长链非编码rnaccat1通过调控线粒体凋亡通路影响结肠癌细胞增殖的机制研究

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1、长链非编码RNACCAT1通过调控线粒体凋亡通路影响结肠癌细胞增殖的机制研究(复旦火学生命科学学院200030)目的：本文旨在明确LncRNACCATl是否通过调控线粒体凋亡通路影响结肠癌细胞增殖。方法：首先通过RT-PCR测定结肠癌癌组织与癌旁组织及多种结肠癌细胞系屮CCAT1的表达量，然后设计合成si-Scramble、si-CATTl分别感染结肠癌细胞SW480,测定感染及对照组的细胞增殖能力、凋亡情况及细胞周期，并应用蛋白印迹法分析与线粒体凋亡通路相关的棊因Caspase-3、Caspase-9、Bax和Bcl-2的

2、蛋A表达。结果：CCAT1在结肠癌癌组织及结肠癌细胞屮的表达显著高于癌旁组织及正常细胞，敲除CATT1后的结肠癌细胞活力K降，凋亡数增加、细胞周期阻滞在G2/M期。敲除CCAT1的癌细胞屮Caspase-3、Caspase-9、Bax的表达显著高于对照组，而Bcl-2明显低于对照组。结论：长链非编码RNACCAT1能通过调控线粒体凋亡通路影响结肠癌细胞增殖。【关键词】结肠癌；LncRNACCATl;线粒体；凋亡；增殖【屮图分类号】R73A2095-1752(2015)35-0371-04Themolecularstudyof

3、LncRNACCAT1influencescoloncancercellproliferationbyregulatingmitochondrialapoptoticpathway【Abstract】Objective:ToconfirmwhetherLncRNACCAT1influencecoloncancercellproliferationbyregulatingmitochondrialapoptoticpathway.Methods:First,mRNAlevelsofLncRNACCAT1incancertiss

4、ues，paratumortissuesandmanycoloncancercelllinesweredetermined.Then,si-Scrambleandsi-CATTlweredesignedsynthetizedandtransfectedoncoloncancercellSW480.Cellproliferation,apoptosisandcellcycleofSW480aftertransfectionandinthecontrolweredetermined.Westernblotassaywasused

5、todetermineproteinexpressionofmitochondrialapoptoticpathwayrelatedgeneCaspase-3、Caspase-9、BaxandBcl-2.Results:mRNAlevelofLncRNACCAT1incancertissueandcoloncancercelllinesweresignificantlyhigherthanparatumortissuesandthenormalcells.ForSW480withknockdownofCATT1,thecel

6、lviabilitydecreasedandapoptosisrateincreasedmarkedly,cellcyclewasresistedatG2/M.ProteinexpressionofCaspase-3、Caspase-9andBaxincellSW480withknockdownofCATT1weremuchhigherthanthecontrolandsi-Scramblegroup,whichtheexpressionofBcl-2wasmuchlower.Conclusion:LncRNACCAT1ca

7、ninfluencecoloncancercellproliferationbyregulatingmitochondrialapoptoticpathway.【Keywords】Coloncancer;LncRNACCAT1;Mitochondria;Apoptosis；Proliferation结肠癌(colorectalcancer)是世界最常见的恶性肿痛之•一。在发达国家，每年接近100万人罹患结直肠癌，其特定疾病死亡率接近33%［1】。目前为止，治疗癌症最有效的方法还是根治手术治疗联合化学疗法，然而将近50%的患者

8、在发现吋己经有转移，甚至只有局部肿瘤未转移的患者［2］。超过1/3的患者在手术治疗之后复发［3】。因此研究结肠癌发病机制，寻找有效的风险因子和治疗靶点己成为当今科学界普遍关注的问题。近年来，人们发现，LncRNAs与肿瘤的发生和发展有着密切的关系。其可能通过染色质修饰复合体来影响表观遗传学