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《1338例男性无精症或少精症患者Y染色体微缺失分析_于海洋》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
2023年2月第30卷第2期·283··论著·（调查统计）1338例男性无精症或少精症患者Y染色体微缺失分析123*于海洋，杨静静，曾昭书12（郑州大学第三附属医院检验科，河南郑州450052；郑州大学第三附属医院生殖中心，河南郑州450052；3郑州大学基础医学院，河南郑州450001）【摘要】目的探讨男性无精症或少精症患者的Y染色体微缺失情况。方法1338例男性不育患者按照精液常规检查结果分为无精症组、严重少精症组、少精症组，选取同期320例健康男性为正常对照组，应用荧光定量PCR技术进行AZF区微缺失分析。结果无精症组和严重少精症组的Y染色体微缺失发生率均显著高于正常对照组（P＜0．05）。在入组的研究对象中，AZFc位点缺失在男性不育中占比最高，为4．9％。在118例Y染色体微缺失患者中，共有25例染色体核型异常，其中以47,XXY核型占比最高，为8．5％。结论Y染色体微缺失检测是男性少精症或无精症等的首选临床检测项目，对男性不育的诊断有重要的指导价值。【关键词】无精症；少精症；Y染色体微缺失；不育中图分类号：R698+.2文献标识码：Adoi:10.3969/j.issn.1674-4659.2023.02.0283AnalysisofYChromosomeMicrodeletionsin1338MalePatientswithAzoospermiaorOligozoospermia//YUHaiyang1,YANGJingjing2,ZENGZhaoshu3*(1ClinicalLaboratory,theThirdAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,China;2ReproductiveCenter,theThirdAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,China;3BasicMedicalCol-lege,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450001,China;*Correspondingauthor:ZENGZhaoshu,E-mail:zzs@zzu.edu.cn)[Abstract]ObjectiveToexploretheYchromosomemicrodeletioninmalepatientswithazoospermiaoroligozoospermia.MethodsAtotalof1338malepatientswithinfertileweredividedintoazoospermiagroup,severeoligozoospermiagroupandoligozoospermiagroupaccordingtotheresultsofsemenroutineexamination,and320healthymenwereselectedasnormalcontrolgroup.AZFzonemicrodeletionanalysiswasperformedbyfluorescencequantitativePCR.ResultsTheincidenceofYchromosomemicrodeletioninnormalcontrolgroupwaslowerthanthatinazoospermiagroupandsevereoligozoospermiagroup(P<0.05).Amongthesubjectsenrolled,theAZFclocusdeletionaccountedforthehighestproportion(4.9%)ofmaleinfertility.Among118patientswithYchromosomemicrodeletion,25caseshadchromosomalkaryotypeabnormalities,ofwhich47,XXYkaryotypeaccountedforthehighestproportion(8.5%).ConclusionsYchromosomemicrodeletiondetectionisthepreferredclinicaldetectionprojectformaleoligospermiaorazoospermia,whichhasimportantguidingvalueforthediagnosisofmaleinfertility.[Keywords]Azoospermia;Oligozoospermia;Ychromosomemicrodeletion;Infertility据报道［1］，全球范围内的育龄夫妻中10％～15％患有不按照精液常规检查结果分为三组，即：无精症组（n＝720），育，其中因男性原因导致不育的占比约为50％。男性不育的病年龄22～58岁，平均年龄（31．15±5．20）岁；严重少精症组因较多，如染色体异常、Y染色体微缺失、生殖系统炎症以及（n＝395），年龄22～60岁，平均年龄（31．23±5．57）岁；少内分泌疾病等，其中Y染色体无精子因子（AZF）微缺失是导精症组（n＝223），年龄22～51岁，平均年龄（30．93±5．57）致男性不育的第二大因素［2］。AZF是影响精子生成的重要基岁。选取同期320例健康男性为正常对照组，年龄22～56岁，因，不同区域（AZFa、AZFb、AZFc）的缺失有着不同的临床平均年龄（31．78±5．44）岁。四组研究对象的一般资料比较，结局。本研究以无精症或少精症患者为研究对象，通过实时荧差异无统计学意义（P＞0．05）。光定量PCR方法检测AZF，探讨男性无精症或少精症患者的Y1．2入选标准纳入标准：①均进行精液常规检查；②符合染色体微缺失情况，为男性不育患者的诊疗提供依据。WHO第5版《人类精液检查与处理实验室手册》［3］中的相关标准；③均来自河南地区；④对检测项目知情同意，且配合度1资料与方法良好。排除标准：①因内分泌紊乱、生殖系统炎症、精索静脉1．1一般资料回顾性选取2017年1月至2022年6月在郑州曲张等因素导致的无精症；②生理性不育的患者；③因其他病大学第三附属医院就诊的1338例男性不育患者为研究对象，理因素导致不育的患者。1．3方法收稿日期：2022－10－101．3．1精液常规检查根据本院检验科《精液采集指南》采集精作者简介：于海洋（1986－），男，河南省原阳县人，本科学历，主管液，按照《人类精液检查与处理实验室手册》中的标准进行常检验师，研究方向：单基因遗传病相关。规精液分析，检测结果参考以下标准进行判定：每次射精精子*通讯作者：曾昭书（1973－），男，河南信阳人，博士研究生学历，总数≥39×106／mL，精子向前运动百分率＞32％，低于15×教授，研究方向：法医物证相关；E－mail：zzs＠zzu．edu．cn。106／mL为少精，低于5×106／mL为严重少精。
1·284·2023年2月第30卷第2期1．3．2Y染色体微缺失采集研究对象外周静脉血2～3mL，3讨论EDTA－K2抗凝。DNA的提取按照QIAamp血液DNA纯化Mini近年来，随着新兴男性学科和遗传学的快速发展，男性无试剂盒说明书进行，并置于－20℃的条件下保存待测，检测试精症或少精症逐渐受到了临床医学的重视。有研究［4］显示，剂盒由上海投景生命科技股份有限公司生产。共检测AZFa、普通人群Y染色体微缺失的发生率为1／4000，但在不育男性AZFb、AZFc三个区域的6个序列：sY84、sY86、sY127、群体中的发生率会明显升高，已成为了导致男性不育的第二大sY134、sY254、sY255。同时，设置男性性别决定基因（SRY）因素。目前已经知道Y染色体微缺失是男性不育的主要诱因，和编码锌指蛋白基因（ZFY）两个内对照基因。PCR扩增反应但其具体缺失机制尚未达成统一共识。AZFa、AZFb、AZFc是条件为：第一阶段50℃，2min；第二阶段95℃，5min；第AZF的3个独立区域，AZFa区域缺失会导致精子形成受阻；三阶段95℃，15s，60℃，30s，72℃，30s，进行38个循AZFb区域缺失则会通过阻断精子发育，使其停止在减数分裂环；第四阶段72℃，5min。收集第三阶段60℃的FAM／VIC／前中期，造成精子生成障碍；AZFc缺失则会影响睾丸生精过ROX／Cy5信号，并在FAM通道结果显示为典型S型扩增曲线程［5－7］。本研究结果显示，在入组的研究对象中，共有118例且CT＜32时，进行结果判读。患者发生Y染色体微缺失，发生率为7．1％，低于洛阳地区的1．4统计学方法使用SPSS22．0统计软件处理数据。计量资料10．12％，但与广东清远（6．1％）、贵州（7．13％）、新疆（6％）以x±s表示，采用t检验；计数资料以n（％）表示，采用χ2［8］等地的缺失率相近，表明AZF基因的缺失率存在地域性差检验或秩和检验。P＜0．05为差异具有统计学意义。异。AZFc位点缺失81例（4．9％），AZFab位点缺失15例（0．9％），AZFa位点缺失11例（0．7％），提示AZFc位点缺失是2结果Y染色体微缺失的主要类型。另外，无精症组和严重少精症组2．1四组研究对象的Y染色体微缺失情况比较无精症组和严的Y染色体微缺失发生率均显著高于正常对照组（P＜0．05），重少精症组的Y染色体微缺失发生率均显著高于正常对照组，表明Y染色体微缺失与男性无精症或少精症密切相关。通常而差异有统计学意义（χ2＝30．629、35．932，均P＜0．001）。在入言，染色体核型异常可导致无精症，但染色体核型异常与Y染组的研究对象中，AZFc位点缺失81例（4．9％），AZFab位点色体微缺失之间是否存在联系尚无报道明确阐述。本研究结果缺失15例（0．9％），AZFa位点缺失11例（0．7％），AZFabc位显示，在118例Y染色体微缺失患者中，共有25例染色体核点缺失6例（0．4％），AZFb位点缺失5例（0．3％），其中AZFc型异常，发生率为21．2％，这提示对于无精症或少精症患者，位点缺失在男性不育中占比最高，为4．9％。见表1。应当同时进行遗传学分析和Y染色体微缺失检测。表1四组研究对象Y染色体微缺失情况比较［n（％）］综上所述，AZF基因在男性的精子生成过程中有着主导作组别nAZFaAZFbAZFcAZFabAZFabc缺失总数用，不同区域的缺失会导致精液数量、活力的异常，进而影响无精症组72010（1.4）5（0.7）42（5.8）15（0.9）6（0.8）78（10.8）*生育。Y染色体微缺失检测是男性少精症或无精症等的首选临严重少精症组3950（0.0）0（0.0）38（9.6）0（0.0）0（0.0）38（9.6）*床检测项目，对男性不育的诊断有重要的指导价值。少精症组2231（0.4）0（0.0）1（0.4）0（0.0）0（0.0）2（0.9）正常对照组3200（0.0）0（0.0）0（0.0）0（0.0）0（0.0）0（0.0）参考文献合计165811（0.7）5（0.3）81（4.9）15（0.9）6（0.4）118（7.1）[1]马科,周燕,董弘,等.男性无精症或少精症患者细胞遗传学及Y染注：与正常对照组比较，*P＜0.05。色体微缺失分析[J].包头医学院学报,2020,36(3):12-13,25.[2]刘雅峰,高勇,钟依平,等.广州地区无精子症和严重少精子症者Y2．2Y染色体微缺失患者的染色体核型分析在118例Y染色染色体微缺失的筛查分析[J].中国优生与遗传杂志,2016,24体微缺失患者中，共有25例染色体核型异常，发生率为(8):27-286.21．2％，其中以47,XXY核型的占比最高，为8．5％（10／118），[3]陈振文,谷龙杰.精液分析标准化和精液质量评估———WHO《人类其次为46,XY(大Y)、46,XY(小Y)、46,XY,1qh＋，分别为精液检查与处理实验室手册》(第5版)出版[J].中国计划生育3．3％、2．5％、2．5％。见表2。学杂志,2012,20(1):58-62.表2Y染色体微缺失患者的染色体核型分析[4]刘晓红,闫丽盈,李蓉,乔杰.Y染色体微缺失与辅助生殖技术关系染色体核型类型例数占比的研究进展[J].生殖与避孕,2013,33(1):42-47,62.46,XY9378.8%[5]汪萍,宛传丹,胡卫华,等.Y染色体AZFc区域DAZ基因拷贝类型与46,XY(大Y)43.3%生精障碍相关性研究[J].中华男科学杂志,2018,24(4):376-379.46,XY(小Y）32.5%[6]杨舒婷,周明连,汤欣欣,等.不育男性患者Y染色体AZF区域微缺46,Y,inv(X)21.7%失及临床表现[J].中国计划生育学杂志,2020,28(9):1435-1438.46,XY,21S+21.7%[7]陈凯,王敬丽,李强,等.不育男性Y染色体AZF区域微缺失分析46,XYt(X,12)(q21;q14)10.8%[J].青岛大学医学院学报,2016,52(5):512-514,518.46,XY,1qh+32.5%[8]张燕,索峰,缑灵山,等.Y染色体微缺失检测对男性不育的临床价47,XXY108.5%值研究[J].现代检验医学杂志,2020,35(1):40-42.合计118100.0%（责任编辑：张普）
