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《芽孢杆菌BH_1防治大豆根腐病的效果及机制》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、19(4)180-184中国生物防治ChineseJournalofBiologicalControl2003年11月芽孢杆菌BH1防治大豆根腐病的效果及机制1211郭荣君,刘杏忠,杨怀文,仝赞华(1.中国农科院生物防治研究所,北京100081;2.中国科学院微生物研究所,北京100080)摘要:芽孢杆菌BH1分离于大豆根际,在温室试验中表现出较好的防治效果。田间试验对尖孢镰刀菌引起的大豆根腐病防效达56.1%,增产7.6%。该菌株发酵无菌滤液对尖孢镰刀菌F3、茄孢镰刀菌W1和镰刀菌S1孢子萌发和菌丝生长有抑制作用;
2、对热处理较稳定。对其抗+利福平标记株B2R24与大豆根系的亲和性研究表明,BH1可定殖于无菌土和病土中生长的+大豆根际,且动态变化趋势相似,但在无菌土中数量略高于病土。组织印记法表明:B2R24可在整个大豆根系生长。扫描电镜观察发现,BH1主要存在于根表凹陷处,在根尖或侧根处则很+少。透射电镜观察,根细胞间隙内未检测到BH1。在大豆根际的定殖试验说明,B2R24与大豆根系有很好的亲和性,对营养和空间位点的竞争是其拮抗病原菌的主要机制。关键词:芽孢杆菌BH1;大豆;根际;拮抗机制中图分类号:S476;Q938.1文献标
3、识码:A文章编号:100529261(2003)0420180205利用根际细菌防治土传病害在近20年有了很大发展,已成为一个非常活跃的研究领域。关于根际细菌防病促生作用机制,国内外学者进行了大量研究,认为作用方式多样,主要包括营养和空间位点的竞争、产生抗生素、嗜铁素、水解酶类,以及诱导系统抗性等。但普遍认为营[1,2]养和空间位点的竞争,是某些属种细菌拮抗病原菌的主要机理。根际细菌引入后,能否在作物根部定居、繁殖,并同根围固有微生物竞争营养和空间位点,决定了其在根部的存活能力,从而决定其生防能力。许多防效稳定的菌株
4、如:防治小麦全蚀病(Ophiobolusgraminis)的荧[3]光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)、防治大豆胞囊线虫的淡紫拟青霉(Paecilomyces[4]lilacinus)都可在作物根际很好地定殖。本文报道BH1菌株在田间的防治效果,并从拮抗作用、营养和空间位点竞争等方面探讨了其防病机理。1材料和方法1.1供试菌株BH1(Bacillussp.)分离于大豆根际,本实验室保存;尖孢镰刀菌(Fusariumoxysporum)F3由黑龙江农垦科学院作物所提供;茄孢镰刀菌(Fusariu
5、msolanif.sp.glycines)W1由山东省农科院植保所提供;镰刀菌(Fusariumsp.)S1由本实验室分离保存。1.2BH1菌剂防治大豆根腐病田间试验田间小区试验在黑龙江省农垦科学院进行,田间同常规管理。小区垅距70cm,每小区设收稿日期:2003202224基金项目:国家“九·五”科技攻关项目(962005201210204)作者简介:郭荣君(1970-),女,硕士,助研。180第4期郭荣君等:芽孢杆菌BH1防治大豆根腐病的效果及机制24条垅,长8m,小区面积22.4m,设3次重复,随机排列。垦丰4
6、号大豆种子用根际芽孢杆菌8-1BH1培养液(10cfu·ml)进行包衣,以化学农药多福合剂和空白处理为对照。调查真叶期、4片复叶期病情指数和植株生长情况(株高、长势、鲜重),统计收获期大豆产量。1.3BH1代谢产物对大豆根腐病病原菌的抑制作用1.3.1BH1代谢产物对病原菌菌丝生长的影响将BH1发酵液3000r/min离心20min,上清液经0.22μm纤维素滤膜过滤。在加入2ml除菌发酵液的PDA平板上,分别接种病原菌F3、W1、S1,置26℃培养4～5d,测量菌落直径。1.3.2BH1代谢产物对病原菌孢子萌发的影
7、响病原菌F3、W1、S1孢子悬浮液各0.1ml(孢6-1子浓度为10cfu·ml)分别加入419mlBH1无菌发酵滤液中。以无菌水为对照。当对照孢子萌发率达到85%以上时,检查各处理中病原菌的孢子萌发率。1.3.3BH1代谢产物热稳定性BH1无菌发酵滤液分别在60、80、100℃水浴处理10min,取2ml发酵滤液加入13mlPDA培养基中,冷却后,接直径为5mm的病原菌F3菌丝块,25～26℃培养4d,测菌落直径。以原液和不加菌液为对照。设3个重复。1.4BH1菌株与大豆根系的亲和性-1-11.4.1抗利福平BH1
8、突变株诱导BH1菌株在含利福平20g·ml→100g·ml的NA培养液中培养诱导抗利福平突变株。因利福平见光易分解,培养应在黑暗条件下进行。1.4.2种子细菌化及种子带菌量的测定种子用1ml/LNaClO消毒3min,无菌水洗5次,用BH1标记菌发酵液浸泡30min,晾干。取20粒种子,采用平板稀释法检测种子带菌量,稀释涂-1rif+布于含10
