无精、严重少精症患者细胞遗传学和y染色体微缺失研究

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1、无精、严重少精症患者细胞遗传学和Y染色体微缺失研究：杨丽，彭亮，胡小平，焦海燕，党洁，陈银涛，钟慧军，陆宏【摘要】目的探讨无精、少精及严重少精症与染色体核型异常和Y染色体无精子因子(AZF)微缺失的关系。方法采用常规外周血淋巴细胞染色体制备方法和多重聚合酶链反应技术，对136例(无精症98例，少精症24例，严重少精症14例)男性不育患者进行细胞遗传学和分子遗传学检测。结果染色体异常检出率为25%(34/136)，其中无精症占19.9%(27/136)，少精症占2.2%(3/136)，严重少精症占2.9%(4/136)；

2、Y染色体AZF缺失率6.6%(9/136)，其中无精症占5.1%(7/136)，严重少精症占1.5%(2/136)。结论染色体异常和Y染色体微缺失是男性不育的主要遗传因素，Y染色体异常与AZF缺失之间有一定关系。【关键词】无精症；严重少精症；染色体异常；AZF微缺失　　Abstract:ObjectiveToinvestigatetherelationshipbetosomeabnormalitiesandYchromosomemicrodeletionofazoospermiafactor(AZF)inpatient

3、siaandoligozoospermia.MethodsBothroutineperiphearlbloodlymphocytescytogeicanalysisanddetectionofAZFregionmicrodeletionofYchromosomebymultiplexPCRen,including98patientsia,24patientsiaand14patientsia.ResultsChromosomalabnormalitiesia,3oligozoospermiaand4severeolig

4、ozoospermia.MicrodeletionsinAZFregionicrodeletioniaandsevereoligozoospermiarespectively.ConclusionThefindingsindicatedthatchromosomalabnormalityandAZFmicrodeletionmightbeimportantgeiccausesformaleinfertility.AZFmicrodeletionmightbeassociatedosomeabnormalities.　　

5、Keyia;severeoligozoospermia;chromosomeabnormality;azoospermiafactormicrodeletion　　育龄夫妇中约10%～15%患有不育(olecularGeicsQualityNetultiplexPCR)。每次实验均以无菌蒸馏水和位于Y染色体短臂(Yq)的睾丸决定基因(SRY)为内对照，并选择正常生育男子DNA样品为阴性对照。每个AZF区域设置2个序列标签位点(STS)。AZFa为SY84、SY86；AZFb为SY127、SY134；AZFc为SY254

6、、SY255。所有DNA样品均经2次多重PCR完成，称为MultiplexA和B，每次多重PCR均包括AZFa、b、c区域的STS和对照基因引物。在MultiplexA中完成SRY、SY254、SY86、SY127的扩增；在MultiplexB中完成SRY、SY84、SY134、SY255的扩增。反应条件为：基因组DNA1μL，预混液10μL，引物混合液9μL，体系为20μL。扩增条件为：95℃3min，95℃30s，59℃30s，72℃30s，35个循环，最后72℃延伸10min。取PCR产物8μL加2μL6×上样缓

7、冲液，充分混合均匀后经3.0%琼脂糖凝胶电泳(恒压130V)40min，用GelDoc2000凝胶成像系统进行DNA电泳条带的观察。　　2结果　　2．1细胞遗传学检测结果　　136例无精、少精及严重少精症患者中共发现染色体明显异常34例，异常检出率为25%(34/136)，其中11例为Klinefelter'ssyndrome(47,XXY)，占异常检出率的8.09%(11/136)；46,XY(大Y，Y≥18)患者10例，占异常检出率的7.35%(10/136)；46,XY(小Y，Y≤21)患者10例，占异常检出率的

8、7.35%(10/136)；47,XYY患者1例，占0.74%(1/136)；46,XY(47,XYY，-9+?)患者2例，占1.47%(2/136)。无精症患者染色体异常检出率为19.9%(27/136)；少精症患者异常检出率为2.2%(3/136)；严重少精症患者异常检出率为2.9%(4/136)。结果见表1。表1无精、少精及