青稞脂质转运蛋白基因blt4.9的克隆及其对非生物胁迫的响应

《青稞脂质转运蛋白基因blt4.9的克隆及其对非生物胁迫的响应》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、作物学报ACTAAGRONOMICASINICA2016,42(3):399406http://zwxb.chinacrops.org/ISSN0496-3490;CODENTSHPA9E-mail:xbzw@chinajournal.net.cnDOI:10.3724/SP.J.1006.2016.00399青稞脂质转运蛋白基因blt4.9的克隆及其对非生物胁迫的响应*姚晓华吴昆仑1青海省农林科学院/青海省青稞遗传育种重点实验室/青海省高原作物种质资源创新与利用国家重点实验室培育基地,青海西宁810016摘要:为了解脂质转运蛋白基因在青稞中的功能,以青稞品种昆仑

2、12为材料,利用同源克隆得到青稞blt4.9基因序列(GenBank登录号为KU170187),该基因的cDNA序列全长720bp,开放阅读框长348bp,编码115个氨基酸残基,相对分子质量为11.2kD,理论等电点9.04,不稳定系数为28.41,是一个稳定的蛋白质。blt4.9编码的蛋白绝大多数属于疏水区,没有较大的亲水区。序列比对显示,该基因与大麦blt4.9基因编码蛋白的同源性最高(98.3%)。1Real-timePCR分析结果显示,blt4.9基因在20%~30%PEG-6000、4℃以及50molLABA处理后表达量显著增加,且在抗逆性强的青稞品

3、种(旱地紫)中的表达量高于在抗逆性弱的品种(大麻)中,推测该基因与青稞的抗逆性有关。该研究结果为利用青稞脂质转运蛋白基因改良青稞抗逆性奠定了基础。关键词:青稞;blt4.9基因;克隆;非生物胁迫;基因表达量Isolationofblt4.9GeneEncodingLTPProteininHullessBarleyandItsRe-sponsetoAbioticStresses*YAOXiao-HuaandWUKun-LunQinghaiAcademyofAgricultureandForestrySciences/QinghaiProvincialKeyLabora

4、toryofHullessBarleyGeneticsandBreeding/StateKeyLaboratoryBreedingBaseforInnovationandUtilizationofPlateauCropGermplasm,Xining810016,ChinaAbstract:Higherplantlipidtransferprotein(LTP)isaclassofsmallmolecularweightalkalinesingleproteinthatcantransferphospholipidsbetweenbiomembraneandform

5、thebiomembraneincells.Theobjectiveofthisstudywastounderstandthefunc-tionofLTPgeneinhullessbarley(HordeumvulgareL.var.nudumHook.f.).ThecDNAsequenceoftheLTPgene,blt4.9(Gen-BankaccessionnumberKU170187),wasclonedfromhullessbarleyvarietyKunlun12.Thefulllengthofblt4.9cDNAis720bpincluding348b

6、pofopenreadingframeandencodes115aminoacids.Theencodingproductisastableproteinwithamolecularweightof11.2kD,theoreticalpIof9.04,andinstabilitycoefficientof28.41.ThisproteinisrichinGly,Ala,Leu,andValaminoacidsexcludingTrp,Glu,andPheandsimilartoproteinsencodedbyotherLTPgenes.Sequencealignm

7、entindicatedhighsimila-rity(98.3%)ofproteinencodedbyblt4.9fromhullessbarleyandbarley(HordeumvulgareL.).TheReal-timePCRassayshowed1thatblt4.9wasup-regulatedby20–30%PEG-6000,4ºCand50molLABAandtheexpressionlevelwashigherinthemosttolerantvarietyHandizithaninthemostsusceptiblevarietyDam