大豆灰斑病种质资源鉴定及抗病基因的rapd标记

大豆灰斑病种质资源鉴定及抗病基因的rapd标记

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1、武小成东北农业大学硕士论文PCR)e.基因表达指纹(GEF,GeneExpressionFingerprinting)f.cDNA3'端限制酶切片段显示(cDNA3'端RFD,cDNA3'end-RestrictionFragmentDisplay)g.cDNA代表性差别筛选(cDNARDA,cDNARepresentationalDiferenceAnalysis)h一抑制性扣除(或减去)杂交(SSH,SuppressionSubtractiveHybridization)现在一般以RFLP,RAPD,SSR和AFLP应用最为广泛,我们这里用的是RAPD,因为RAPD技术

2、在成本低、方便、易用。但稳定性却低于其它标记,为了克服这一缺点,Paran和Michelmore(1993)在RAPD基础上提出7SCAR(SequencedCharacterizedAmplifiedRegion)标记。他们对特异RAPD片段进行测序,大大提高了RAPD的易用性。裹1-1不同分子标记技术比较种类一一竺LP分布晋遍可靠性高高高重复性高中高高多态性低中高非常高遗传性共显性多为显性共显性多为显性DNA用量2-30ug1-ng30-100ng100ng放射性一般有无无/有一般有技术难度中等简单简单/中等中等样品信息1t低·中高高非常高时间因素长短短中等检测部分低拷

3、贝编码区域整个基因组整个基因组整个基因组1.2.2分子标记在大豆抗病荃因定位中的应用大豆是重要的油料和粮食作物,是世界上食用油和植物蛋白的主要来源.一些病害的发生常对大豆的产且和品质造成严重影响。培育优良抗病的品种一直是国内外大豆育种工作者的重要目标。现代分子标记技术的发展为大豆抗病遗传育种工作提供了有力的辅助工具。以下旨在介绍分子标记在大豆抗病荃因定位上应用的最新进展。2000年12月1.2.2.1质量抗病性状的基因定位质t性状常由一个或少数几个主基因控制,遗传相对简单,目前己定位了大量抗病基因(表1-2)。质量抗病基因可通过己建立的连锁图谱进行,即用作图群表1-2植物质

4、皿抗病荃因定位研究定位群体标记类型参考文献苹果疮痴病RAPID,STSCheng等(1998)Venturiainaegualis稻瘟病皿RFLP,SAPHitalmani等(1995)Pyriculariagrisea水稻白叶枯病NILRFLP,SAPHuang等(1997)Xanthomonasoryzae芥菜白锈病DHRAPDPrabhu等(1998)Albugocandida大麦黄矮病AFLP,SCARPaltridge等(1998)Barleyyellowdwarfluteovirus番茄黄萎病NILRAPD,SCARKawchuk等(1998)Verticill

5、iumdahliae番茄花叶病毒病NILRAPD,SCAROhmori等(1996)Tomatomosaicvirus番茄根腐病RAPD、RFLP、Doganlar等(1998)NILPyrenochaetalycopersiciSCAR花生根结线虫BC,F2RAPDBurow等(1996)Meloidogynearenaria花生根结线虫RAPIDRFLP、Garcia等(1996)MeloidogynearenariaSCAR向日葵锈病RAPD,SCARLawson等(1998)Pucciniahelianthi菜豆炭疽病RAPD、RFLPNILAdam-Blondon

6、等(1994)ColletotrichumlindemuthianumSCAR菜豆炭疽病F,RAPD,SCARYoung等(1998)Colletotrichumlindemuthianum菜豆黄花叶病毒病RILRAPDUrrea等(1996)Beangoldenmosaicvirus大豆花叶病毒病RFLP,YU等(1994)武小候东北农业大学硕士论文体定位在该群体中出现分离的抗病基因.以图谱为基础,己在番茄(Martin等,1993)、拟南芥(Bent等.1994)和水稻(Song等,1995)等植物上定位克隆到几个抗病蓦因。随着高密度遗传图谱和物理图诺的构建,以图谱为荃

7、础克隆抗病蓬因有着广阔的应用前景。例如目前水稻的图谱己有1383个分子标记,其中有883个标记来自表达的荃因,每两个标记之间的平均距离约有300kb,这对水稻荃因的克隆及分析提供了有利的条件和丰畜的信息(Shimamoto等,1995).但同时也要看到,用作图群体定位荃因的方法往往具有一定的局限性,例如定位的抗病基因与标记间的距离取决于所用连锁图上的标记密度.因而它不适于尚无连锁图或连锁图饱和程度较低的植物。利用近等基因系和分离群体分组分析法可以克服上述局限性。近等基因系(NearIsogenicLines,NIL

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