大豆脂质转运蛋白基因gmltp3特征的分析

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3、其基因的时空表达水平直接影响脂肪酸合成相关酶的活性和油的含量。本研究将芝麻的SiLTP3氨基酸序列与大豆中的核苷酸序列进行blast比对，发现大豆中含有与芝麻该基因同源性高达94％的序列，克隆了该基因，命名为GmLTP3。通过GmLTP3的核苷酸序列推测出其氨基酸序列，利用软件进行多重序列比对和系统发育树构建，发现该氨基酸序列与已确定功能的大豆脂质转运蛋白同源性高达99％，与蒺藜苜蓿和巴旦杏的进化距离最近。采用实时荧光定量PCR法对GmLTP3基因进行定量检测，组织表达分析表明，GmLTP3属于组成型表达基因，在大豆的根、茎、叶、花、萌

4、发的种子中均有表达，并且在花蕾、茎和萌发的种子中表达量较高，在根、叶中表达量较低。非生物胁迫诱导表达分析表明，GmLTP3基因能够对IAA、ABA、PEG、NaCl和冷害作出应答。胁迫处理2h后，GmLTP3表达量均有下调趋势；胁迫处理12h后，IAA、ABA、PEG、NaCI诱导GmLTP3的表达量均有不同程度的上调，冷害处理则继续下调表达量。关键词：大豆；脂质转运蛋白；非生物胁迫；表达分析AbstractABSTRACTLipidtransferprotdns(Lt-ps)playimportantrolesinlipidtrans

5、portation,plantreproductionanddevelopmentandadaptationtoadverseenvironmentalstresses．TheactivityoffattyacidbiosynthesisenzymeandoilcontentwerecontrolledbythespatialandtemporalexpressionlevelofLTPgene．Inthisstudy,agenewhichhave94％identitywiththeSiLTP3wasclonedandnamedasGm

6、LTP3．GmLTP3encodesaLTPthathave99％identitywitlltheknownGlycinemaxlipidtransferprotein．ThetranscriptionallevelofGmLTP3Wasquantitativelydeterminedusingrealtime-PCR,itWasexpressedinalmostallthetissues，suchasroot，stem，leave，flowerandseed．ItWashighlyexpressedinalabastrum，7一day

7、soldstemand3-daysgerminatingseed，whileitWaslowlyexpressedinrootandleave．Whentreatedbyabioticstress，suchasIAA，ABA，PEGandNaCl，theexpressionlevelWasdown··regulatedaftertreated2hourslater,butWasup·-regulatedaftertreated12hourslater,whileitisdown—regulatedconsistentlyaftertre

8、atedbycoldstress．Keywords：Glycinemax；Lipid—transferproteins；Abioticstress；Expressionanalysis目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯