ssr 标记辅助芥蓝× 甘蓝型油菜种间杂交后代的遗传背景筛选

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1、研究论文中国蔬菜CHINAVEGETABLES2015（8）：14-21SSR标记辅助芥蓝×甘蓝型油菜种间杂交后代的遗传背景筛选*于海龙　方智远　杨丽梅　刘玉梅　庄　木　李占省　吕红豪　张扬勇（中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京100081）摘　要：为筛选芥蓝×甘蓝型油菜种间杂交后代的遗传背景，加速回交转育进程，采用蕾期授粉结合胚挽救手段进行远缘杂交，获得芥蓝和甘蓝型油菜的种间杂种F1和BC1群体。利用已有的220对SSR引物对双亲进行多态性筛选，获得多态性引物51对。挑选均匀分布在甘蓝9条染色体上、扩增稳定、条带

2、清晰的33对多态性SSR引物，对3株F1单株和35株BC1单株进行遗传背景筛选。NTSYSpc2.11a分析结果表明：F1植株的遗传背景与亲本甘蓝型油菜更为接近，遗传相似系数为0.74；而BC1植株的遗传背景差异较大，与亲本芥蓝的遗传相似系数在0.26～0.65之间。在35株BC1植株中，单株14Y1与芥蓝的遗传背景最为相近，形态观察结果进一步验证了该单株的遗传背景与回交亲本芥蓝更相似，可用于下一步回交转育。关键词：芥蓝；甘蓝型油菜；种间杂种；遗传背景；SSR标记芥蓝（Brassicaoleraceavar.alb

3、oglabra，CC，的亲和性。韩甫（2011）利用芥菜型油菜与芥蓝进2n=2x=18）属十字花科芸薹属甘蓝种的一个变种，行种间杂交，获得异源三倍体种间杂种，并对影响以花薹为主要食用器官，是芸薹属中重要的蔬菜作种间杂交的因素、杂种性状特征及种间杂种小孢子物之一。相对于大白菜和结球甘蓝，芥蓝种质资源培养进行了研究。陈洪高（2006）通过萝卜与白花较少，遗传背景比较狭窄。远缘杂交是丰富芸薹属芥蓝杂交，合成了萝卜-芥蓝异源四倍体，该异植物种质资源的重要手段之一（林超等，2007）。源四倍体可用作向甘蓝型油菜转移萝卜优异性状的

4、通过远缘杂交可以打破种、属间的生殖隔离，有桥梁材料。满红等（2007）利用四倍体菜薹和四倍效地进行不同种、属间杂交，创造植物新类型、体芥蓝杂交，获得了菜薹和芥蓝的异源四倍体种间获得新种质资源，因此远缘杂交可以作为拓宽芥蓝杂种。遗传背景的有效途径之一。此外，由于芥蓝的生长甘蓝型油菜（Brassicanapus，AACC）是由甘周期短，1a可繁殖2～3代，因此利用芥蓝进行远蓝（B.oleracea，CC）和白菜（B.rapa，AA）杂交缘杂交可快速实现目的性状的转移和改良。乔海云后自然加倍获得的，属于十字花科芸薹属，19

5、世（2012）利用蕾期授粉结合胚挽救技术获得了芥蓝纪30年代从欧洲引进，是我国重要的油料作物之与菜薹的种间杂种，并研究了菜薹与芥蓝种间杂交一。甘蓝型油菜作为甘蓝类蔬菜的近缘种之一，具有一些控制特异性状的优异基因，如抗根肿病基因（季海雯，2013）、Ogura细胞质雄性不育育性恢复于海龙，男，硕士研究生，专业方向：蔬菜遗传育种，E-mail：yuhailongnet@163.com基因（Primard-Brissetetal.，2005）等，这正是甘*通讯作者（Correspondingauthor）：张扬勇，男，

6、副研究员，硕士生导蓝类蔬菜所缺乏的。利用芥蓝和甘蓝型油菜远缘杂师，专业方向：蔬菜遗传育种，E-mail：zhangyangyong@caas.cn交可以有效地拓宽芥蓝的遗传背景，可作为创制芥收稿日期：2015-03-15；接受日期：2015-04-29蓝新种质的一条途径。但到目前为止，关于芥蓝和基金项目：国家“863”计划项目（2012AA100202），创新能力专项甘蓝型油菜种间杂交的研究较少，且甘蓝型油菜与资金项目（2014EG134236），农业部大宗蔬菜产业技术体系项目（CARS-25），农业部园艺作物遗传改良

7、重点开放实验室项目甘蓝类蔬菜远缘杂交困难，后代育性低，很难获得—14—《中国蔬菜》学术论文下载www.cnveg.org中国蔬菜CHINAVEGETABLES研究论文种间杂种。结合胚挽救方法获得BC1群体。21世纪初，分子标记技术就已经应用于甘蓝1.3　多态性SSR标记的筛选与背景标记的确定类蔬菜的遗传育种（王晓武和方智远，2001），利用王庆彪等（2014）设计开发的甘蓝20对随着甘蓝基因组测序与重测序的完成（Liuetal.，指纹图谱EST-SSR核心引物，以及选取本所甘蓝2014）以及生物信息学技术的发

8、展，越来越多的分课题组设计开发的均匀分布在甘蓝9条染色体上的子标记得以开发，并用于甘蓝亲缘关系和遗传背200对SSR引物，对双亲（芥蓝、甘蓝型油菜）进景多样性分析（刘基生等，2014），以及品种指纹行多态性筛选，选取扩增稳定、条带清晰、在双亲图谱构建和种子纯度鉴定（王庆彪等，2014）等间有多态性的引物用于杂交