SSR标记技术在甘蓝型油菜杂交种纯度鉴定中的应用

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1、第35卷第3期湖南农业大学学报(自然科学版)vo1．35NO．32009年6月JournalofHunanAgriculturalUniversity(NaturalSciences)Jun．2009文章编号：1007．1032(2009)03-0229．04SSR标记技术在甘蓝型油菜杂交种纯度鉴定中的应用曲亮，陈卫江，李莓，王同华f湖南省作物研究所，湖南长沙410125)摘要：利用简化的SSR标记技术对甘蓝型油菜杂交种丰油701、丰油730和湘杂油4号的制种样进行纯度分析，并将丰油701收获样各单株的SSR分析结果与其育性表现进行了比对．结果筛选了38对SSR引物，其中引物Nal

2、0．D09在3个品种的不育系与恢复系间的扩增片段大小均存在差异．种植鉴定和SSR鉴定的纯度比较分析表明，SSR技术得到的纯度鉴定结果较种植鉴定的结果更为可靠．关键词：油菜；杂交种；纯度鉴定；微卫星中图分类号：$566．403．8文献标识码：AApplicationofSSRmolecularmarkertechniqueonpurityidentificationofhybridinrapeseedQULiang，CHENWei-jiang，LIMei，WANGTong-hua(HunanCropResearchInstitute，Changsha410125，China)Abst

3、ract：Purityidentificationofseedproductionsamplesofthreehybridrapeseed(BrasscanapusL．Jvarieties，Fengyou701，Fengyou730andXiangzayou4，wasconductedbysimplifiedSSRmolecularmarkertechnique，andtheidentificationresultsonprematurepodssamplesandmatureseedssamplesbytwoidentificationmethods，SSRandplanting

4、infield，werecompared．Andthen，SSRidentificationresultsandthefertilityperformanceofallplantscamefrommaturedseedsofFengyou701werecontrastedonebyone．Theseresultsshowedthat：Therewasabigdiferenceinthesizeoftheamplificationsegmentbetweenthe3varietiesfrombothfertilityandrestorelinesbyprimerNal0一D09sel

5、ectedfrom38SSRprimerpairs．ComparativeanalysisindicatedthatSSRmolecularmarkertechniqueproducedahigherveracityinpurityidentification．Keywords：rapeseed；hybrid；purityidentification；SSR油菜波里马细胞质雄性不育系的育性对温度标记多态性相对较低，对于某些杂交组合难以将其反应较敏感，在温度变化较大的情况下易产生微亲本与杂交种区分开[2】．随着分子生物学技术的迅量花粉⋯，并以自交方式产生不育假杂种，对油菜速发展，分子

6、标记已经逐渐被应用到作物的种子纯杂交制种影响较大，及时、有效地检测杂交种中度鉴定工作中．SSR标记相对其他分子标记而言，不育母本植株的数量成为油菜杂交种纯度鉴定的具有共显遗传、多态性高、易于检测pJ等优点，已关键．成为人们在作物遗传多样性和品种纯度及真伪鉴目前室内鉴定油菜杂交种纯度主要是采用同工定方面首选的分子标记类型．朱四元等【4J的研究表酶和贮藏蛋白电泳技术，但同工酶标记和贮藏蛋白明，不同类型抗虫棉品种的遗传多样性的SSR分析结果是可靠的．詹庆才【5】利用SSR标记有效区分出收稿日期：2009．03．18了人为掺入水稻杂交种的假杂种．梅德圣等【6j利用基金项目：国家科技支撑计划

7、项目(2o06BAD0lA04)SSR鉴定油杂8号种子纯度，并与种植鉴定的结果作者简介：曲亮(1976一)，男，湖南澧县人，助理研究员，主要从事油菜育种研究，qufeiyu@126．com．进行了比较，认为两者结果非常接近．田筑萍等』230湖南农业大学学报(自然科学版)2009年6月利用特殊SSR引物组合有效地对油菜种子的真实min，10000r／min离心5min，弃上清液，]31375％的性和纯度进行了鉴定．笔者对SSR标记技术环节进乙醇，静置1min，弃上清，置