大豆糖蜜中功能成分的分离纯化-硕士论文

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1、江南大学硕士学位论文大豆糖蜜中功能成分的分离纯化姓名：刘燕申请学位级别：硕士专业：粮食、油脂及植物蛋白工程指导教师：华欲飞20080601摘要本文研究了大豆糖蜜提取低聚糖后的副产物中大豆磷脂，大豆皂苷和大豆异黄酮的分离纯化。首先对大豆糖蜜及预处理之后各组分进行了成分分析。对酸沉沉淀通过乙醇．正己烷萃取得到浓缩磷脂；研究了过氧化氢处理对浓缩磷脂脱色效果的影响：采用丙酮萃取的方法制备粉末磷脂，并对粉末磷脂进行了纯化研究。根据磷含量及回收率选择的乙醇．正己烷的最适比例为1：1。通过单因素实验讨论了粉末磷脂的制备条

2、件，通过测定各步产品的得率，含磷量确定的丙酮处理最佳溶剂比为8：l，搅拌时问为30min，萃取次数为3次；通过单因素实验确定浓缩磷脂的脱色条件，根据磷脂的色泽及酸价确定的过氧化氢脱色的最佳条件为过氧化氢用量为4％，脱色温度为60℃，脱色时间为50min。采用柱层析的方法对脱色后的大豆粉末磷脂进行纯化，并对其进行了HPLC分析。接着研究了乙醇．正己烷萃取之后乙醇相的主要功能成分及其中皂苷的纯化。采用HPLC．MS分析确定了乙醇相的组成成分包括4种大豆异黄酮：daidzin，genistin，glycitin，

3、6"-0．aeetyl．genistin及8种大豆皂苷：大豆皂苷Ba，Bb，Bc，A2，A4，Ea，Ab，Af。采用AB．8型大孔吸附树脂纯化大豆皂苷。通过静态实验确定的AB一8型大孔吸附树脂的分离的pH值为pH3．0，通过动态实验确定的AB．8型大孔吸附树脂对大豆皂苷的最佳柱分离条件为：室温下，首先用50％的乙醇以2BV．hJ的流速洗脱3BV，然后用95％的乙醇按相同的流速洗脱4BV，收集95％乙醇洗脱液。对95％乙醇洗脱液进行浓缩、正丁醇萃取及石油醚重结晶即可得到纯度为98．46％的大豆皂苷产品，通过H

4、PLC．MS对其进行成分分析可知：产品主要成分为4种大豆皂苷，大豆皂苷Bb，Bc，Ab，Af。最后对酸沉处理之后得到的上清液通过AB．8型大孔吸附树脂后的50％乙醇沈脱液进行了异黄酮的分离纯化处理。采用氢氧化钙絮凝处理，酸水解，乙酸乙酯萃取及柱层析分离对大豆异黄酮进行了纯化。根据异黄酮的纯度及得率确定的氢氧化钙的絮凝pH为pH9．0；盐酸水解条件为：水解温度98℃，盐酸浓度2mol·L～，水解时间为2h；树脂柱分离条件为：H103型大孔吸附树脂，收集乙醇浓度为75％．95％的沈脱液，对其进行分析可知：产品纯

5、度为73．85％，其主要成分为3种大豆异黄酮苷元，其中daidzein的含量为45．03％。关键词：大豆糖蜜；大豆磷脂；大豆皂苷；大豆异黄酮AbstractThispaperstudiedontheseparationandpurificationofsoybeanphosphoplipids，soyasaponins，soyisoflavonesfromtheby-productsofsoymolasses．Firstly,componentsofsoymolassesandaciddepositionw

6、erestudied．Thentheaciddepositionwasextractedwithethanol—hexaneforthepreparationofphospholipidsconcentrate；thenthebleachingconditionofphospholipidswithhydrogenperoxidewerestudied；andpoweredphospholipidswerecollectedthroughextractionofacetone．Theoptimalratio

7、ofethanol—hexanefortheextractionWaS1：1．Theoptimalconditionsforthepreparationofpoweredphospholipidsweredeterminedbyone—factorcontrastexperiment．Theoptimalacetoneextractionconditionswere：acetoneandsampleratioWaS8：1．mixingtimeWaS30minandextractiontimeWaS3．The

8、optimalbleachingconditionsdeterminedbyone．factorcontrastexperimentwere：theconcentrationofhydrogenperoxideWas4％，bleachingtimeWaS60min，temperatureWaS50。C．Thecolumnswereusedforpurificationofthepoweredphospholipi