直胆红素(dbil)重氮盐法

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1、项目直胆红素(DBIL)方法重氮盐法目录1.检测原理2.标本采集与处理2.1受检者的准备2.2静脉采血2.3抗凝剂2.4标本处理3.试剂3.1试剂3.2校准血清3.3试剂与校准血清的稳定性4.仪器5.操作6.计算7.操作性能7.1精密度7.2准确度7.3灵敏度7.4可报告范围7.5特异性7.6干扰8.参考值9.临床意义附录A:参数1.检测原理对氨基苯磺酸+HCl+NaNO2---------氯化重氮苯磺酸+NaCl胆红素+氯化重氮苯磺酸-------偶氮胆红素2.标本采集与处理2.1受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意

2、有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。2.2静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。2.3抗凝剂：血浆多主张用EDTANa2（1mg/mL）抗凝。2.4标本处理：血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清

3、或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。3．试剂3.1试剂：本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司DBIL试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：组成混合后初始浓度R1：对氨基苯磺酸32mmol/L盐酸165mmol/LR2：亚硝酸钠60mmol/L标准液：64.5umol/L(3.75mg/dL)3.2校准血清：使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。校准频次：空白定标：每日需做试剂空白定标。全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。3.3试剂与校准血清的稳定性：原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。试剂

4、储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂R1颜色为无色，试剂R2颜色为无色，当试剂变色，按照试剂失效处理。多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。4．仪器KONELAB30型号仪器。性能：波长630nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。5．操作样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为终点法。参数见后附，附录A。试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。6．计算A标本直接胆红素浓度=----------------×标准液浓度A标准7．操作性能7.

5、1精密度：批内CV<#％,批间CV<#％。7.2准确度：检测结果的相对不准确度≤±10%。7.3灵敏度：直接胆红素浓度为：20μmol/L时，显色吸光度A450nm为0.158～0.194。7.4可报告范围：血清与试剂用量之比为1:25时，测定上限为340μmol/L。7.5特异性：测量值在给定值的90%-110％范围内。7.6干扰：内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。8．参考值0～8.6μmol/L9．临床意义胆红素是老化的血红细胞中血红蛋白的代谢产物,血液中总胆红素和直接胆红素的含量测定有利于肝病和黄疸病

6、的诊断。直接胆红素是红肝细胞代谢后生成，经胆道系统随胆汁一起排泄。由于各种原因引起的肝内阻塞及肝外阻塞，使胆汁排泄途径受阻或排泄不畅，致使胆汁淤积，肝胆管的内压逐渐升高，导致毛细胆管破裂，直接胆红素经淋巴间隙或血窦进入血液循环，使血中直接胆红素升高。直接胆红素升高于阻塞性黄疸、如胆石症、肝癌、胰头癌等。附录A:参数