大豆脂质转运蛋白基因GmLTP3的特征分析-论文.pdf

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1、第32卷第1期大豆科学V0l_32NO.12013正2月S0YBEANSCIENCEFeb.20l3大豆脂质转运蛋白基因GmLTP3的特征分析李彩云,余永亮,杨红旗,董薇,田保明,梁慧珍(1.郑州大学生物工程系,河南郑州450001;2.河南省农业科学院芝麻研究中心,河南郑州45~2)摘要:将芝麻的SiLTP3序列与大豆的核苷酸序列进行blast比对,发现大豆含有与芝麻该基因同源性高达94%的序列,克隆该基因并命名为GmLTP3。通过GmLTP3的核苷酸序列推测出其氨基酸序列,利用软件进行多重序列比对和系统发育树构建,发现该氨基酸序列与已确定功能的大豆脂质转运蛋白同源性高达99%,与蒺藜菖蓿和

2、巴旦杏的进化距离最近。采用实时荧光定量PCR法对GmLTP3基因进行定量检测,组织表达分析表明,GmLTP3属于组成性表达基因,在大豆的根、茎、叶、花、萌发的种子中均有表达,并且在花蕾、茎和萌发的种子中表达量较高,在根、叶中表达量较低。非生物胁迫诱导表达分析表明,GmLTP3基因能够对IAA、ABA、PEG、NaC1和冷害作出应答。胁迫处理2h后,GmLTP3表达量均有下调趋势;胁迫处理12h后,IAA、ABA、PEG、NaC1诱导GmLTP3的表达量均有不同程度的上调,冷害处理则继续下调表达量。关键词:大豆;脂质转运蛋白;非生物胁迫;表达分析中图分类号:s565.1文献标识码:A文章编号:1

3、000-9841(2013)01-0008434CharacteristicsofaLipid-transferProteinGeneGmLTP3inGlycinemaxLICai.yun,YUYong—liang,YANGHong.qi,DONGWei,TIANBao—ruing,LIANGHui—zhen(1.DepartmentofBioengineering,ZhengzhouUniversity,ZhengzhOU450001,Henan;2.SesameResearchCenter,HenanAcademyofAgriculturalSci—ences,Zhengzhou45000

4、2,Henan,China)Abstract:Inthisstudy.agenewhichhave94%identitywiththeSiL3WasclonedandnamedasCanL")3.GmLZen—codesalipid-transferprotein(LTP)thathave99%identitywiththeknownGlycinelipidtransferprotein.Thetranscrip—tionallevelofGmL"Wasquantitativelydeterminedusingrealtime.PCR.itwasexpressedinalmostallthet

5、issues.suchasroot,stem,leave,flowerandseed.ItWashighlyexpressedinalabastrum,7-daysoldstemand3-daysgerminatingseed,WhileitWaslowlyexpressedinrootandleave.Whentreatedbyabioticstress。suchasIAA。ABA.PEGandNaC1.theexpressionlevelWasdown-regulatedaftertreated2hours,butWasup-regulatedaftertreated12hours,whi

6、leitWasdown—regulatedconsistentlyaftertreatedbycoldstress.Keywords:Glycine,愀;Lipid—transferproteins;Abioticstress;Expressionanalysis在植物中,脂质是结构膜脂的基本元件、生物外,5。目前研究认为,Ps主要参与转运角质单能量贮藏的载体、植物自身防护物质(腊质)和植物体和蜡质的形成口引、植物有性生殖¨“、花粉发逆境反应代谢中的前体信号分子,同时也是种子萌育⋯、信号转导、对生物和非生物胁迫的应答等发的必需物质之一。脂质转运蛋白(Lipidtransfer多种生物学功能。不

7、同物种LTP基因的表达模式proteins,LTPs)在体外能够可逆地结合和转运多种迥异,在拟南芥和水稻等植物基因组中存在多种亚类型的疏水分子,如脂肪酸、磷脂、糖脂、乙酰辅酶型结构,这表明LTPs的多个异构体具有不同的生A/类固醇、芳香衍生物及角质单体等脂类复合物学功能。物⋯。高等植物中LTPs含量较高,占可溶性蛋白大豆油脂是大豆的主要经济产品之一。近年的4%左右。研究表明LTP分子的三维结构具有

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