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《矮牵牛b-box型锌指蛋白基因phbbx8的克隆与表达分析》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、园艺学报,():–2014411224372445http://www.ahs.ac.cnActaHorticulturaeSinicaE-mail:yuanyixuebao@126.com收稿日期:2014–07–31;修回日期:2014–12–08基金项目:国家自然科学基金项目(31101576);中央高校基本科研业务费专项基金项目(2013PY090);教育部高等学校博士学科点专项科研基金项目(20110146120040)矮牵牛B-box型锌指蛋白基因PhBBX8的克隆与表达分析宁露云,李蓓,李佩,包满珠,张蔚*(华中农业大学园艺林学学院,园
2、艺植物生物学教育部重点实验室,武汉430070)摘要:利用矮牵牛(Petuniahybrida)基因表达谱芯片筛选出应答低温胁迫的相关基因,从中发现1个B-box型锌指蛋白基因PhBBX8。通过RT-PCR克隆得到该基因的编码区序列(CDS),为1242bp,预测其编码氨基酸413aa,N端含有2个B-box盒,C端含有1个CCT结构域。系统进化树分析发现,PhBBX8与拟南芥AtBBX8等聚类为一支。利用半定量RT-PCR检测其在根、茎、叶和花中的表达特性,结果表明该基因在花中表达量较高,其次为根,而在茎和叶中表达较弱;利用实时定量PCR检测了在低
3、温、干旱、ABA、MeJA、高盐和高渗胁迫处理下矮牵牛叶片中PhBBX8的诱导表达情况,结果表明,PhBBX8表现出不同程度的上调,其中除干旱胁迫外,其他胁迫下上调倍数都较高,初步推测该基因与矮牵牛应答低温等非生物逆境相关。关键词:矮牵牛;B-box;锌指蛋白;非生物逆境;表达分析中图分类号:S681.9文献标志码:A文章编号:0513-353X(2014)12-2437-09CloningandExpressionAnalysisofaB-box-typeZinc-fingerProteinGenePhBBX8inPetuniahybridaNIN
4、GLu-yun,LIBei,LIPei,BAOMan-zhu,andZHANGWei*(KeyLaboratoryofHorticulturalPlantBiology(MinistryofEducation),CollegeofHorticulture&ForestrySciences,HuazhongAgriculturalUniversity,Wuhan430070,China)Abstract:Geneexpressionmicroarrayofpetuniawasappliedtoselectcoldresponsivegene,fromw
5、hichaB-box-typezinc-fingerproteingenePhBBX8wasdiscovered.ThefulllengthofthecodingregionofPhBBX8amplifiedbyRT-PCRwas1242bp,andtheproductofPhBBX8genewaspredictedtoconsistof413aminoacidresidualscontainingtwoB-boxdomainsattheN-terminalandoneCCTdomainattheC-terminal.Thephylogenetict
6、reeanalysesshowedthatPhBBX8wasclusteredinthesamebranchwithAtBBX8inArabidopsis.Bysemi-quantitativeRT-PCR,PhBBX8wasfoundtoexpressdifferentiallyinallthetissuesdetected,includingroot,stem,leafandflower.Stressinducedexpressionanalysisbyreal-timequantitativePCRshowedthattheexpression
7、ofPhBBX8couldbeinducednotonlybycold,butalsobydrought,ABA,MeJA,saltandhypertonicstressesindifferentdegrees,suggestingPhBBX8genewasassociatedwiththeresponsesofcoldandotherabioticstresses.*通信作者Authorforcorrespondence(E-mail:zhangw@mail.hzau.edu.cn)2438园艺学报41卷Keywords:Petuniahybrid
8、a;B-box;zinc-fingerprotein;abioticstress;expressionana
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