不同经穴针刺对脑卒中偏瘫痉挛大鼠h反射的影响研究

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1、不同经穴针刺对脑卒中偏瘫痉挛大鼠H反射的影响研宄赵佳辉桑鹏王顺黑龙江省中医研究院黑龙江哈尔滨150036目的：观察针刺不同经穴对脑卒中偏瘫痉挛状态大鼠H反射的影响。方法：采用线栓法制备大鼠模型，造模成功后第3天开始治疗，连续治疗14天，每日一次；釆用神经电生理H反射评价模型和治疗效果；结果：阳经针刺组显著抑制大鼠H反射的出现，和阴经针刺组、阴阳经针刺组、巴氯芬组、MCPG组比较均有显著性差异(P<0.01)。结论：阳经针刺对脑卒中偏瘫痉挛状态的效果较好。关键词：脑卒中；痉挛；H反射脑卒中后约有70-80%的病人遗留有不同程度的功能障碍，其中痉挛发牛

2、.率最高，是影响患者生存质量的主要原因。在脑卒中恢复过程中，痉挛可出现在痉挛期和联带运动期，是脑卒中治疗中需要解决的重要问题。针刺治疗脑卒中后痉挛状态疗效显著，但疗效未见客观指标评价，木研宄从不同经穴针刺对脑卒中痉挛大鼠H反射的影响进行研宄和探讨，以探求不同针刺方法对痉挛的作用疗效。1.实验材料与方法1.1.1主要试剂及仪器Trizol试剂武汉德生物工程有限公司；华佗牌针灸针苏州暖疗用品厂；德国Eppendorf移液器；上海维迪Keypoint4多功能肌电诱发电位仪；上海华谊仪器制造厂G6805-2Α型电针治疗仪；DGB/20-00台式干燥机

3、上海天庆实验设备厂厦门麦克奥；高速冷冻离心机美国Beckman公司；PCR仪美国PE公司；梯度PCR仪德国Biometro公司；台式离心机5417C德国Eppendorf公司；巴氯芬武汉远程科技发展有限公司；MCPG武汉远程科技发展有限公司。1.1.2动物健康Wistar大鼠200只，雄性，体重250-300g，长春高新实验动物中心提供，动物许可证号:SCXK-(吉)2003-0004o1.2实验动物分组将动物随机分为8组，每组20只，分别为：空白组、模型组、假手术组、阳经针刺组、阴经针刺组、阴阳经针刺组、GABAB激动剂组（巴氯芬组）和mGluRl桔抗

4、剂组（MCPG组）。1.3模型制作方法采用改良线栓法［1］复制人鼠人脑中动脉梗塞模型。1.4动物入选标准与选穴1.4.1大鼠均在再灌注3h苏醒后进行评分，评分按Zea-lOnga［2］报道的4分制进行。评分在1〜3分的大鼠认为模型制作成功，纳入实验分组。具体评分标准见表1。1.4.2选穴按照李忠仁主编的《实验针灸学》附录三常用实验动物针灸穴位取穴：阳陵泉：距后三里上外侧5mm。足三里：膝关节后外侧，在腓骨小头下约5mm处。太溪：内踝与跟结节之间凹陷中。三阴交：后肢内踝尖直上10mm。1.5治疗方法阳经针刺组：取大鼠右侧阳陵泉、足三里。阴经针刺组：取大鼠右

5、侧太溪、三阴交。阴阳经针刺组：取大鼠右侧阳陵泉、足三里、太溪、三阴交。空白组、假手术组和模型组只捆绑固定，不针刺。取大鼠定穴消毒后常规针刺，接电针治疗仪，调整好刺激参数（刺激频率为100Hz的连续波，波宽0.3ms），以动物右侧下肢出现有节律的收缩、颤动为度。阳经针刺组、阴经针刺组、阴阳经针刺组每日针刺30分钟；GABAB激动剂组每日腹腔注射巴氯芬；mGluRl拮抗剂组每日腹腔注射MCPG。各组治疗均从模型复制成功后第三天开始，每天治疗一次,连续14天。1.6观察指标及检测方法1.6.1电生理检测记录方法按30mg/kg剂量腹腔注射10%水合氯酸作动物麻

6、醉，麻醉后取俯卧位固定动物。沿内踝至大转子连线切开皮肤、皮下，钝性分离臀大肌，暴露坐骨神经,以钩状保护电极悬吊坐骨神经；将钩状保护电极连接到维迪Keypoint4多功能肌电诱发电位仪刺激输出端；另以同心针电极插入腓肠肌内侧头，地线置于尾部。1.6.2H反射记录采用单次（single）电刺激诱发H波，由小到大调节电刺激强度（0〜2mA）直至H波出现，再逐渐增强刺激使M波出现，H波变小，通过仪器鼠标定格测得H波潜伏期。灵敏度0.5〜1.0mV/Div，吋间Ims/Div,通频带0.01Hz〜5kHz,刺激率1Hz，刺激脉宽0.1ms。1.6.3H反射恢复曲线

7、描记调节单次电刺激强度至H波与M波波幅接近，再改用成对刺激（double）诱发H波，第一次刺激为条件刺激（S1）,第二次刺激为测试刺激（S2），成对刺激间隔分别为1ms、5ms、10ms、50ms、100ms、500ms、1000ms。当刺激间隔较短吋，S2引起的脊髓前角运动神经元兴奋落在S1引起兴奋后的不应期内，所以S2所诱发出的H波幅度较低，H波与M波的比值（H/M）较低；随着刺激间隔延长H波逐渐增大，H/M也增大。以刺激间隔吋间为横坐标，H/M为纵坐标可描记出一条曲线，称为H反射恢复曲线。当上运动神经元损害，对下运动神经元失抑制吋，曲线上移。灵敏0

8、.5〜1.0mV/Div，分析吋间Ims/Div，通频带0.01Hz〜5kHz，