db22t 2263-2015 大豆抗灰斑病鉴定技术规程

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1、ICS65.020.01B05备案号：44984-2015DB22吉林省地方标准DB22/T2263—2015大豆抗灰斑病鉴定技术规程Ruleforevaluationofsoybeanresistancetograyleafspot2015-02-01发布2015-03-01实施吉林省质量技术监督局发布DB22/T2263—2015前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由吉林省农业委员会提出并归口。本标准起草单位：吉林省农业科学院。本标准主要起草人：董志敏、刘佳、张伟、王丽、陈亮、衣志刚。IDB22/T2263—2015大豆抗灰斑病鉴定技术规程1范围本标

2、准规定了人工控制条件下，大豆抗灰斑病鉴定活体接种法技术中涉及的病原物接种体制备、基础设施、人工接种、田间管理和抗性调查与评价。本标准适用于大豆灰斑病抗性鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T1248玉米抗病虫性鉴定技术规范NY/T1857黄瓜主要病害抗病性鉴定技术规程NY/T1858番茄主要病害抗病性鉴定技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1抗病性diseaseresistance植物避免、中止或阻滞病原物侵入与拓

3、展，减轻发病和损失程度的一类特性。3.2抗病性鉴定identificationofdiseaseresistance通过适宜技术或方法鉴别植物对特定病害的抵抗水平。3.3抗性评价evaluationofresistance根据采用的技术标准判别植物寄主对特定病虫害反应程度和抵抗水平的描述。[NY/T1248.1-2006，定义2.6]3.4致病性pathogenicity病原物侵染寄主植物引起发病的能力。[NY/T1248.1-2006，定义2.3]3.51DB22/T2263—2015培养基medium自然或人工配制的、可以使病原体在其生长和繁殖的基质。3.6接种体inocu

4、lum用于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分。[NY/T1857.1-2010，定义2.7]3.7人工接种artificialinoculation在人工控制条件下，将接种体置于植物体适当部位并使之发病的过程。3.8接种悬浮液inoculumsuspension用于接种的含有定量接种体的液体[NY/T1857.3-2010，定义2.10]3.9病情级别diseaseratingscale定量植物个体或群体发病程度的数值化描述。[NY/T1248.1-2006，定义2.5]3.10生理小种physiologicalrace病原物种内在形态上无差异，但在不同种植物和品种上具有显

5、著致病性差异的类群。[NY/T1857.3-2010，定义2.11]3.11鉴别寄主identificationhost用于鉴定和区分特定病原物的生理小种/致病型/株系的一套带有不同抗性基因的寄主品种、品系或材料。3.12大豆灰斑病grayleafspotinsoybean大豆灰斑病由大豆尾孢菌CercosporasojinaHara所引起大豆真菌性病害，又称斑点病、斑疹病、蛙眼病。3.13病斑系数diseasespotcoefficient衡量植物病斑大小和多少的数值。4病原物接种体制备2DB22/T2263—20154.1病原物生理小种的选择选择经权威部门纯化和鉴定的大豆尾

6、孢菌单个或多个生理小种。4.2培养基的制备4.2.1马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）将200g马铃薯去皮切碎，文火煮30min，滤出残渣，加入20g琼脂粉和20g葡萄糖，溶解后，补水至1000mL，每管分装5ml，121℃高压灭菌40min，摆斜面，冷却备用。4.2.2高粱粒培养基挑选大小均匀、饱满的高粱粒，清洗后浸泡一夜，文火煮40min～60min后，达到透而不烂，沥净水，装入250mL三角瓶中，装入量150mL左右，121℃高压灭菌60min，冷却备用。4.3病原菌的繁殖4.3.1一级菌大豆灰斑病菌接种于马铃薯葡萄糖琼脂试管斜面培养基，22℃～25℃暗培养7d～10d，待

7、菌丝布满斜面培养基，停止培养，选取无杂菌的试管作为一级菌。在扩繁二级菌前，将之短暂保存于4℃冰箱，时间不可过长，以7d内为宜。同时，将生长较均匀铺满斜面培养基的试管，置4℃冰箱保存，作为以后接种的初级菌源。每3个至6个月转管培养1次，保持菌的活性。4.3.2二级菌一级菌接种于高粱粒三角瓶培养基，22℃～25℃暗培养30d～40d。待菌丝浸透高粱粒，高粱粒变黑时，停止培养。在发孢前，将之短暂保存于4℃冰箱，时间不可过长，以7d内为宜。4.4产孢及接种悬浮液制备4.4.1产孢将高粱粒二级菌摊铺于