芽孢杆菌防治香蕉冠腐病的研究

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1、华南热带农业大学硕士学位论文芽孢杆菌防治香蕉冠腐病的研究姓名：刘爱荣申请学位级别：硕士专业：植物病理学指导教师：黄圣明;张荣意2003.5.1中国热带农业科学院华南热带农业大学!!!!旦堡主望!!!!苎摘要从海南省东方、乐东、三亚、琼海、儋州和澄迈六地对香蕉进行抽样调查，对发生典型冠腐病症状的香蕉进行组织分离，培养，统计出菌率和出菌种类，结果显示六地香蕉的出菌率为13．3-87．2％，其中以三亚的最高；在分离到的225个菌株中，镰刀菌6种，后经过致病力测定和生物学鉴定确定引起省内香蕉冠腐病的主要病原菌为亚粘团串珠镰孢霉(FusariummoniliformevaKsubglutinan

2、s)、半裸镰孢霉(Esemitectum)、导管镰孢霉(Eaquaeductuum)和弯喙镰孢霉(Ecamptoceras)。用对峙培养法，从香蕉园土壤和蕉园杂草上分离到8株对香蕉冠腐病菌有强烈抑制作用的芽孢杆菌(Bacillussp．)通过测定拮抗细菌无菌滤液对香蕉冠腐病菌拮抗作用，筛选出4株拮抗效果较佳的芽孢杆菌，经鉴定，为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)．将香蕉冠腐病菌培养在含不同浓度培养滤液的PDA平板上，观察菌丝的变化，经无菌滤液处理后，首先菌丝顶端和中部肿胀，形成大量念珠状囊状体，菌丝直径是正常菌丝的4．5倍，时间延长，菌丝细胞壁溶解，原生质外溢，菌丝细胞成

3、为空胞。以不同比例将无菌滤液加入镰刀菌的孢子悬浮液中，置显微镜下定时观察。处理12h后，镰刀菌孢子不能正常萌发产生芽管，在孢子的顶端或中间产生一个圆球状泡，18h后此泡状结构破裂，孢予的原生质随着溢出。将无菌滤液经121℃处理20分钟后，测定其抑菌活性，结果表明B68和B75的培养滤液不耐高温，经高温处理后其抑菌活性完全丧失，B63和B74的培养滤液对高温不十分敏感，高温处理后，对F4和F6的抑菌活性部分丧失，对Fl的抑菌作用在高温处理前后无显著变化，说明对Fl有抑制作用的物质具有耐高温的性质，同时表明B63和B74的无菌滤液至少含有两种抑菌物质，一种对高温敏感，121℃处理20分钟，

4、使其活性丧失，刘爱荣芽孢杆菌防治香蕉冠腐病的研究·-·。·_1_。_。·’。-。_。-___。。_。。’____。。。■。。。‘_。--’_·-_’。。‘--。’。。。。’。’’’。’1。‘’。。。一另一种可耐121℃的高温。四株枯草芽孢杆菌的菌液对香蕉冠腐病的防效均在70％以上，最高防效达94．74％，显著高于生产上常用的杀菌剂施保功的防效(52．63％)。四菌株的无菌滤液的防效在66．67％-95．24％之间，以无菌滤液的原液防效最高。稀释5倍，防效无显著变化，稀释10倍，防效显著下降。关键词：香蕉冠腐病生物防治枯草芽孢杆菌作用机理2中国热带农业科学院华南热带农业大学2003届硕士

5、毕业论文前言(代综述)1．拮抗菌防治果蔬采后病害的研究进展新鲜果蔬采后腐烂是一个全球性问题。果蔬在采摘、运销、以及贮藏过程中因腐烂造成的损失是巨大的。椐资料报道，发达国家(如美国)的果蔬采后因腐烂而造成的损失在24％左右，发展中的地处热带的国家高达50％Ⅲ，我国果蔬采后腐烂率在20．30％。腐烂的主要原因绝大多数要归咎于微生物的侵染；由于果蔬产品组织柔嫩多汁且富含糖分，同时由于脱离植株，其抗病性大大降低，因此，在贮藏过程中极易受病原物的侵染而引起腐烂。控制采后病害的主要措施是使用化学杀菌剂[21。自18世纪中叶，人们就开始用农药直接防治病害，因其杀菌效果立竿见影，成效卓著，得到了人们的

6、认可，并使人类对其产生了越来越强的依赖性。在人们对病菌“赶尽杀绝，彻底消灭”的同时，化学药剂不仅杀死了病原物，而且杀死了许多有益微生物。长期使用化学杀菌剂，也使病菌产生了抗药性，降低了药剂的防治效果【31[41(51[61。为了达到防病的目的，只有加大用药的剂量，这不仅增加了防病的成本，并且残留在果蔬上的化学药剂对人体健康的危害极大。美国科学院(NationalAcademyofSciences)的一份报告指出，在用于处理食品的杀菌剂中，60％有致癌的危险性17l。好几种杀菌剂(如Captan和Benomyl)已被美国环保局明令禁止使用或在部分果蔬上限制使用。欧洲议会(European

7、Parliament)也通过一项全面禁止在采后果蔬上应用杀菌剂的决议【11。公众对大剂量使用杀菌剂对环境和健康的危害也日益关注，要求减少采蔬产品上的用药量的呼声也日益高涨19】f10】。为了保证农产品的卫生和安全，各国科学家都在积极探索能代替化学农药的防病新技术。使用非化学的、非选择性的杀菌剂控制果蔬采后病害将是以后的发展方向tto!。这些方法安全无毒，大多为综合性的处理措施。如采收和处理时减少果蔬型墨墨苎塑堑望堕塑重蔓塑壁堕塑堕壅一的伤12J