生物毕业论文开题报告几种食用真菌超氧化物岐化酶的提取及活性测定

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1、毕业设计（论文）开题报告理工学院毕业设计(论文)开题报告题目：几种食用真菌超氧化物岐化酶的提取及活性测定学生姓名：董建峰学号：08L0304102专业：生物科学指导教师：李敏2012年3月15日毕业设计（论文）开题报告1．结合毕业设计（论文）课题情况，根据所查阅的文献资料，每人撰写2000字左右的文献综述：超氧化物歧化酶及应用1超氧化物岐化酶的发现和分类地位超氧物歧化酶(SuperoxideDismutase简称SOD，ECl.15.1.1)是一种新型酶制剂。1938［1］年Mann和KeilinJ首次从牛红细胞中分离出一种蓝色的含铜蛋白质［2］2—(Hemocup

2、reid),1969年，Mccord和Fridobvich发现其能催化超氧阴离子（O）的歧化反应而将其命名为超氧化物歧化酶（SOD），并阐明了超氧阴离子自由基的生物学意义，该酶是体内一种重要的氧自由基清除剂，能够平衡机体的氧自由基，从而避免当体内超氧阴离子自由基浓度过高时引起的不良反应，同时SOD是一种很有用途的药用酶。有关SOD的研究受到国内外学者的广泛关注，涉及到化学、生物、医药、日用化工、食品诸领域，是一个热门研究课题。通过多年努力，在SOD的基础研究方面取得了巨大成果。在SOD的制备、结构功能研究及抗衰老、抗辐射、抗炎和抗癌及其作用机理、吸收机理研究方面已取

3、得很大进展。CuZnSOD是真核生物酶，主要存在于真核细胞的细胞质和叶绿体的基质中，动物血肝、奶、植物叶、果等均含CuZnSOD。CuZnSOD中一个酶分子的亚基含一分子Cu和一分子Zn,Cu位于酶的活性中心,酶的形状呈一椭圆形狭长的口袋,Cu位于“口袋”的底部,与一分子水和4个组氨酸(His)残基形成配位键,Zn则通过咪唑基与其中之一的[3]His残基相连。SOD类型：超氧化物歧化酶按其所含金属辅基不同可分为三种，第一种是含铜（Cu）锌（Zn）金属辅基的称（Cu.Zn—SOD），最为常见的一种酶，呈绿色，主要存在于机体细胞浆中；第二种是是含锰（Mn）金属辅基的称（

4、Mn—SOD），呈紫色，存在于真核细胞的线粒体和原核细胞内；第三种是含铁（Fe）金属辅基的称（Fe—SOD），呈黄褐色，存在于原核细胞中。2SOD的生产方式目前国内已开发的SOD产品绝大分都是Cu/Zn-SOD，它们最早是从动物的血、肝中分离提取的，动物SOD的分离提取技术也较为成熟。人们相继从牛、猪、羊、马等动物红细胞、肌肉、肝脏组织中分离和纯化出SOD。SOD常用的纯化制备方法有离子交换毕业设计（论文）开题报告法、疏水色谱、凝胶过滤法和金属螯和亲和层析法等。提取方法主要有以下几个步骤：［4］溶血液制备、选择性热变性、超滤浓缩、丙酮沉淀、柱层析、冷冻干燥。但是，由

5、于这种方法不可避免地发生一些交叉感染，过敏性反应等现象，开发研究从植物中提取SOD就显得尤为重要。我国近年来在植物SOD的研究领域有大量相关报道。［5］6］［7］［8］许平、袁艺、赵文芝、余旭亚等分别从大蒜、桑叶、沙棘、仙人掌中提取SOD并进行了相关研究，其提取方法主要有分步盐析法、有机溶剂沉淀法、层析柱法等。除了从动植物中提取SOD外，选育SOD高产菌株进行发酵生产也是比较有价值的一种方法［9，10］。由于天然SOD来源有限，且具有异体蛋白免疫原性，外源SOD不易被人体接受等缺陷，使之在应用方面受到很大限制。SOD基因工程是广开酶源，降低成本和获得无抗原性的人源S

6、OD的有效途径。与天然SOD相比，SOD的模拟物有着更显著的优点：首先是获取和制备比天然SOD要简单得多，其次，天然SOD作为一种生物大分子，在进入体内时存在着进入细胞能力弱、细胞渗透性差、在血中半衰期短、不能口服、价格昂［11］贵等缺点，所以，目前，生物无机化学家们合成和表征了一系列含铜、锰、铁等金属离子的小分子配合物来模拟SOD，期待将来能用小分子模拟化合物代替SOD应用于临床。［12］其中研究最多的含铜络合物是3，5-二异丙基水杨酸铜［Cu(3，5-DIPS)］，这是一种低分子量的亲脂性络合物，具有天然Cu/Zn-SOD样活性，可以起到抗炎及减轻由链脲［13］

7、菌素诱导产生的糖尿病。刘京萍等合成的铁(Ⅱ)-酪氨酸模拟SOD金属酶，分子量比天然酶小得多，与天然SOD活性差距较小，且毒性小，从而大大推进了人工合成具有分子质量较小、稳定性高、毒性较底、活性较高等优点的SOD模拟物的研究工作。由于SOD催化的反应的特异性，科学家们一直努力寻找适合其特性的简便、精确的测活方法，多年来相继建立的多种活性测定方法，一般分为两大类：直接法和间接法。而直接法往往需要操作复杂、价格昂贵的仪器，在一般实验室无法使用，所以多采用间［14］接法。3SOD作用机理SOD的作用底物是生物体内产生的超氧阴离子自由基,，作用机理是：毕业设计（论文）开题