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1、水提取人参茎叶皂昔最佳工艺探究摘要:近年来,作为扩大药源的一个方面,对天然药物的提取方法已有很多人研究过,为了扩大贵细药材人参的药源,特以水为提取溶剂进行工艺优化。以人参茎叶为材料,以水为提取溶剂,以人参皂昔Rgl为对照品,利用大孔树脂进行富集纯化,采用传统显色方法香草醛一高氯酸比色法进行含量测定。通过正交实验进行工艺优化,综合评价加水量,煎煮时间,煎煮次数三因素对人参总皂昔获得率的影响,结果表明煎煮时间为主要影响因素,加水量、煎煮次数为次要因素,最佳工艺为B3C3A1,即煎煮时间为90min,加水量为12倍,煎煮4次
2、。人参皂昔Rgl在30.00〜100.00卩g范围内呈良好的线性关系,相关系数r=0.9989o关键词:人参茎叶总皂昔;提取工艺;正交实验中图分类号:R284.2文献标识码:A文章编号:1007-2349(2008)03-0048-02人参叶为五加科植物人参(PanaxgensentC.A.Mey)的干燥叶,人参的主要成分有人参皂昔、挥发油、有机酸及酯、含氮化合物、维生素、酶类、糖类及微量元素等,其中人参皂昔是人参的主要有效成分。近几十年,作为扩大药源的一个方面,人们分别对人参茎叶、人参花蕾、人参果实等部位进行了研究,
3、结果发现除了人参根之外,人参植株其它部位也含有人参总皂昔,而人参茎叶中含量更高。人参茎叶具有补气,益肺,解暑,生津的功能,用于气虚咳嗽,暑热烦躁,津伤口渴,头目不清,四肢倦乏等症。从人参茎叶中提取人参总皂昔,作为提取物应用是扩大人参药源的一种途径。目前提取人参皂昔的方法有很多种,多倾向于使用不同浓度的乙醇作为溶剂,但乙醇对叶绿素的溶解性较大,不易除去,影响皂昔质量,故本文采用水为溶剂,叶绿素不易溶于水,可减少后继工作的负担。本文以人参茎叶为原料,以水为溶剂,通过正交实验进行提取工艺优化,同时利用大孔树脂进行富集纯化,以
4、获得高收率,高纯度的人参茎叶总皂昔。1材料1.1实验药品及试剂人参茎叶(购自哈尔滨三棵树中药材批发市场,产于吉林长白山地区),人参皂昔Rgl(中国药品生物制品检定所),试剂均为分析纯。1.2实验器材722型光栅分光光度计(上海第三分析仪器厂),AL204型电子天平(上海人和科学仪器有限公司),AB8型大孔树脂(天津南开大学化工厂)。2方法2.1标准曲线的绘制准确称量人参皂昔对照品Rgl2.OOmg,用甲醇定容至10.OOmL,配制浓度为1.20mg/mL,分别取0.25,0.30,0.35,0.40,0.45,0.50
5、mL,分别置于6支10mlo具塞试管中,水浴蒸干,往每支试管中加入5%香草醛一冰醋酸溶液0•加L,高氯酸0.8mL(二者体积比例1:4,临用新配),6CTC水浴保温15min,取出后水浴冷却,加冰醋酸5.OmL,摇匀。随行试剂作空白,于550nm测定吸收值,以皂昔含量为横坐标,以吸收值为纵坐标,获得标准曲线为y=3.7171X-0.052,相关系数r=0.9989□结果表明人参皂昔Rg,在30.00〜100.0011g范围内呈良好的线性关系。2.2人参茎叶总皂昔提取条件的优化取100g人参茎叶剪段,根据加水量(A),煎
6、煮时间(B),煎煮次数(C)制定L9(34)正交表,见表1。2.3人参总皂昔的含量测定2.3.1供试品溶液的制备准确称量人参茎叶提取物0.05g,加入10mL蒸徭水溶解,水液通过AB8型大孔树脂柱,大孔树脂干重10g,以水50mL洗脱,弃去水洗液,再用20%乙醇50mL洗脱,弃去20%乙醇洗脱液,继以80%乙醇80mL洗脱,收集洗脱液80ml.,蒸干,残渣加甲醇溶解并定容转移至10mL容量瓶中,定容,摇匀。精密量取liiiL于10mL容量瓶中,加入甲醇定容,摇匀,即制得总皂昔含量测定所需的供试品溶液。2.3.2含量测定
7、按“标准曲线绘制”方法操作,获得总皂昔吸光度,根据其吸光度得到总皂昔含量,计算公式为:4结论经直观分析与方差分析,各因素对人参总皂昔提取率的影响各不相同,其大小顺序为B>C>A,即煎煮时间为主要影响因素,加水量及煎煮次数为次要因素,从统计表中可以看出133C3A,为最佳工艺,即加水量为原药材的12倍,每次煎煮90min,共煎煮4次,获得皂昔率超过6%,较为理想。由于溶剂系统为水,由于人参茎叶中含有大量的叶绿素。为人参茎叶中非有效成分。且较难去除,因而人参茎叶总皂昔的提取方法亦较难确定。本文以水为溶剂,而叶绿素难溶于水,
8、因而在提取的过程中不易进入提取溶液中,因而降低了后续工作中的难度,减少不必要的麻烦,简化了工艺。本工艺获得皂昔率相对较高,所需成本较低,环境污染小,故更适合于工业化生产。