戊巴比妥按40mg/kg体重腹腔注射麻醉下,开胸取左心室腔血2mL后,注入试管中,摇匀,4℃下,3000r/min离心10m

6、in,取血清置于-20℃保存以测定TXB2。用放射免疫法测定TXB2,严格按照试剂盒说明书进行操作。  2.4.2基质金属蛋白酶9的测定  采用双抗体夹心ABC-ELISA法。抗大鼠MMP-9单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的MMP-9与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠MMP-9,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Strepta-vidin与生物素相结合,加入酶底物OPO,出现黄色,加终止液,颜色变深后,在492nm处测OD值,MMP-9浓度与OD值成正比,并通过绘制标准曲线求出标本中MMP-9的浓度。  3统计学方法  本实验中所有计量资料

7、均以x±s表示。采用SPSS13.0forboembolisminpatientsandaRHemon,LoatrixmetalloproteinasesandtissueinhibitorofmetalloproteinasesinatrialandventricularmyocardiuminpatientsCardiol,2006,97:532-537.  [5]XuJ,CuiG,EsmailianF,etal.Atrialextracellularmatrixremodelingandthemaintenanceofatrialfibrillat

8、ion[J].Circulation,2004,109:363-368.  [6

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