长链非编码RNA PVT1沉默对K562细胞增殖的影响 优先出版.pdf

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1、网络出版时间：2017-05-0516:38:30广东网络出版地址：医学２０１７年５月http://kns.cnki.net/kcms/detail/44.1192.r.20170505.1638.010.html第３８卷第１０期ＧｕａｎｇｄｏｎｇＭｅｄｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌＭａｙ．２０１７，Ｖｏｌ．３８，Ｎｏ．１０·１４７３·长链非编码ＲＮＡＰＶＴ１沉默对Ｋ５６２细胞增殖的影响１１２１１△１郑婵丽，刘革修，陈盛亭，张洹，何冬梅，李扬秋１２暨南大学医学院血液病研究室（广东广州５１０６３２）；暨南大学附属第一医院输血科（广东广州５１０６３０）【摘要】目的筛

2、选靶向抑制长链非编码ＲＮＡ（ｌｎｃＲＮＡ）浆细胞瘤转化迁移基因１（ＰＶＴ１）的小干扰ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ），并探讨其对人白血病细胞株Ｋ５６２细胞增殖的影响。方法针对ＰＶＴ１设计合成ＰＶＴ１－ｓｉＲＮＡ１、２、３、４序列及无关对照ｓｉＲＮＡ（ＳＣ－ｓｉＲＮＡ）序列。利用ＨｉｐｅｒＦｅｃｔ转染试剂将各条ｓｉＲＮＡ转入Ｋ５６２细胞，实验依此分为ｓｉＲＮＡ１组、ｓｉＲＮＡ２组、ｓｉＲＮＡ３组、ｓｉＲＮＡ４组和ＳＣ－ｓｉＲＮＡ组，并设空转组和细胞组。转染后用实时定量ＲＴ－ＰＣＲ检测细胞中ＰＶＴ１ＲＮＡ的相对表达情况，用ＣＣＫ８法检测细胞增殖情况，用流式细胞仪检测细胞周

3、期。结果转染２４、４８ｈ后ｓｉＲＮＡ４组ＰＶＴ１ＲＮＡ水平下降，与ＳＣ－ｓｉＲＮＡ组、空转组和细胞组相比差异有统计学意义（Ｐ＜００１），而ｓｉＲＮＡ１组、ｓｉＲＮＡ２组和ｓｉＲＮＡ３组ＰＶＴ１ＲＮＡ水平与细胞组相比差异无统计学意义（Ｐ＞００５）；转染２４、４８、７２ｈ后ｓｉＲＮＡ４组细胞增殖抑制率都增加，与ＳＣ－ｓｉＲＮＡ组和空转组相比差异均有统计学意义（Ｐ＜００１）；转染４８、７２ｈ后ｓｉＲＮＡ４组出现了Ｇ１期阻滞，Ｇ１期细胞比例增加，与ＳＣ－ｓｉＲＮＡ组、空转组和细胞组相比差异有统计学意义（Ｐ＜００１）。结论ＰＶＴ１－ｓｉＲＮＡ可通过阻滞细胞周

4、期的进展而抑制Ｋ５６２细胞的增殖。【关键词】长链非编码ＲＮＡ；ＰＶＴ１；小干扰ＲＮＡ；Ｋ５６２细胞；细胞增殖；细胞周期☆Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｌｏｎｇｎｏｎ－ｃｏｄｉｎｇＲＮＡＰＶＴ１ｓｉｌｅｎｃｉｎｇｏｎＫ５６２ｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ．ＺＨＥＮＧＣｈａｎ－ｌｉ，ＬＩＵＧｅ－☆ｘｉｕ，ＣＨＥＮＳｈｅｎｇ－ｔｉｎｇ，ＺＨＡＮＧＨｕａｎ，ＨＥＤｏｎｇ－ｍｅｉ，ＬＩＹａｎｇ－ｑｉｕ．ＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎｏｆＨｅｍａｔｏｌｏｇｙ，ＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，ＪｉｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０６３２，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ，Ｃｈｉｎ

5、ａＣｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＨＥＤｏｎｇ－ｍｅｉ．Ｅ－ｍａｉｌ：ｔｈｅｄｍ＠ｊｎｕ．ｅｄｕ．ｃｎ【Ａｂｓｔｒａｃｔ】ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｓｃｒｅｅｎｔｈｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｓｍａｌｌｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇＲＮＡｓ（ｓｉＲＮＡｓ）ｔａｒｇｅｔｉｎｇａｇａｉｎｓｔｌｏｎｇｎｏｎ－ｃｏｄｉｎｇＲＮＡ（ｌｎｃＲＮＡ）ＰＶＴ１（ｐｌａｓｍａｃｙｔｏｍａｖａｒｉａｎｔｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ１），ａｎｄｔｏｏｂｓｅｒｖｅｉｔｓｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｌｅｕｋｅｍｉｃｃｅｌｌＫ５６２．ＭｅｔｈｏｄｓＦｏｕ

6、ｒｓｉＲＮＡｓｅｑｕｅｎｃｅｓｔａｒｇｅｔｉｎｇａｇａｉｎｓｔＰＶＴ１（ＰＶＴ１－ｓｉＲＮＡ１，２，３，４）ａｎｄｓｃｒａｍｂｌｅｃｏｎｔｒｏｌｓｅｑｕｅｎｃｅ（ＳＣ－ｓｉＲＮＡ）ｗｅｒｅｄｅｓｉｇｎｅｄａｎｄｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄ．ＵｓｉｎｇＨｉｐｅｒＦｅｃｔｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎｒｅａｇｅｎｔ，ａｌｌｏｆｔｈｅｓｉＲＮＡｓｗｅｒｅｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄｉｎｔｏＫ５６２ｃｅｌｌｓ．ＴｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｗａｓｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｓｉＲＮＡ１ｇｒｏｕｐ，ｓｉＲＮＡ２ｇｒｏｕｐ，ｓｉＲＮＡ３ｇｒｏｕｐ，ｓｉＲＮＡ４ｇｒｏｕｐ，ＳＣ－ｓｉＲＮＡｇｒｏｕ

7、ｐ，ｉｄｌｉｎｇｇｒｏｕｐａｎｄｕｎｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄｇｒｏｕｐ．ＴｈｅＰＶＴ１ＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｗａｓａｓｓｅｓｓｅｄｂｙｒｅａｌ－ｔｉｍｅＲＴ－ＰＣＲ．ＴｈｅｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＣＣＫ８ａｓｓａｙａｎｄｔｈｅｃｅｌｌｃｙｃｌｅｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＦｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆＰＶＴ１ＲＮＡｏｆＫ５６２ｃｅｌｌｓｉｎｓｉＲＮＡ４ｇｒｏｕｐｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｒｅｄｕｃｅｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＳＣ－ｓｉＲＮＡｇｒｏｕ

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