西姆芽孢杆菌pq21防治烟草青枯病研究

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1、万方数据西姆芽孢杆菌PQ21防治烟草青枯病研究陈德鑫1，李晶2，王建斌2，陈太春2，马志远2，林星华2，安德荣2(1．中国烟草总公司青州烟草研究所，青岛266101；2．陕西省农业分子生物学重点实验室，杨凌712100)摘要：本研究探讨了新型微生物农药西姆芽孢杆茵PQ21对烟草青枯病的防治效果，在烟草中的定殖能力及最佳施用时间和施用次数。盆栽试验表明：西姆芽孢杆菌PQ2124h后接种病原茵，防治效果可达86．87％。定殖能力测定结果表明，西姆芽孢杆菌PQ21能在烟草各组织的表面及内部定殖。根中的定殖量大于茎和叶。在接种后第10d定殖数量最大，

2、随后下降。小区试验表明，西姆芽孢杆菌P(磁1(3OOOg／667mz)的防效最高，为84．78％。施用时间为苗期、移栽后lOd和移栽后30d联合施药的防治效果最好。关键词：西姆芽孢杆菌；烟草青枯病；生物防治1引言烟草青枯病是由青枯雷尔氏菌(Ralstoniasolanacearum)引起的一种典型的微管束细菌性土传病害，是一类世界范围的毁灭性病害。近年来，在中国由于连作烟田面积的扩大及连作年限的增长，不少地方烟草青枯病有加重流行的趋势。目前青枯病的防治主要依靠土壤熏蒸[1]和化学药剂。持续大量的化学药剂使环境日益污染和病菌产生抗药性，造成农产

3、品有害物质残留超标。因此，具有对环境、生态和人类健康安全等优点的微生物农药受到广泛关注并发挥着越来越重要的作用[2]。芽孢杆菌是微生物杀菌剂的重要来源。对芽孢杆菌类生防菌的筛选、鉴定和防治研究是国内外研究的重点和热点。目前已报道的对烟草青枯病有抑制作用的细菌菌株大都处于试验阶段，进入实际生产的很少。本实验室以从秦岭原始森林土壤中分离到的一株新型高效抗菌型西姆芽孢杆菌(Bacillussiarnensis)PQ21为研究对象，旨在验证该菌株对烟草青枯病的盆栽和田间防治效果，探究其在烟草根、茎、叶内部及表面的定殖情况，确定西姆芽孢杆菌PQ21的施

4、用时间和剂量，为青枯病的防治提供依据。2材料与方法2．1供试材料供试药剂：西姆芽孢杆菌PQ21(10×1010cfu／g)可湿性粉剂，由西北农林科技大学植保学院提供；25％青枯灵可湿性粉剂，浙江省温州市鹿城植保化学有限公司；98％棉隆微粒剂，南通施壮化工有限公司；农用硫酸链霉素72％可湿性粉剂，华北制药集团。致病性烟草青枯病菌(Ralstoniasolanacearum)由西北农林科技大学植保学院植病实验站保存并提供。烟草品种：K326。2．2试验方法2．2．1供试药剂的用量和施用方法供试药剂的用量和施用方法见表1。表1供试药剂用量和施用方法

5、万方数据第三章烟草有害生物防治技术2．2．2对烟草青枯病的盆栽防效测定待烟苗长到4～6片叶时开始进行盆栽防治试验，每个处理8株，重复3次。灌药后24h伤根接病原菌，每株20mL，接菌浓度为5×108个／mL。24h后调查病情，计算病情指数和防治效果。试验分接种前24h施药和接种后零星发病24h施药进行，以接病原菌作接菌对照，并设空白对照(不接病原菌)。2．2．3在烟草植株中的定殖动态检测定殖测定取烟田耕层土，经高压蒸汽灭菌后装钵，每钵2．5kg。育苗后60d后PQ21灌根，移栽后1d、5d、10d、20d、40d、60d、80d、100d分别

6、采集烟株根系、茎秆、叶片检测。用灭菌水冲净表面，稍干后称取0．1--一1g待用，用70％乙醇浸3～5S，置于2％次氯酸钠中消毒5～7min，将各处理组织置于4mL无菌水的研钵中充分研磨，静置30min，稀释后取适当稀释度的悬液0．1mL均匀涂布于含有3009／mL的Stre回收平板上，重复3次。以清水做对照处理。在37℃恒温培养2～3d后计数，并换算成cfu／g。同时检查清水对照中有无细菌菌落长出[4]。2．2．4田间试验小区试验设在咸阳市泾阳县烟草试验站示范田。选择青枯病常年发生的旱烟田。种植密度1000株／667m2。设6个处理，每处理3

7、次重复，每重复30株，区组随机排列。分2次施药：第一次在移栽10d后，第二次在移栽后30d。田间管理同一般大田管理。2．2．5不同时期施药对烟草青枯病防效试验试验条件如2．2．4所示。设8个处理：处理A苗期；B移栽后10d；C移栽后30d；D移栽后50d；E苗期+移栽后10d，F苗期+移栽后30d，G移栽后10d+移栽后30d；H苗期+移栽后10d+移栽后30d，对照(CK)按当地优质烟生产技术进行施肥和管理。2．2．6调查与数据分析按烟草行业CORESTA青枯病分级标准‘5I，调查烟株发病率和病情指数，统计各个处理的防治效果。试验数据用DP

8、S统计分析软件进行方差分析。病株率(％)一(发病株数／调查总株数)×100病情指数一[∑(各级病株数×该病级值)]／(调查总株数×4)×100防治效果(％)一[对照