基因功能研究常用手段

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1、第四节基因功能研究常用手段一、转基因技术二、基因剔除技术三、基因沉默技术2017-11-201一、转基因技术采用基因转移技术使目的基因整合入受精卵细胞或胚胎干细胞，然后将细胞导入动物子宫，使之发育成个体转基因——被导入的目的基因转基因动物（transgenicanimal）——目的基因的受体动物2017-11-202建立转基因动物的基本流程2017-11-203转基因动物的应用研究特定基因在组织中特异表达研究或发现基因的新功能研究在胚胎期表达的基因结构和功能建立外源基因表达、调控的动物模型遗传性疾病的研究探讨生殖细胞的基因治

2、疗方法动物新品种的培育病毒性疾病的研究基因工程产品的制备2017-11-204抗凝血酶III转基因羊---国际首例获准上市的药用转基因动物2017-11-205细胞水平转基因外源基因通过转基因过程插入到细胞的染色体中，使其在细胞中稳定表达，成为可以表达该外源基因的特定细胞株基本过程外源基因片段克隆到真核表达质粒中→用重组表达质粒转染哺乳动物细胞→克隆化筛选→转染细胞表达目的蛋白质→蛋白质的提取和鉴定主要用途基因功能的研究细胞模型获得外源基因产物2017-11-2062017-11-207基因剔除技术①．建立生物模型在基因功能

3、，代谢途径等研究中模型生物的建立非常重要。基因敲除技术就常常用于建立某种特定基因缺失的生物模型，从而进行相关的研究。8基因剔除技术①．建立生物模型裸鼠，此动物缺乏胸腺，不能生产T细胞，因此造成免疫缺陷。多用于肿瘤生物学研究以及异体移植学研究。9基因剔除技术基因敲除技术的应用②.提供廉价的异种移植器官器官来源稀少往往是人体器官移植的一大制约因素，而大量廉价的异种生物如猪等的器官却不能用于人体。这是因为异源生物的基因会产生一些能引起人体强烈免疫排斥的异源分子，如果能将产生这些异源分子的基因敲除，那么动物的器官将能用于人体的疾病治

4、疗，这将为患者带来具大的福音。10基因剔除技术基因敲除技术的应用③疾病的分子机理研究和疾病的基因治疗通过基因敲除技术可以确定特定基因的性质以及研究它对机体的影响。这无论是对了解疾病的根源或者是寻找基因治疗的靶目标都有重大的意义。11基因剔除技术基因敲除技术的应用④免疫学中的应用异源的抗体用于人体时会有一定的免疫排斥，使得人用抗体类药物的生产和应用受阻。而如果将动物免疫分子基因敲除，换以人的相应基因，那么将产生人的抗体，从而解决人源抗体的生产问题。121.反义技术（antisense）根据核酸杂交原理设计针对特定靶序列的反义核

5、酸，从而抑制特定基因的表达类别反义RNA反义DNA核酶（ribozyme）2017-11-2013指由短双链RNA诱导的同源RNA降解的过程RNAi技术指人工建立的利用体外合成或在细胞内表达的短双链RNA（21-23nt）抑制细胞内特定基因表达的技术2017-11-20152017-11-2017小干扰RNA形成机理示意图2017-11-20182017-11-2019