长链非编码RNA PVT1沉默对K562细胞增殖的影响 优先出版.pdf

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1、网络出版时间:2017-05-0516:38:30广东网络出版地址:医学2017年5月http://kns.cnki.net/kcms/detail/44.1192.r.20170505.1638.010.html第38卷第10期GuangdongMedicalJournalMay.2017,Vol.38,No.10·1473·长链非编码RNAPVT1沉默对K562细胞增殖的影响11211△1郑婵丽,刘革修,陈盛亭,张洹,何冬梅,李扬秋12暨南大学医学院血液病研究室(广东广州510632);暨南大学附属第一医院输血科(广东广州510630)【摘要】目的筛

2、选靶向抑制长链非编码RNA(lncRNA)浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)的小干扰RNA(siRNA),并探讨其对人白血病细胞株K562细胞增殖的影响。方法针对PVT1设计合成PVT1-siRNA1、2、3、4序列及无关对照siRNA(SC-siRNA)序列。利用HiperFect转染试剂将各条siRNA转入K562细胞,实验依此分为siRNA1组、siRNA2组、siRNA3组、siRNA4组和SC-siRNA组,并设空转组和细胞组。转染后用实时定量RT-PCR检测细胞中PVT1RNA的相对表达情况,用CCK8法检测细胞增殖情况,用流式细胞仪检测细胞周

3、期。结果转染24、48h后siRNA4组PVT1RNA水平下降,与SC-siRNA组、空转组和细胞组相比差异有统计学意义(P<001),而siRNA1组、siRNA2组和siRNA3组PVT1RNA水平与细胞组相比差异无统计学意义(P>005);转染24、48、72h后siRNA4组细胞增殖抑制率都增加,与SC-siRNA组和空转组相比差异均有统计学意义(P<001);转染48、72h后siRNA4组出现了G1期阻滞,G1期细胞比例增加,与SC-siRNA组、空转组和细胞组相比差异有统计学意义(P<001)。结论PVT1-siRNA可通过阻滞细胞周

4、期的进展而抑制K562细胞的增殖。【关键词】长链非编码RNA;PVT1;小干扰RNA;K562细胞;细胞增殖;细胞周期☆Theeffectoflongnon-codingRNAPVT1silencingonK562cellproliferation.ZHENGChan-li,LIUGe-☆xiu,CHENSheng-ting,ZHANGHuan,HEDong-mei,LIYang-qiu.InstitutionofHematology,MedicalCollege,JinanUniversity,Guangzhou510632,Guangdong,Chin

5、aCorrespondingauthor:HEDong-mei.E-mail:thedm@jnu.edu.cn【Abstract】ObjectiveToscreentheeffectivesmallinterferingRNAs(siRNAs)targetingagainstlongnon-codingRNA(lncRNA)PVT1(plasmacytomavarianttranslocation1),andtoobserveitsinfluenceontheproliferationofhumanleukemiccellK562.MethodsFou

6、rsiRNAsequencestargetingagainstPVT1(PVT1-siRNA1,2,3,4)andscramblecontrolsequence(SC-siRNA)weredesignedandsynthesized.UsingHiperFecttransfectionreagent,allofthesiRNAsweretransfectedintoK562cells.TheexperimentwasdividedintosiRNA1group,siRNA2group,siRNA3group,siRNA4group,SC-siRNAgrou

7、p,idlinggroupanduntransfectedgroup.ThePVT1RNAexpressionlevelwasassessedbyreal-timeRT-PCR.ThecellproliferationwasdeterminedbyCCK8assayandthecellcyclewasdetectedbyFlowcytometry.ResultsTheexpressionlevelofPVT1RNAofK562cellsinsiRNA4groupwassignificantlyreducedcomparedwithSC-siRNAgrou

8、p,idlinggroupanduntransfectedgrou

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1、网络出版时间:2017-05-0516:38:30广东网络出版地址:医学2017年5月http://kns.cnki.net/kcms/detail/44.1192.r.20170505.1638.010.html第38卷第10期GuangdongMedicalJournalMay.2017,Vol.38,No.10·1473·长链非编码RNAPVT1沉默对K562细胞增殖的影响11211△1郑婵丽,刘革修,陈盛亭,张洹,何冬梅,李扬秋12暨南大学医学院血液病研究室(广东广州510632);暨南大学附属第一医院输血科(广东广州510630)【摘要】目的筛

2、选靶向抑制长链非编码RNA(lncRNA)浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)的小干扰RNA(siRNA),并探讨其对人白血病细胞株K562细胞增殖的影响。方法针对PVT1设计合成PVT1-siRNA1、2、3、4序列及无关对照siRNA(SC-siRNA)序列。利用HiperFect转染试剂将各条siRNA转入K562细胞,实验依此分为siRNA1组、siRNA2组、siRNA3组、siRNA4组和SC-siRNA组,并设空转组和细胞组。转染后用实时定量RT-PCR检测细胞中PVT1RNA的相对表达情况,用CCK8法检测细胞增殖情况,用流式细胞仪检测细胞周

3、期。结果转染24、48h后siRNA4组PVT1RNA水平下降,与SC-siRNA组、空转组和细胞组相比差异有统计学意义(P<001),而siRNA1组、siRNA2组和siRNA3组PVT1RNA水平与细胞组相比差异无统计学意义(P>005);转染24、48、72h后siRNA4组细胞增殖抑制率都增加,与SC-siRNA组和空转组相比差异均有统计学意义(P<001);转染48、72h后siRNA4组出现了G1期阻滞,G1期细胞比例增加,与SC-siRNA组、空转组和细胞组相比差异有统计学意义(P<001)。结论PVT1-siRNA可通过阻滞细胞周

4、期的进展而抑制K562细胞的增殖。【关键词】长链非编码RNA;PVT1;小干扰RNA;K562细胞;细胞增殖;细胞周期☆Theeffectoflongnon-codingRNAPVT1silencingonK562cellproliferation.ZHENGChan-li,LIUGe-☆xiu,CHENSheng-ting,ZHANGHuan,HEDong-mei,LIYang-qiu.InstitutionofHematology,MedicalCollege,JinanUniversity,Guangzhou510632,Guangdong,Chin

5、aCorrespondingauthor:HEDong-mei.E-mail:thedm@jnu.edu.cn【Abstract】ObjectiveToscreentheeffectivesmallinterferingRNAs(siRNAs)targetingagainstlongnon-codingRNA(lncRNA)PVT1(plasmacytomavarianttranslocation1),andtoobserveitsinfluenceontheproliferationofhumanleukemiccellK562.MethodsFou

6、rsiRNAsequencestargetingagainstPVT1(PVT1-siRNA1,2,3,4)andscramblecontrolsequence(SC-siRNA)weredesignedandsynthesized.UsingHiperFecttransfectionreagent,allofthesiRNAsweretransfectedintoK562cells.TheexperimentwasdividedintosiRNA1group,siRNA2group,siRNA3group,siRNA4group,SC-siRNAgrou

7、p,idlinggroupanduntransfectedgroup.ThePVT1RNAexpressionlevelwasassessedbyreal-timeRT-PCR.ThecellproliferationwasdeterminedbyCCK8assayandthecellcyclewasdetectedbyFlowcytometry.ResultsTheexpressionlevelofPVT1RNAofK562cellsinsiRNA4groupwassignificantlyreducedcomparedwithSC-siRNAgrou

8、p,idlinggroupanduntransfectedgrou

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