棉花c2h2类型锌指蛋白基因ghsiz1的克隆及表达分析

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1、棉花学报CottonScience2015袁27渊3冤院189―197棉花C2H2类型锌指蛋白基因1的克隆及表达分析*张新宇袁林书岱袁张涛袁裴柳玲袁唐清袁刘峰袁刘永昌渊石河子大学农学院/新疆生产建设兵团绿洲生态农业重点实验室袁新疆石河子832000冤摘要院通过RT-PCR技术从陆地棉中克隆到1个编码C2H2型锌指蛋白的基因袁命名为1(StressInducedZincfingerprotein1)遥该基因编码239个氨基酸残基袁预测蛋白分子量为26.6205kD袁等电点为6.52遥GhSIZ1包含一个C2H2型锌指结构域袁在其N端含有保守的L-box袁C–末

2、端含有一个转录抑制结构域EAR/DLN-box遥系统发育树分析表明GhSIZ1与可可渊XP_007044496.1冤和中粒咖啡渊CDP00218.1冤中的锌指蛋白亲缘关系较近遥实时定量PCR分析1在棉花各组织中均有表达袁但在根中表达量最高遥低温尧高盐尧干旱胁迫处理后1的表达水平显著上调遥亚细胞定位分析表明袁GhSIZ1定位在细胞核中遥本研究表明袁1可能在棉花响应低温尧高盐尧干旱等非生物胁迫中起着重要作用遥关键词院棉花曰C2H2型锌指蛋白曰表达模式曰1中图分类号院S562.035文献标志码院A文章编号院1002-7807渊2015冤03-0189-0910.1

3、1963/issn.1002-7807.201503001*ZhangXinyu,LinShudai,ZhangTao,PeiLiuling,TangQing,LiuFeng,LiuYongchang(832000,)Inthisstudy,anovelgeneencodingC2H2-typezincfingerproteinwasclonedincottonbyreverse-transcriptionpoly-merasechainreaction(PCR).Thegenewasdesignatedas1(Stress-inducedZincfinge

4、rprotein1).1encodedapro-teinof239aminoacidresidueswithapredictedmolecularmassof26.6205kDandanisoelectricpointof6.52.IthasaC2H2-typezincfingerdomain,anL-boxattheNterminusandaputativetranscriptionrepressiondomain(EAR/DLN-box)attheC-terminus.Phylogeneticanalysisrevealedthat1shareshigh

5、identitywithC2H2-typezincfingerproteinsfrom(XP_007044496.1)and(CDP00218.1).Real-timePCRanalysisshowedthatthetranscriptsof1weredetectedinalltissues:roots,stems,flowers,leavesandfibers.Thehighestlevelwasfoundinroots.Theexpressionwasinducedbycold,saltordroughttreatments.Subcellularloc

6、alizationanalysismanifestedthat1wasdistributedinthenucleus.Ourresultssuggestthat1mayplayanimportantroleintheresponseofcottontocold,saltordrought.cotton;C2H2-typezincfingerprotein;expressionpattern;1非生物胁迫已经成为影响全球作物产量的些胁迫遥当胁迫开始后袁植物可以从分子水平尧细主要原因袁每年由于非生物胁迫引起的农作物减胞水平尧生理水平和生化水平对胁迫做出响应袁[1

7、][2-3]产或绝收占总损失的50%遥干旱尧高盐和低温是从而能够得以生存遥非生物胁迫可以诱导很多影响植物生长发育的主要非生物胁迫因子遥由于基因表达袁从而导致植物体内生理和代谢发生改[4]植物不能像动物一样主动逃避不利因素的影响袁变袁最终在不利环境中得以生存遥从基因表达的所以它们必须进化出一套完整的机制来应对这角度看袁调控模式主要有以下几种院转录水平调收稿日期院2014-09-03作者简介院张新宇渊1978―冤袁男袁在读博士袁zhxy@shzu.edu.cn曰*通信作者袁liuyongchang2003@126.com基金项目院新疆生产建设兵团博士资金专项渊2

8、013BB003冤曰石河子大学高层次人才启动项目渊R