死亡谷芽孢杆菌nbif-001 防治灰霉病研究

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1、2016（10）：63-66中国蔬菜CHINAVEGETABLES研究论文死亡谷芽孢杆菌NBIF-001防治灰霉病研究1211*1*11黄大野　周　婷　姚经武　刘晓艳　曹春霞　杨妮娜　胡洪涛11龙　同　杨自文12（湖北省生物农药工程研究中心，湖北武汉430064；武汉商贸职业学院，湖北武汉430205）摘　要：为明确死亡谷芽孢杆菌NBIF-001菌株对灰霉病的防治效果，采用平板对峙结合显微观察确定其对灰霉病菌的抑菌活性，并采用离体组织试验研究其对黄瓜叶部灰霉病及贮藏期番茄果实灰霉病的防治效果。结果表明，在平板对峙条件下NBIF-0

2、01对灰葡萄孢具有良好的抑菌活性，显微镜下观察到菌丝发生扭曲、肿胀和变形；离体试验结果表明NBIF-001对灰霉病具有良好的生防效果，对黄瓜叶片灰霉病和番茄果实灰霉病的防效分别达到85.91%和72.52%。关键词：死亡谷芽孢杆菌；NBIF-001菌株；灰霉病；生防效果由灰葡萄孢（Botrytiscinerea）引起的作物灰etal.，2015）。霉病是一种为害严重的世界性病害，其寄主非常广死亡谷芽孢杆菌（Bacillusvallismortis）泛，可以侵染许多重要的经济作物，如蔬菜、水NBIF-001是由湖北省生物农药工程研究中

3、心分果和花卉等（Nambeesanetal.，2012），造成严重离和保存的具有高杀线虫活力的菌株（中国典型的经济损失。由于缺少相应的抗性品种，目前灰霉培养物中心保存号为CCTCCNO：M2015087），病的防治仍以化学防治为主。然而，灰霉病菌具前期研究表明其对多种植物病原菌有良好的抑制有繁殖较快、适应性强和遗传变异较快等特点，作用（刘晓艳等，2015），本试验研究死亡谷芽极易产生抗药性，已有灰霉病菌对苯并咪唑类、孢杆菌NBIF-001对灰霉病的防治效果，旨在为二甲酰亚胺类、苯胺基嘧啶类、甲氧基丙烯酸酯生物防治灰霉病的田间示

4、范和应用推广提供新的类（Q0Is）及琥珀酸脱氢酶抑制剂类（SDHIs）等参考。类型杀菌剂产生抗药性的报道（Myresiotisetal.，1　材料与方法2007；Bannoetal.，2009；Kretschmeretal．，2009；Lerouxetal.，2010）。同时，化学农药的使用也会1.1　试验材料造成农药残留，危害人体健康，污染环境。基于供试菌株：死亡谷芽孢杆菌NBIF-001，由湖上述原因，亟需更为安全有效的防治方法。近年来北省生物农药工程研究中心分离自云南香格里拉的生物防治已经成为替代传统化学防治方

5、法的有效手土壤，并保存于本中心链霉菌资源库；灰霉病菌也段（Ilhan&Karabulut，2013；Weietal.，2014；Ge由本中心分离保存。供试药剂：50%多菌灵可湿性粉剂，由江苏百灵农化股份有限公司生产。供试作黄大野，男，博士，助理研究员，专业方向：作物病害生物防治，E-mail：物为黄瓜，品种为中农8号，由中国农业科学院蔬xiaohuangdaye@126.com菜花卉研究所选育。*通讯作者（Correspondingauthors）：曹春霞，女，硕士，研究员，专业方向：农药剂型研究，E-mail：Caoc

6、hunxia@163.com；刘晓艳，1.2　试验方法女，博士，副研究员，专业方向：土传性病害生物防治，E-mail：试验于2015年9～12月在湖北省生物农药工xiaoyanliu6613@163.com程研究中心试验室进行。收稿日期：2016-06-24；接受日期：2016-09-081.2.1　平板对峙试验　接种NBIF-001于LB培基金项目：湖北省农科院竞争性项目（2015jzxjh04，2016jzxjh026），国-1养基中，24℃、160r·min振荡培养24h备家自然科学基金青年基金项目（31500428

7、），湖北省农科院创新岗位项目（2016-620-000-001-038）用。在PDA平板中央接种直径为4mm的灰霉菌—63—《中国蔬菜》学术论文下载www.cnveg.org研究论文中国蔬菜CHINAVEGETABLES菌饼，距离菌饼25mm处4点接种NBIF-001发防效=（对照病斑直径-处理病斑直径）/对照病斑直酵液，每个点5µL；以不接种NBIF-001作为对径×100%照。25℃培养6d，观察抑菌效果。刮取抑菌带1.2.4　死亡谷芽孢杆菌NBIF-001对贮藏期番茄果边缘灰霉病菌菌丝，在40倍显微镜（OLYM

8、PUS实灰霉病的防治　按照Zhang等（2013）的方法，CX21，Tokyo，Japan）下观察其与对照菌丝的灰霉菌在PDA平板25℃培养14d，之后用无菌水区别。刷取并制备孢子悬浮液，将其混入0.05%的吐温