6种内生菌对发酵人参茎叶农药残留降解和皂苷转化的影响_田颖

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6种内生菌对发酵人参茎叶农药残留降解和皂苷转化的影响1，郜玉钢1,2，张雪1，高飞1，王茜1，臧埔1,2*田颖(1.吉林农业大学中药材学院，长春130118；2.吉林省人参工程技术研究中心，长春130118)摘要：目的研究6种内生菌对人参茎叶中5种农药残留降解和20种皂苷单体转化的影响。方法在同一培养条件下，通过GC、HPLC分别对6种人参内生芽孢杆菌处理前后人参茎叶中农药残留及人参皂苷含量进行测定，计算6种内生菌对人参茎叶中农药残留率和皂苷转化率，评价内生菌对人参茎叶转化产物质量的影响，优选出降农残和转化皂苷效果好的菌株。结果6种人参内生菌对人参茎叶中的5种农药残留均有降解作用，其中，多黏类芽孢杆菌对农药残留降解作用最强，氟啶胺、六六六、五氯硝基苯、毒死蜱、滴滴涕的降解率分别为86.90%，88.89%，79.88%，86.12%和86.67%(P<0.05)；对20种单体皂苷均有转化作用，其中，赖氨酸芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌转化人参茎叶皂苷作用最强，20种单体皂苷加和值分别为5.84%和5.85%(P<0.05)。结论6种内生菌对人参茎叶农药残留降解和皂苷转化的影响不同，多黏类芽孢杆菌降解农药残留效果最好，赖氨酸芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌转化人参皂苷效果最好，为提高人参茎叶总皂苷提供理论依据。关键词：人参内生菌；人参茎叶；农药残留降解；人参皂苷转化中图分类号：R282.2文献标志码：B文章编号：1007-7693(2023)04-0483-06DOI:10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2023.04.008引用本文：田颖,郜玉钢,张雪,等.6种内生菌对发酵人参茎叶农药残留降解和皂苷转化的影响[J].中国现代应用药学,2023,40(4):483-488.EffectsofSixKindsofEndophytesonPesticideResidueDegradationandConversionofSaponinsinGinsengStemsandLeavesTIANYing1,GAOYugang1,2,ZHANGXue1,GAOFei1,WANGXi1,ZANGPu1,2*(1.CollegeofChineseMedicinalMaterials,JilinAgriculturalUniversity,Changchun130118,China;2.JilinProvinceGinsengEngineeringTechnologyResearchCenter,Changchun130118,China)ABSTRACT:OBJECTIVETostudytheeffectsof6kindsofendophytesonthedegradationof5pesticideresiduesandtheconversionof20saponinmonomersinthestemandleavesofginseng.METHODSUnderthesamecultureconditions,thecontentsofpesticideresiduesandginsenosidesinthestemsandleavesofginsengbeforeandaftertreatmentwith6kindsofendophytesweredeterminedbyGCandHPLC,respectively.Thepesticideresiduerateandginsenosideconversionrateof6kindsofendophytieinstemsandleavesofginsengwerecalculated.Theeffectsofendophytesonthequalityoftransformationproductsofstemsandleavesofginsengwereevaluated,andthestrainswithgoodeffectofreducingagriculturalresiduesandtransformingginsenosideswereselected.RESULTSSixkindsofginsengendophytescoulddegradefivekindsofpesticideresiduesinginsengstemsandleaves,amongwhichBacilluspolymyxahadthestrongestdegradationeffectonpesticideresidues.Thedegradationratesoffluazinam,benzenehexachloride,pentachloronitrobenzene,chlorpyrifosanddichlorodiphenyltrichoroethanewere86.90%,88.89%,79.88%,86.12%and86.67%,respectively(P<0.05).Itcouldtransform20kindsofmonomersaponins,amongwhichBacilluslysineandBacilluscereushadthestrongesteffectontransformingginsengstemandleafsaponins,andthesumvaluesof20monomersaponinswere5.84%and5.85%respectively(P<0.05).CONCLUSIONThe6kindsofendophyteshavedifferenteffectsonpesticideresiduedegradationandconversionofsaponinsinginsengstemsandleaves,thePaenibacilluspolymyrahavethebestdegradationeffectonpesticideresidues,BacillusbsineandBacilluscereushavethebesteffectontransformingginsenosides,whichprovidetheoreticalbasisforimprovingthetotalginsenosidesofginsengstemsandleaves.KEYWORDS:ginsengendophytes;ginsengstemsandleaves;pesticideresiduedegradation;ginsenosidebiotransformation由于人参种植中农药过量违规使用，造成农化学降解和微生物降解，由于物理降解和化学降解药残留在土壤中，且残存时间长、代谢迟缓，导存在效率低、二次污染等弊端，而微生物降解安全致人参中农药残留超标、人参产品质量低下，因高效，因此微生物降解农残已成为应用最广泛的生此如何降解人参中农药残留、提高人参皂苷含量物修复农药污染的手段[1-2]，内生菌更是现阶段的研迫在眉睫。目前农药残留降解方法包括物理降解、究热点[3-4]。目前人参皂苷转化包括酶转化法和微基金项目：吉林省科技发展计划项目(20200708025YY)作者简介：田颖，女，硕士E-mail:1360677489@qq.com*通信作者：臧埔，女，副教授，硕导E-mail:zangpu@163.com中国现代应用药学2023年2月第40卷第4期ChinJModApplPharm,2023February,Vol.40No.4·483·

1生物转化法，由于酶转化法成本高而内生菌转化滴滴涕(批号：6154527)均购自迪马科技，纯度均>人参皂苷已经成功地提高某些皂苷的含量，并获98%；人参皂苷对照品Rgl(批号：201511)、Re(批得了一些稀有人参皂苷，因此内生菌转化皂苷号：201523)、Rg2(批号：201545)、Rg3(批号：更加可行。植物内生菌包含细菌、真菌和放线菌(一201506)、Rg5(批号：201524)、Rf(批号：201537)、类具有分支状菌丝体的细菌，革兰氏染色为阳性)，F1(批号：201549)、F2(批号：201521)、Rc(批号：近年来大量研究集中在内生菌的生物活性和植物201536)、Rd(批号：201579)、Rb1(批号：201501)、相互作用等方向[5-6]。而人参内生菌的相关研究主Rb2(批号：201551)、Rb3(批号：201518)、Rh2(批要集中于抑菌活性[7]、抗肿瘤活性[8-9]等方面，农号：201543)、compoundK(批号：201520)、药降解及人参皂苷转化研究相对较少。20(R)-Rh1(批号：201515)、Rk3(批号：201562)、内生菌中，细菌为主要农药降解菌株，降解Rh4(批号：201571)、原人参二醇(批号：201519)、农药种类主要是多氯联苯混合物、毒死蜱、邻苯原人参三醇(批号：201513)均来自吉林大学天然药二甲酸二丁酯、二嗪农、六六六、甲胺磷、氧乐物化学实验室，质量分数均>98%。果和乐果等[10-15]。笔者所在实验室已分离鉴定几2方法种人参内生菌[16]。其中已证明多黏类芽孢杆菌不2.1内生菌菌液的制备仅在降解农药残留方面，而且在人参根总皂苷转将适量生长良好的解淀粉芽孢杆菌、黄岗山脉化方面均有很好作用[17-18]。但其余几种内生菌(解蕈状芽孢杆菌、多黏类芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、淀粉芽孢杆菌、黄岗山脉蕈状芽孢杆菌、枯草芽赖氨酸芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌6种内生菌分别接孢杆菌、赖氨酸芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌)的降解入装有50mLPDB培养基的容量为250mL锥形瓶农药残留和转化皂苷作用如何有待进一步研究。中，28℃、120r·min−1往复摇床培养约48h，菌液本研究利用6种人参内生菌降低人参农药残留和用酶标仪测定，菌液A600nm值到达0.5时备用。转化人参皂苷，进而筛选最佳菌株，以期为提高2.2内生菌活菌数的测定人参产品的质量提供理论依据。精密吸取20µL稀释后的菌液滴加于PDB培1仪器与试剂养基上，并用涂布器将菌液涂布均匀，每个稀释JohnssonJS1546色谱柱(4.6mm×250mm，浓度设置3个，于28℃培养箱中倒置培养约24h5µm)；LC-2010A高效液相色谱仪、GC-14C气相后取出，计算内生菌的总数目，再乘以稀释倍数，色谱仪、AUY220电子分析天平均购自日本岛津公即可得到内生菌芽孢杆菌的总数。司；AgilentDB-1701石英毛细柱(30m×0.25mm，2.3内生菌发酵人参茎叶的制备0.25µm)；KQ-250DV超声波清洗器(昆山舒美超声精密称取3.00g人参茎叶粉末放入三角瓶中，仪器有限公司)；HNY-2112B恒温培养振荡器(天津封口，100℃灭菌2h。在无菌条件下，加入50mL欧诺仪器股份有限公司)；GL-21LM高速冷冻离心无菌水，吸取200µL的A600nm值为0.5的菌液放机(湖南星科科学仪器有限公司)；微孔过滤膜入三角瓶，28℃，120r·min−1，往复摇床培养约(13mm×0.22μm，津腾实验设备有限公司)。24h。设不接菌的处理组作为对照，7d后40℃干正己烷、甲醇、乙腈均为色谱纯，均来自燥得发酵后人参茎叶粉末备用。Fisher公司；丙酮、石油醚均为分析纯，均来自2.4农药残留样品的制备与测定北京化工厂；浓硫酸(分析纯，沈阳市派尔精细化精密称取已干燥的发酵后人参茎叶粉末工制品厂)；纯净水(杭州娃哈哈公司)；Agile高农1.000g置于l00mL具塞三角烧瓶中，加入丙酮-残人参(PanaxginsengC.A.Mey)的茎叶(4年生)，石油醚(1∶4)20mL，20min超声处理，静置，将来自农药残留试验田，经吉林农业大学郜玉钢教上清滤到100mL三角瓶中，加入丙酮-石油醚(1∶授鉴定为人参(PanaxginsengC.A.Mey)；6种内生4)15mL，再提取2次，每次10min，滤液于40℃菌：解淀粉芽孢杆菌、黄岗山脉蕈状芽孢杆菌、水浴下浓缩，挥干后用石油醚将残渣定容至5mL，多黏类芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、赖氨酸芽孢杆加入1mL10%的硫酸，振摇1min，630×g离心菌和蜡样芽孢杆菌由本实验室分离所得[16]。五氯10min，取上清于40℃水浴，减压浓缩至近干，硝基苯(批号：15001)、毒死蜱(批号：216081393)、加入2mL正己烷溶解，0.22µm有机滤膜过滤，六六六(批号：217021440)、氟啶胺(批号：5569300)、备用。GC测定条件参照笔者所在实验室的测定方·484·ChinJModApplPharm,2023February,Vol.40No.4中国现代应用药学2023年2月第40卷第4期

2法[18]。色谱柱：AgilentDB-1701石英毛细柱6种内生菌在培养7d发酵结束后，活菌数量差异(30m×0.25mm，0.25µm)；检测器：ECD；检测无统计学意义，结果见表1。器温度：300℃；进样口温度：200℃。程序升温：表16种内生菌发酵结束后活菌数的测定结果50℃保持3min，以10℃·min−1升温至180℃，Tab.1Measurementresultsofthenumberofviable保持20min，再以10℃·min−1升温至260℃，保bacteriaafterfermentationof6kindsofendophytes持10min；载气：高纯氮气(纯度>99.999%)；流内生菌种类0d(A值)7d/×108CFU·mL–1速1mL·min−1，采用分流进样，进样量1.0µL；分解淀粉芽孢杆菌0.516.09±0.55黄岗山脉蕈状芽孢杆菌0.516.45±0.43流比：10∶1。多黏类芽孢杆菌0.516.96±0.572.5皂苷样品的制备与测定枯草芽孢杆菌0.517.02±0.49精密称取已干燥的发酵后人参茎叶粉末赖氨酸芽孢杆菌0.516.94±0.510.50g，置于小试管中，加入5mL甲醇，密封，蜡样芽孢杆菌0.516.08±0.49超声1h后静置过夜，第2天再超声1h后，1740×g3.26种内生菌对发酵人参茎叶农残降解的影响离心15min，取上清液过0.22µm有机滤膜放入液3.2.15种农药GC测定色谱峰归属5种农药均相小瓶，HPLC测定皂苷含量，色谱条件参照笔者得到良好分离，峰1~5依次为氟啶胺、六六六、五所在实验室建立的同时测定20种人参皂苷含量的[17]氯硝基苯、毒死蜱和滴滴涕，结果见图1。方法：JohnssonJS1546色谱柱(4.6mm×3.2.2农药残留线性关系考察以对照品中的农250mm，5µm)；乙腈(A)-水(B)为流动相，梯度洗药质量(y)和相应峰面积的积分值(x)作图，计算得脱(0~40.00min，82.00%→79.00%B；40.00~到5个农药线性回归方程，见表2。5种农药：氟42.00min，79.00%→74.00%B；42.00~46.00min，啶胺、六六六、五氯硝基苯、毒死蜱以及滴滴涕74.00%→68.00%B；46.00~66.00min，68.00%→在0.02~1.00µg·mL−1内呈良好的线性关系(r≥66.20%B；66.00~71.00min，66.20%→62.00%B；0.9901)。71.00~77.70min，62.00%→50.92%B；77.70~78.00min，50.92%→50.90%B；78.00~82.00min，表25种农药测定标准曲线的回归方程50.90%B；82.00~83.00min，50.90%→49.40%B；Tab.2Regressionequationoffivestandardcurvesofpesticides83.00~88.00min，49.40%→40.40%B；88.00~线性范围/序号农药种类线性方程r89.80min，40.40%→35.04%B；89.80~92.00min，µg·mL−11氟啶胺y=2.5779×10–6x+0.01270.99660.02~1.0035.04%→35.00%B；92.00~97.00min，35.00%B；2六六六y=2.9432×10–6x+0.20970.99010.02~1.0097.0~102.00min，35.00%→15.00%B；102.00~3五氯硝基苯y=4.1580×10–7x–0.42710.99520.02~1.00109.00min，15.00%B；109.00~111.00min，4毒死蜱y=4.7101×10–6x+0.06680.99350.02~1.0015.00%→82.00%B)。柱温为35℃，检测波长为5滴滴涕y=3.7585×10–6x+0.07990.99300.02~1.00−1203nm，流速为1.0mL·min，进样量为10µL。2.6降解率计算公式3.36种内生菌对发酵人参茎叶农药残留降解率AA−的测定降解率(%)=×12100%A6种人参内生菌对人参茎叶中的5种农药残留1式中：A1为对照样品残留量；A2为内生菌处均有降解作用，但不同菌株对同种农药降解率不理样品残留量。同(P<0.05)，同一菌株对不同农药降解率不同2.7统计分析(P<0.05)。综合5种农药残留的降解率，多黏类芽使用Excel软件进行数据整理，采用SPSS19.0孢杆菌对农药的降解效果最好，对氟啶胺、六六软件进行统计学分析，数据以x±s表示，组间比六、五氯硝基苯、毒死蜱、滴滴涕降解率分别为较采用单因素方差分析及Dunnett-t检验，P<0.0586.90%，88.89%，79.88%，86.12%和86.67%。解表示差异具有统计学意义。淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和赖氨酸芽孢杆菌3结果与分析对农药残留降解作用次之。6种内生菌对人参茎叶3.16种内生菌发酵结束后活菌数的测定农药残留降解的影响色谱图见图1，6种内生菌对在6种内生菌发酵结束后测定菌液的活菌数，人参茎叶农药残留降解率见表3。中国现代应用药学2023年2月第40卷第4期ChinJModApplPharm,2023February,Vol.40No.4·485·

3图16种内生菌对人参茎叶5种农药的降解影响色谱图S–混合对照品；A–人参茎叶原农药残留；B–解淀粉芽孢杆菌；C–黄岗山脉蕈状芽孢杆菌；D–多黏类芽孢杆菌；E–枯草芽孢杆菌；F–赖氨酸芽孢杆菌；G–蜡样芽孢杆菌。1−氟啶胺；2−六六六；3−五氯硝基苯；4−毒死蜱；5−滴滴涕。Fig.1Chromatogramsoftheeffectof6kindsofendophytesondegradationof5pesticidesinginsengstemsandleavesS–mixedstandards;A–pesticideresiduesinginsengstemsandleaves;B–Bacillusamyloliquefaciens;C–Bacillusmycoides;D–Bacilluspolymyxa;E–Bacillussubtilis;F–Bacilluslysine;G–Bacilluscereus.1−fluazinam;2−benzenehexachloride;3−pentachloronitrobenzene;4−chlorpyrifos;5−dichlorodiphenyltrichoroethane.表36种内生菌对5种农药的降解率影响Tab.3Effectsof6kindsofendophytesondegradationratesof5pesticides%农药种类解淀粉芽孢杆菌黄岗山脉蕈状芽孢杆菌多黏类芽孢杆菌枯草芽孢杆菌赖氨酸芽孢杆菌蜡样芽孢杆菌氟啶胺86.0397±1.1046a87.4018±0.0774b86.8975±0.4745ab84.3869±0.7416a86.1813±1.0310a85.0752±0.8805a六六六77.0579±0.8395d71.0424±0.2732b88.8923±0.6746e74.3815±1.3156c71.0167±0.8554b10.0845±0.6742a五氯硝基苯80.9866±0.3524d75.0290±0.6027b79.8794±1.0297d77.4694±1.0114c74.9467±0.1114b63.9425±0.1089a毒死蜱87.8452±0.3973c82.1550±0.8293b86.1194±0.9242c87.1693±2.4210c85.1151±0.1702bc4.4058±1.3906a滴滴涕88.9867±0.5934b88.4881±1.4612b86.6665±0.7664b87.4584±0.8388b88.1349±0.6896b70.4403±1.2330a注：用小写字母表示两两比较，字母相同为差异不显著，字母不同为差异显著，P<0.05。Note:Lowercaseletterswereusedtorepresentpairwisecomparison.Thesameletterswereregardedasinsignificantdifference,whiledifferentletterswereregardedassignificantdifference,P<0.05.3.46种内生菌对人参茎叶皂苷含量的测定黄岗山脉蕈状芽孢杆菌提高了人参茎叶中Rf、Rb1、3.4.120种人参皂苷单体皂苷HPLC测定色谱峰Rg2、F1、Rk3、Rh4、CompoundK含量(P<0.05)，归属20种人参皂苷单体分离良好，依次为Rg1、多黏类芽孢杆菌提高了人参茎叶中Rb1、Rg2、Rk3、Re、Rf、Rb1、Rg2、Rc、20(R)-Rh1、Rb2、Rb3、Rh4含量(P<0.05)，枯草芽孢杆菌提高了人参茎叶F1、Rd、Rk3、F2、Rh4、Rg3、原人参三醇、Compound中Rb1、Rg2、Rh4、原人参二醇含量(P<0.05)，赖K、Rg5、Rh2、原人参二醇，结果见图2。氨酸芽孢杆菌提高了人参茎叶中Rf、Rg2、Rb2、3.4.2线性关系考察以对照品中的人参皂苷质F1、Rd、Rk3、Rh4、Rg3、CompoundK含量(P<0.05)，量(Y)和相应峰面积的积分值(X)作图，计算出线性蜡样芽孢杆菌提高了人参茎叶中Rb1、Rg2、Rb2、回归方程，见表4。20中人参皂苷单体在1.96~F1、Rd、Rh4、Rg3、Rg5含量(P<0.05)，结果见图20.80μg内呈良好的线性关系(r>0.999，n=6)。2和表5。综合20种单体皂苷及其加和值含量，经3.56种内生菌对人参茎叶人参皂苷转化的测定赖氨酸芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌转化效果最好，206种人参内生菌对人参茎叶中的20种单体皂种单体皂苷加和值可达5.84%和5.85%。苷均有不同程度的转化作用，但不同菌株对同种皂4结论苷单体转化率不同(P<0.05)，同一菌株对不同皂苷微生物由于其本身的代谢能力，在降解农药单体转化率不同(P<0.05)，解淀粉芽孢杆菌提高了时具有更好的优势，适合应用于产品。但不同的人参茎叶中Rb1、Rg2、Rh4、Rg3含量(P<0.05)，微生物对农药残留降解效果不同，筛选出高效降·486·ChinJModApplPharm,2023February,Vol.40No.4中国现代应用药学2023年2月第40卷第4期

4图26种内生菌发酵对人参茎叶皂苷转化的影响色谱图S–混合对照品；A–人参茎叶原皂苷；B–解淀粉芽孢杆菌；C–黄岗山脉蕈状芽孢杆菌；D–多黏类芽孢杆菌；E–枯草芽孢杆菌；F–赖氨酸芽孢杆菌；G–蜡样芽孢杆菌。Fig.2Chromatogramsofeffectsof6kindsofendophytesfermentationonginsenosidetransformationofginsengstemsandleavesS–mixedstandards;A–originalsaponininginsengstemsandleaves;B–Bacillusamyloliquefaciens;C–Bacillusmycoides;D–Bacilluspolymyxa;E–Bacillussubtilis;F–Bacilluslysine;G–Bacilluscereus.表4人参皂苷的回归方程Tab.4Regressionequationofginsenosides人参皂苷保留时间/min回归方程相关系数线性范围/μgRg131.830Y=2.584242×10–6X+5.272472×10–30.99992.08~20.80Re33.624Y=3.045859×10–6X–1.763971×10–20.99982.04~20.40Rf50.345Y=2.575101×10–6X–1.365498×10–10.99982.04~20.40Rb153.156Y=3.544513×10–6X–1.458505×10–20.99992.00~20.00Rg253.976Y=2.383191×10–6X–5.158786×10–20.99991.96~19.60Rc55.106Y=3.215851×10–6X+6.726408×10–30.99992.00~20.0020(R)-h155.762Y=2.116331×10–6X–8.732196×10–20.99991.96~19.60Rb257.447Y=3.388552×10–6X+1.825798×10–20.99992.00~20.00Rb358.253Y=3.283913×10–6X–1.511758×10–20.99982.08~20.80F159.503Y=2.004556×10–6X–9.388506×10–20.99982.00~20.00Rd63.818Y=3.206608×10–6X+9.830502×10–30.99992.04~20.40Rk377.859Y=1.026160×10–6X–3.048077×10–10.99922.00~20.00F278.300Y=2.554881×10–6X–1.686846×10–10.99972.00~20.00Rh478.901Y=3.246799×10–6X+9.459274×10–30.99992.00~20.00Rg381.059Y=2.356921×10–6X–1.204710×10–10.99982.00~20.00原人参三醇83.825Y=1.526064×10–6X–1.575577×10–10.99972.04~20.40CompoundK89.684Y=1.863712×10–6X–1.068954×10–10.99982.00~20.00Rg590.210Y=8.349560×10–7X–1.477148×10–10.99972.00~20.00Rh291.354Y=1.936456×10–6X–2.287905×10–10.99972.00~20.00原人参二醇106.340Y=1.798388×10–6X–2.089044×10–10.99962.00~20.00解农药残留的菌株具有重要意义。微生物通过其Rb2、F1、Rd、F2、Rh4和Rg3含量升高。自身的代谢分解能力，对人参皂苷进行体外降解，6种人参内生菌对人参茎叶中的5种农药残留从而避免个体差异，扩大人群使用范围，提高人均有降解作用，对20种单体皂苷含量均有影响。参的药用价值。本研究表明内生菌能有效降解农药其中，多黏类芽孢杆菌对农药残留降解作用最强，残留并提高人参皂苷含量，为植物内生菌的深层次氟啶胺、六六六、五氯硝基苯、毒死蜱、滴滴涕开发利用提供了理论依据。本实验利用6种人参内降解率分别为86.90%，88.89%，79.88%，86.12%生菌研究其对人参农药残留和皂苷含量的影响，结和86.67%(P<0.05)，赖氨酸芽孢杆菌对农药残留降果表明多黏类芽孢杆菌能有效降低人参农药残留，解作用次之。赖氨酸芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌转与笔者所在实验室前期研究结果一致。经赖氨酸芽化人参茎叶皂苷作用最强，20种单体皂苷加和值孢杆菌和蜡样芽孢杆菌发酵转化后，皂苷Rg2、分别为5.84%和5.85%(P<0.05)。综合6种人参内中国现代应用药学2023年2月第40卷第4期ChinJModApplPharm,2023February,Vol.40No.4·487·

5表56种内生菌发酵对人参茎叶皂苷转化的影响Tab.5Effectsof6kindsofendophytesonginsenosidetransformationofginsengstemsandleaves%皂苷单体人参茎叶原皂苷解淀粉芽孢杆菌黄岗山脉蕈状芽孢杆菌多黏类芽孢杆菌枯草芽孢杆菌赖氨酸芽孢杆菌蜡样芽孢杆菌Rg10.8560±0.0047c0.5902±0.0301a0.6723±0.0948ab0.6084±0.0849a0.6855±0.0328ab0.7702±0.1021bc0.6937±0.1169abRe2.3873±0.0387c1.6095±0.1084a1.6882±0.0404ab1.5758±0.1284a1.8595±0.0724b2.3081±0.1637c2.2037±0.1670cRfNDND0.0015±0.0026aNDND0.0100±0.0151aNDRb10.0911±0.0034a0.3423±0.0135b0.4197±0.0345c0.4129±0.0299c0.4465±0.0407c0.0504±0.0350a0.4496±0.0574cRg20.0233±0.0042a0.2360±0.0327b0.2472±0.0350b0.2255±0.0123b0.2508±0.0375b0.4983±0.2429c0.3919±0.0320bcRc0.5092±0.0204b0.0616±0.0193a0.0891±0.0500a0.0744±0.0368a0.0895±0.0381a0.0993±0.0269a0.1038±0.0321a20(R)-Rh10.1316±0.0151c0.0204±0.0353ab0.0231±0.0368ab0.0191±0.0331ab0.0245±0.0404ab0.0736±0.0648bcNDRb20.0637±0.0032a0.1032±0.0182ab0.1347±0.0384abc0.1038±0.0056ab0.1152±0.0084abc0.1649±0.0448c0.1449±0.0463bcRb30.1564±0.0081b0.0667±0.0062a0.0901±0.0406a0.0694±0.0185a0.0774±0.0142a0.1042±0.0343a0.0831±0.0088aF10.1544±0.1623a0.2833±0.0307ab0.3821±0.1207b0.2790±0.0280ab0.3221±0.0102ab0.4427±0.1223b0.4570±0.0311bRd0.5861±0.0243a0.5004±0.0612a0.5837±0.0809a0.5034±0.0430a0.5563±0.0288a0.7748±0.0737b0.8290±0.0454bRk3NDND0.0006±0.0010a0.0009±0.0015aND0.0038±0.0066aNDF20.3934±0.0068ab0.3744±0.0260a0.3794±0.0110a0.3614±0.0565a0.4139±0.0148ab0.4758±0.0384b0.4293±0.1056abRh4ND0.0343±0.0032a0.0408±0.0120ab0.0357±0.0039ab0.0370±0.0021ab0.0520±0.0130ab0.0573±0.0000bRg3ND0.0011±0.0019aNDNDND0.0066±0.0072b0.0048±0.0250ab原人参三醇NDNDNDNDNDNDNDCompoundKNDND0.0009±0.0016aNDND0.0024±0.0042aNDRg5NDNDNDNDNDND0.0000±0.0012aRh2NDNDNDNDNDNDND原人参二醇NDNDNDND0.0101±0.0096aNDND合计5.3526±0.1986cd4.2234±0.3069a4.7534±0.4286ab4.2697±0.3613a4.8884±0.1945bc5.8370±0.1852d5.8482±0.4294d注：ND表示未检测出。小写字母表示两两比较，字母相同为差异不显著，字母不同为差异显著，P<0.05。Note:NDmeantnotdetected.Lowercaseletterswereusedtorepresentpairwisecomparison.Thesameletterswereregardedasinsignificantdifference,whiledifferentletterswereregardedassignificantdifference,P<0.05.生菌对生物法转化的人参茎叶产物中5种农药残AgricSci(安徽农业科学),2019,47(23):193-195.[9]LUYB,GUOGH,TANGZL,etal.Effectsofcompatibility留和人参皂苷含量的影响，优选出赖氨酸芽孢杆betweenPanaxginsengandTrogopterusdungonimmunefunctionsinnormalmice[J].JChinMedMater(中药材),1994,菌是降解农药残留作用强并提高皂苷含量幅度大17(8):34-36,56.的菌株。[10]SONGG,CAIM,LIYL,etal.Isolationandidentificationofplantendophyticbacteriasurvivedinpolychlorinatedbiphenylsandpolybrominateddiphenylethers[J].EnvironREFERENCESChem(环境化学),2015,34(6):1127-1133.[11]ASWATHIA,PANDEYA,SUKUMARANRK.Rapid[1]RANIR,KUMARV,USMANIZ,etal.Influenceofplantdegradationoftheorganophosphatepesticide-ChlorpyrifosgrowthpromotingrhizobacterialstrainsPaenibacillussp.byanovelstrainofPseudomonasnitroreducensAR-3[J].IITISM08,Bacillussp.PRB77andBacillussp.PRB101usingBioresourTechnol,2019(292):122025.Helianthusannuusondegradationofendosulfanfrom[12]LIY,WUCY,LIW,etal.Isolation,identificationoftwocontaminatedsoil[J].Chemosphere,2019(225):479-489.chlorpyrifos-degradingstrainsandtheirmixedbiodegradation[2]LIHY,QIUYZ,YAOT,etal.Evaluationofsevenchemicalcharacteristicsofchlorpyrifos[J].ChinJTropCrops(热带作物pesticidesbymixedmicrobialculture(PCS-1):Degradation学报),2017,38(8):1512-1518.ability,microbialcommunity,andMedicagosativa[13]NASROLLAHIM,POURBABAEIAA,ETESAMIH,etal.phytotoxicity[J].JHazardMater,2020(389):121834.Diazinondegradationbybacterialendophytesinriceplant[3]JICH,JINJ,XUYM,etal.Effectofendogenoussubstances(OryziasativaL.):Apossiblereasonforreducingtheincherrytomatoplantsondegradationofthiophanate-methylefficiencyofdiazinoninthecontrolofthericestem-borer[J].[J].Agrochemicals(农药),2020,59(1):37-40.Chemosphere,2020(246):125759.[4]SUNLN,HUANGKH,GAOXH,etal.Isolation,[14]ZHUXM,SCHROLLR,DÖRFLERU,etal.Inoculationofidentification,anddegradationcharacteristicsofendophyticsoilwithanisoproturondegradingmicrobialcommunitycypermethrin-degradingbacteria[J].JAgro-Environmentreducedthepoolof“realnon-extractable”isoproturonSci(农业环境科学学报),2020,39(1):70-77.residues[J].EcotoxicolEnvironSaf,2018(149):182-189.[5]ANDP,ZHANGZL,ZHANGXP,etal.Optimizationof[15]FERRARIOC,PITTINOF,TAGLIAFERRII,etal.BacteriafermentationconditionsofactinomycetesstrainWP-1fromcontributetopesticidedegradationincryoconiteholesinanPinusdabeshanensisforfungichrominproduction[J].ChinJAlpineglacier[J].EnvironPollut,2017(230):919-926.ModApplPharm(中国现代应用药学),2017,34(8):[16]ZHANGX,GAOYG,ZANGP,etal.Studyonthe1078-1083.simultaneousdegradationoffivepesticidesbyPaenibacillus[6]WULQ,GUHK,WANGQ,etal.AntagonisticefficacyandpolymyxafromPanaxginsengandthecharacteristicsoftheirgrowth-promotingeffectofBacillusmethylotrophicusisolatedproducts[J].EcotoxicolEnvironSaf,2019(168):415-422.fromDendrobiumhuoshanense[J].BiotechnolBull(生物技术[17]YANGYW,MENGFS,GAOYG,etal.Simultaneous通报),2016,32(8):200-206.determinationoftwentyginsenosidesinginsengpreparations[7]LIY,ZHAODY,DINGW,etal.IsolationofendophyticbyHPLC[J].FoodSci(食品科学),2016,7(22):131-135.bacteriainrootsofPanaxginsengandscreeningof[18]ZHANGX,GAOYG,ZANGP,etal.Studyontheantagonisticstrainsagainstphyt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