长链非编码RNA MEG3对胃癌细胞增殖的影响研究.doc

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1、长链非编码RNAMEG3对胃癌细胞增殖的影响研究[摘要]目的:探讨长链非编码RNAMEG3在胃癌组织及细胞系中的表达水平，以及过表达MEG3对胃癌细胞增殖能力的影响，并探索其可能的作用机制。方法:用定量PCR（qRT-PCR）技术检测胃癌组织及细胞系中MEG3的表达水平；通过转染pCDNA-MEG3上调MEG3的表达水平，并通过qRT-PCR检测转染效率。用MTT和克隆形成实验检测上调MEG3的水平对BGC-823细胞和MGC-803细胞的增殖能力的影响，用Westernblot实验检测这两种细胞中上调MEG3的水平对p53蛋白的表达水平的影响。结果:相比正常胃组织及细胞，

2、在胃癌组织和细胞中MEG3的表达出现显著下调，SGC7901、MGC-803和BGC-823细胞中MEG3的表达水平分别是正常胃上皮细胞GES-1中的73.6%、42.0%和27.1%（p<0.05）。BGC-823细胞和MGC-803细胞中转染pCDNA-MEG3能显著上调MEG3的表达，MEG3的表达水平分别为对照组的252倍和311倍（p<0.05）；MTT和克隆形成实验显示，上调MEG3的表达能降低BGC-823细胞和MGC-803细胞的增殖能力。Westernblot实验显示，转染了pCDNA-MEG3的MGC-803和BGC-823细胞中p53的表达相较对照组中

3、显著增加。结论:胃癌组织及细胞中MEG3的表达下调，且这可能通过抑制p53蛋白的激活从而促进胃癌细胞增殖，影响胃癌的发生和发展。[关键字]胃癌；长链非编码RNA；MEG3；细胞增殖；p53Down-regulatedlongnoncodingRNAMEG3promotescellproliferationingastriccancer[Abstract]Objective:ToinvestigatetheexpressionleveloflongnoncodingRNAMEG3ingastriccancertissuesandcelllines,andtostudythee

4、ffectofup-regulationofMEG3expressionongastriccancercellsproliferationanditspossiblemechanism.Methods:Quantitativereverse-transcriptionPCRwasperformedtodetecttherelativeexpressionofMEG3ingastriccancercelllinesandtissues.pCDNA-MEG3wastransfectedintoBGC-823cellsandMGC-803cellstodown-regulateM

5、EG3expression,andquantitativereverse-transcriptionPCRwasusedtotestthetransfectionefficiency.MTTandcolonyformationassayswereperformedtodetecttheeffectofMEG3ongastriccancercellsproliferation.Westernblotassaywasusedtotesttheexpressionlevelofp53proteininMGC-803cellsandBGC-823cellstransfectedwi

6、thpCDNA-MEG3respectively,comparedtothosewithemptyvector.Results:ThisstudyshowedthatMEG3waslowlyexpressedbothingastriccancersamplesandcelllinescomparedwiththeircorrespondingnormaltissuesandcelllines.TheexpressionlevelofMEG3inSGC7901,MGC-803andBGC-823cellswere73.6%,42.0%and27.1%ofthatinnorma

7、lgastricepitheliumcellGES-1,respectively(p<0.05).TransfectionofpCDNA-MEG3couldsignificantlyincreaseits’expressioninBGC-823cellsandMGC-803cellsrespectively,252and311foldscomparedwithcontrolcells(p<0.05).MTTandcolonyformationassaysindicatedthatup-regulatedMEG3co