高效毛细管电泳指纹图谱在中药研究中的应用

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1、高效毛细管电泳指纹图谱在中药研究中的应用摘要:以中药指纹图谱质量控制特征为基础,综述了毛细管电泳在中药指纹图谱方面应用的基础理论和方法。介绍了毛细管电泳指纹图谱的优势,毛细管电泳指纹图谱的研究方法与评价方法及其在中药质量控制中的应用。关键词:毛细管电泳;指纹图谱;毛细管电泳-质谱联用;中药;应用TheapplicationofcapillaryelectrophoresisfingerprintsoftraditionalChinesemedicinesAbstract:Toreviewthebasictheoriesandmethodsofcapillaryelectrophore

2、sisfingerprint(CEFP)oftraditionalChinesemedicinesbasedonqualitycontrolledcharacteristicsoftraditionalChinesemedicinefingerprint.TheadvantagesofCEFPwereintroduced,andtheresearchandappraisalmethodofCEFPfortraditionalChinesemedicinewerealsodiscussed.Keywords:capillaryelectrophoresis(CE);chromatogr

3、aphicfingerprints;capillaryelectrophoresis-massspectrometry(CE-MS);traditionalChinesemedicines(TCMs);application任何药物都必须安全、有效。随着中药在世界各地的影响和应用日益广泛,人们对中药的安全性、有效性、稳定性提出了更高的要求,但中药的质量控制一直是制约中药现代化与出口的“瓶颈”。在我国,众多的科研工作者致力于中药质量控制方法的研究,其中色谱法的应用取得了可喜的成绩[1,2]。仅以《中华人民共和国药典》2005版一部[3]为例,用薄层色谱法(TLC)鉴别的品种达1523项

4、,用于含量测定的45项;用高效液相色谱法(HPLC)测含量的品种达479种,涉及518项;用气相色谱法(GC)鉴别和进行含量测定的有47种。与2000版中国药典比较,采用TLC,HPLC及GC鉴别的品种分别大幅度增加了866,413及37项。可见色谱法在中药质量控制中应用之广泛。虽然中药的质量控制有了很大的进步,但由于中药的成分极其复杂,中成药则尤甚,更由于其疗效是基于中药物质群的整体作用,因此对少数成分的定性、定量,不足以代表中药质量的总体表征。在这种情况下,中药指纹图谱应运而生。1.高效毛细管电泳1.1高效毛细管电泳概述高效毛细管电泳(highperformancecapilla

5、ryelectrophoresis,HPCE),是以高压电场为驱动力,以毛细管作为分离通道,依据样品中各组分之间淌度和分配行为的差异而实现分离的一类液相分离技术。CE仪器基本结构大致包括毛细管柱、进样系统、高压系统、检测系统和数据采集系统等。毛细管柱是CE的核心部件,石英毛细管是当今的首选材料。最常用的毛细管内径为(20~75)cm,有效长度为(50~75)cm。进样系统采用自动进样方式,主要有流体力学和电动方式,高压系统要能提供130kV的直流电压。检测器目前最常用的是紫外—可见光检测器和荧光检测器等。CE作为一种经典电泳技术与现代微柱分离有机结合的新兴分离技术,自上世纪80年代问

6、世以来,得到了迅速的发展,其研究和应用涉及环境分析、药物分离、生化分析等几乎所有的分析领域,引起学术届,尤其是色谱界的广泛关注。这与它独特的优点是密不可分的:(1)分离时间短。由于毛细管具有良好的散热功能,分离毛细管的纵向电场强度可达到400V/cm以上,因而分离操作可以在很短的时间内(最快可在几秒钟)完成。(2)具有很高的分离效率。理论塔板数达到400,000/m以上,最高达10,000,000/m数量级。(3)仪器结构简单,操作简便,运行成本低,且易实现自动化。(4)样品用量极少(仅为纳升级),绝对检测限较低。1.2 毛细管电泳法发展的历程毛细管电泳(capillaryelect

7、rophoresis,CE),或称高效毛细管电泳(highperformancecapillaryelectrophoresis,HPCE)是在毛细管中(内径≤100μm,常用75μm),在电场作用下带电质点(离子或胶粒)在电解质溶液中,向电荷相反的电极以不同速度迁移而分离的现象称为毛细管电泳法。1981年Jorgenson和Luckacs[4]首次使用内径75μm的石英毛细管和30kV的高电压,获得了高于40万理论塔板数的分离柱效,标志着CE技术的诞生,

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