微柱凝胶技术检测在新生儿abo溶血病的应用

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1、微柱凝胶技术检测在新生儿ABO溶血病的应用林建锋(广东省云浮罗定市妇幼保健院检验科527200)【中图分类号】R722.18【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2013)04-0097-02【摘要】目的釆用微柱凝胶技术(MGT)进行新生儿溶血病(HDN-ABO)血清学检测,对新生儿直接试验、游离试验、放散试验的结果进行分析。方法采用微柱凝胶技术对1089例疑为HDN的患儿进行检测，包括直抗试验、游离试验、放散试验。结果采用MGT法检查了1089例疑为HDN的患儿送检血样，结果确诊ABO血型系统HDN64例,阳性率5.88%,可疑HDN

2、26例，阴性结果999例，3项阳性的有15例，游离和放散试验均阳性的有49例，仅放散试验阳性的有64例。结论微柱凝胶技术用于新生儿溶血病的检测，方法操作简单，使用方便,标木用量少，敏感性高和特异性强，阴阳性结果明显，判断结果标准，结果易保存等优点。可成为医院实验室常规检测方法。实验室能为临床快速准确提供试验报告，有利于患儿的早期诊断、早期治疗，对提高新生儿健康水平有很重要的意义。【关键词】微柱凝胶技术新生儿溶血病(HDN-ABO)微柱凝胶技术(MGT)是一种新的改良抗球蛋白试验技术，是近年发展起来的一种新型免疫检测方法，在临床上己逐渐成为常规的红

3、细胞血型血清学检测技术，该技术已在国内、外应用于交叉配血、血型鉴定以及不完全抗体的测定。我科于2009年1月至2012年1月，采用MGT对HDN-ABO进行了检测，收到良好效果，报告如下：1材料与方法1.1样木：标木为我院新生儿科1089例，出生7d内疑为HDN患儿血样1.2仪器与试剂1.2.1仪器：检验医学多功能离心机、免疫微柱孵育器(由中山市生科试剂仪器有限公司生产)、台式低速离心机等1.2.2试剂：抗人球蛋白检测卡、A、B、0标准红细胞（由中山市生科试剂仪器有限公司生产）1.3实验方法1.3.1样本来源、要求2009年1月至2012年1月住

4、在我院新生儿科患儿（母亲是0型，患儿是A型或B型）出生后1-3天皮肤巩膜黄染，血红蛋白降低，血清胆红素高于正常值，对患儿采集EDTA抗凝血3毫升共1089份标本，本实验室对所送标本必须在接到后6小内检查完毕。1.3.2样本准备13.2.1放散液标本离心，2000g×10min，防止纤维蛋白干扰反皮结果。取1-2ML体积的压积血用盐水洗涤4次，最后一次尽量取净，然后和等量的6%牛血清白蛋白混匀，置于56°C孵育10分钟，期间摇动二次左右，迅速取出2500rPm离心2-3分钟，立即取上清。即热放散液。13.2.2红细胞标本的制备配制0.5

5、%—1%红细胞生理盐水悬液。1.3.3配套试剂抗人球蛋白检测卡、标准红细胞A、B、0。［实验步骤］1.3.4游离试验和放散试验1.3.4.1试剂卡室温平衡离心一次，标记编号。13.4.21-3孔分别加入50UL新生儿血清,4-6孔分别加入50UL新生儿红细胞放散液。1.3.4.3将A型红细胞悬液50ul分别加入1号、4号；将B型红细胞悬液50ul分别加入2号、5号；将0型红细胞悬液分别加入3号6号孔中。1.3.4.4用专用孵育器37°C孵育15分钟。1.3.4.5用专用离心机离心5分钟（900r/min2分钟.1500r/min3分钟），判定结果

6、。1.3.5直抗试验1.3.5.1试剂卡室温平衡离心一次，标记编号。13.5.2在其中一孔内加入患儿0.5%—1%红细胞生理盐水悬液50μl,使用专用离心机离心5min，(900r/min2min,1500r/min3min),取出内眼判定结果。1.4［结果判定］阳性结果：红细胞凝集在胶表面或胶中(结果大于等于1+),为阳性反应附表：新生儿溶血病血清学诊断标准我科自2009年1月至2012年1月，采用MGT法检查了1089例疑为HDN的患儿送检血样，结果确诊ABO血型系统HDN64例，阳性率5.88%,可疑HDN26例，阴性结果999例，3

7、项阳性的有15例，游离和放散试验均阳性的奋49例，仅放散试验阳性的有64例。3讨论HDN起源于胎儿从父亲方面继承了一些母亲没有的红细胞抗原，这些抗原遭到母亲免疫抗体的攻击，从而使胎儿红细胞遭到破坏，出现新生儿黄疽、贫血、水肿、肝脾肿大，其至死胎、新生儿死亡等溶血病的症状和合并症［2】。其中ABO血型系统所致的HDN最为常见,其次为Rh血型系统，Kell、MNS等血型系统造成HDN者罕见。0前，在我国诊断新生儿溶血病的实验室检查主要是三项试验(直接抗球蛋白试验、游离抗体试验、放散试验)［1］，直抗阳性在HDN诊断中有着非常重要的作用，通过直抗试验，

8、我们可以区分ABO新生儿溶血病和其他血型系统引起的新生儿溶血病，ABO-HDN的直抗试验都很弱，严重的ABO-HDN也只能是呈现弱的阳性