四个发育基因在蜜蜂幼虫中的整体原位杂交表达谱

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1、4中国蜂业APICULTUREOFCHINA2014年4~6月下第65卷四个发育基因在蜜蜂幼虫中的整体原位杂交表达谱1213穆忠华 国占宝 王丽华 张博(1福建农林大学蜂学学院,福州350002;2中国农科院蜜蜂研究所,北京100093;3北京大学细胞增殖与分化教育部重点实验室,北京100871)摘 要:本研究通过转录法合成了4个发育基因eve、ben、Dfd和Scr的cRNA探针,并对蜜蜂幼虫进行了原位杂交。结果显示:eve、ben、Dfd和Scr基因在幼虫中都有表达,eve与ben基因是在体节上呈横竖条纹状表达而dfd与Scr基因是在体节两侧边缘呈点状表达。结果表明这4个基因在

2、蜜蜂幼虫阶段也参与了体节的发育和形态建成。基于此,还对胚胎整体原位杂交中的一些技术细节,如探针标记、探针保存、信号检测、固定时间、消化时间和操作手法等进行了讨论。关键词:蜜蜂;幼虫;发育基因;原位杂交中图分类号:S891文献标识码:AProfileofFourDevelopmentalGenesinHoneybeeLarvaebyWholeMountinSituHybridization1213MuZhonghua,GuoZhanbao,WangLihua,ZhangBo(1.BeeScienceCollege,FujianAgricultureandForestryUnivers

3、ity,Fuzhou 350002;2.BeeResearchInstitute,TheChineseAcademyofAgriculturalSciences,Beijing 100093;3.KeyLaboratoryofCellProliferationandDifferentiation,PekingUniversity,MinistryofEducation,Beijing 100871)Abstract:FourcRNAprobesincludingthepair-rulegenessuchaseve,thesegmentalpolaritygenessuchasben

4、andthehomeoticgenessuchasdfdorscrweresynthetizedthroughatranscriptionalmethodandthenwerehybridizedinsituwiththetranscriptsinhoneybeelarvae.Theresultsshowedthatgeneseve,ben,dfdandscrhadanobviousexpressioninhoneybeeatlarvalstage,respectively.Geneeveorgenebenhadastripedexpressiononsegmentshorizon

5、tallyandverticallywhilegenedfdorgenescrhadadottedexpressiononbilateralboundaryofsegments.Theresultsindicatedthatgenessuchaseve,ben,DfdandScrwerealsoinvolvedinsegmentaldevelopmentandmorphologicalestablishmentofhoneybeeatlarvalstage.Sometechnicaldetailsaboutwholemountembryoinsituhybridizationwer

6、ealsodiscussed,forexample,probelabelling,probepreservation,signaldetection,timelengthforsamplefixationbyparaformalclehyde,timelengthforsampledigestionbyproteinase,andoperationtechnique.Keywords:Honeybees;Larva;Developmentalgene;Hybridizationinsitu果蝇胚胎的早期发育主要涉及胚轴形成、体节形态发生素构建了系统(前端、后端、末端和背形成、肢芽和

7、器官原基形成及其一系列相关的细胞腹)的方位和确定了胚轴(前-后轴,背-腹轴)的分化过程,并受到相应发育基因的多层次、网络性形成。之后,分节基因包括间隙基因、对控基因和的级联调控。首先,母体坐标基因的表达产物——体节极性基因把早期胚胎沿前-后轴分成一系列间隔基金项目:福建省自然科学基金资助项目(2009N0003)。作者简介:穆忠华(1986-),女,汉族,辽宁省葫芦岛市,硕士研究生。主要从事蜜蜂饲养与繁育研究。福建农林大学蜂学学院。E-mail:502284610@q

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