牛奶中蛋白质测定过程

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1、测定牛奶中的蛋白质含量牛奶是日常生活中一种营养价值高的食物,其营养价值主要集中在蛋白质上。蛋白质能促进人体心血管的健康,而且能改善睡眠状况,控制高血压,增强身体的免疫机能。实验目的:测定牛奶中蛋白质含量实验试剂:鲜牛奶一袋、浓硫酸、NaOH(40%)、硫酸标定液(0.01mol/L)、H3BO3(2%)、混合指示液(甲基红、溴甲酚绿)K2SO4、CuSO4·5H2O作做催化剂实验主要仪器:消化管、锥形瓶、天平、凯氏微量定氮仪一套等实验方法:凯氏定氮法,样品经加硫酸消化使蛋白质分解,其中氮素与硫酸化合成硫酸铵。然后在凯氏定氮器中加碱

2、蒸馏使氨游离,用硼酸液吸收后,再用硫酸滴定,根据酸的消耗量,再乘以一定的数值(6.25)即为蛋白含量。原理:蛋白质是含氮的有机化合物。由于蛋白质含氮量比较恒定,约为16%,所以蛋白质含量=N/16%=N*6.25。测出含氮量即能得出蛋白质含量。实验步骤(过程记录):1、样品消化:将牛奶10mL置于消化管内,加入催化剂5g,并沿烧瓶壁缓缓加入20mL浓硫酸,使全部样品浸没于硫酸。接着将消化管放在消化炉支架上,把支架连同装有试样的消化管一起移至电热炉上。设定温度在420℃保持消化管中液体连续沸腾。待溶液消煮至无微小碳粒、呈蓝绿色时,继

3、续消煮一会。同一方法做试剂空白实验。消化结束,等其冷却至室温。冷却过程中,防止废气泻出。2、样品蒸馏:使自来水经过给水口进入冷凝管。然后打开定氮仪总电源开关,启动仪器待蒸汽导出管放出蒸汽,按消除按钮停止加热。在蒸馏导出管托架上,放上已经加入适量的15ml接受液(硼酸和混合指示剂)的锥形瓶。抬起锥形瓶支架使蒸馏导出管的末端浸入接受液内。再在消化完全冷却后的消化管内,逐个加入10mL左右蒸馏水稀释样品。而后开始蒸馏,到时或到量时自动停止。用洗瓶将蒸馏水冲洗接收,取下锥形瓶。最后加碱:按下碱按钮,使NaOH溶液加至蒸馏液碱性颜色变黑为止

4、。3.加酸滴定:用标定后的硫酸溶液进行滴定,溶液由蓝绿色变为灰紫色为滴定终点。同时吸取试剂空白消化液按2、3操作。实验分析(计算):牛奶蛋白质含量(g/100ml)=(V1-V2)*C*0.014/(V/100)*100*6.25项目数据V:牛奶的体积(ml)10V1:空白试样消耗标准硫酸溶液的体积(ml)3.26V2:牛奶试样消耗标准硫酸溶液的体积(ml)6.94C:酸标准溶液浓度:0.01mol/L0.0140——氮的毫克当量数(6.94-3.26)*0.01*0.014/(10/100)*100*6.25=3.22g/100

5、ml实验结论:牛奶试样中蛋白质含量为3.22g/100ml实验反思:蒸馏反应室里的溶液总体积要控制,否则反应室溶液体积太大,液面升高,容易喷进冷凝管内。实验样品需控制为均匀大小,大块的固体样品应用粉碎设备打得细小均匀,液体样品应震摇或搅拌均匀。消化过程中需让消解溶液沸腾均匀后再提高消解温度,直至消化液呈透明蓝绿色再消化半小时左右。否则可能导致在炭化过程中,升温速度过快使样品溢出消化管或溅起粘附在管壁,使其无法消化完全而造成氮损失,影响结果准确性。感悟体会:该牛奶包装袋上的蛋白质标识为3.4g/100ml,可见实验结果于其相近。尽管

6、有误差,可这次实验还是很成功。当然这复杂的实验离不开化学老师的帮助与书籍、资料的参考。通过本实验的操作实践,我学会了用凯氏定氮法测定牛奶中蛋白质含量的方法和操作原理,掌握了基本的操作过程,从中也感悟到科学的严密性和严谨性,提高了实践能力和动手能力。陈屹东

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