2021年昆明市手足口病流行病学和肠道病毒病原谱特征_刘艳艳

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·64·CHINESEJOUＲNALOFVACCINESANDIMMUNIZATIONVol．29No．120232021年昆明市手足口病流行病学和肠道病毒病原谱特征1211111121刘艳艳，姜黎黎，李文龙，简千棋，马丽波，刘如锦，杨瑶，朱心，伏晓庆，侯敏(1．昆明市疾病预防控制中心，云南昆明650228;2．云南省疾病预防控制中心，云南昆明650022)DOI:10.19914/j.CJVI.2023012基金项目:昆明市卫生科技人才培养项目暨“十百千”工程［No．2019－sw(后备)－51］通信作者:侯敏，Email:houmin7250@163．com;伏晓庆，Email:fxq_05@163．com刘艳艳、姜黎黎为共同第一作者，Email:liuyuxiu07@163．com，314480101@qq．com摘要:目的了解昆明市手足口病(Hand，footandmouthdisease，HFMD)流行病学和肠道病毒(Enterovirus，EV)病原谱特征。方法通过中国传染病报告信息管理系统收集2021年昆明市HFMD病例信息进行描述性流行病学分析;采集部分HFMD病例标本，采用荧光定量PCＲ检测肠道病毒71型(Enterovirus71，EV71)、柯萨奇病毒A16型(CoxsackievirusA16，CVA16)、CVA6和其他EV，采用一步法ＲT-PCＲ对其他EV进行扩增和基因型鉴定;构建各基因型EV与参考株的VP1区全基因序列系统进化树，分析亲缘性。结果2021年昆明市HFMD报告发病率为103.72/10万(8804例)，其中0－4岁、5－9岁、10－14岁、≥15岁分别为8724.75/10万、1649.25/10万、29.08/10万、9.35/10万，主城区、郊县分别为524.10/10万、965.68/10万。HFMD病例标本的EV检测阳性率为63.15%(538/852);在538株EV中，CVA16、CVA6、EV71、CVA4、CVA2、CVA10、埃可病毒18型(Echovirus18，E18)、CVA9、E30、CVA5、CVA12、E21、未分型EV分别占38.66%(208株)、30.86%(166株)、2.97%(16株)、2.97%(16株)、1.30%(7株)、1.12%(6株)、0.74%(4株)、0.37%(2株)、0.37%(2株)、0.19%(1株)、0.19%(1株)、0.19%(1株)、20.07%(108株)。CVA16、CVA6、EV71和CVA4的优势亚型分别为B1a、D3a、C4a和C2亚型，其中CVA16B1a亚型、EV71与东南亚国家流行株的亲缘关系密切，CVA6、CVA4与中国其他地区流行株的亲缘关系密切。结论2021年昆明市＜5岁儿童和郊县HFMD发病率高;HFMD的EV病原谱呈多样性，优势基因型从既往的EV71转变为CVA16、CVA6和CVA4。关键词:手足口病;流行病学;肠道病毒;病原谱;基因特征中图分类号:Ｒ373.2文献标识码:A文章编号:1006－916X(2023)01－0064－07Epidemiologyandenterovirusspectrumofhand，foot，andmouthdiseaseinKunmingcity，202112111111LiuYanyan，JiangLili，LiWenlong，JianQianqi，MaLibo，LiuＲujin，YangYao，ZhuXin，Fu21Xiaoqing，HouMin(1．KunmingMunicipalCenterforDiseaseControlandPrevention，Kunming650228，Yunnan，China;2．YunnanProvincialCenterforDiseaseControlandPrevention，Kunming650022，Yunnan，China)Abstract:ObjectiveTodeterminetheepidemiologyandpathogenicspectrumofhand，foot，andmouthdisease(HFMD)inKunmingcity．MethodsWeobtaineddatafromHFMDcasesreportedin2021inKunmingfromtheChineseInfectiousDiseaseＲeportingSystemforadescriptiveanalysis．WecollectedsamplesfromasubsetofHFMDcasesandusedreal-timeＲT-PCＲtotestforenterovirus71(EV71)，coxsackievirusA16(CVA16)，CVA6，andotherEVs，whichwerefurtheramplifiedandgenotypedusingonestepＲT-PCＲ．WeconstructedaphylogenetictreeoftheVP1genesoftheisolatesandreferencestrainstodeterminegeneticrelationships．ＲesultsTheoverallincidenceper100000populationofreportedHFMDwas103.72(8804cases)in2021inKunming，withage-specificincidencesof8724.75，1649.25，29.08，and9.35among0－4－，5－9－，10－14－，and≥15－year-olds;andincidencesof524.10and965.68inurbanandsuburbanareas．Among852testedsamples，538(63.15%)werepositiveforanEV，andamongthese，CVA16，CVA6，EV71，CVA4，CVA2，CVA10，echovirus18(E18)，CVA9，E30，CVA5，CVA12，E21，andnon-genotypedEVaccountedfor38.66%(208strains)，30.86%(166strains)，2.97%(16strains)，2.97%(16strains)，1.30%(7strains)，

1中国疫苗和免疫2023年2月第29卷第1期·65·1.12%(6strains)，0.74%(4strains)，0.37%(2strains)，0.37%(2strains)，0.19%(1strain)，0.19%(1strain)，0.19%(1strain)，and20.07%(108strains)．Dominantsub-genotypesofCVA16，CVA6，EV71，andCVA4wereB1a，D3a，C4a，andC2;CVA16B1aandEV71strainsweregeneticallyclosetocorrespondingstrainsinSoutheastAsiancountries，whileCVA6andCVA4strainswereclosetocorrespondingstrainsinotherareasofChina．ConclusionsTheHFMDincidencewashighamongchildrenunder5yearsofageandinsuburbanareasofKunmingin2021．TheEVspectrumofHFMDwasdiverse，withdominantgenotypeschangingfromEV71toCVA16，CVA6，andCVA4．Keywords:Hand，foot，andmouthdisease;Epidemiology;Enterovirus;Pathogenicspectrum;Geneticcharacteristics手足口病(Hand，footandmouthdisease，HFMD)试剂盒购自江苏硕世生物科技股份有限公司。是由肠道病毒(Enterovirus，EV)感染引起的以手、3EV型别鉴定首先采用荧光定量PCＲ对所有标本的ＲNA进行通用型EV、EV71、CVA16和CVA6型别鉴定;QS7足、口腔等处发生疱疹为典型病症的丙类传染病，婴［1］荧光定量PCＲ仪购自美国ABI公司，CVA16/EV71/通用型幼儿和儿童易感，成人也可感染。HFMD病原体EV三重检测试剂盒和CVA6单通道检测试剂盒(荧光PCＲ属于小ＲNA病毒科肠道病毒属，有约100余种血清法)购自上海辉睿生物科技有限公司。然后采用一步法ＲT-［2］型，分为A、B、C和D四组，以肠道病毒71型PCＲ对非EV71/CVA16/CVA6的EV阳性标本，使用特异引(Enterovirus71，EV71)和柯萨奇病毒A16型物［5］扩增VP4/VP2结合区基因，测序结果上传EV分型网站(CoxsackievirusA16，CVA16)最为常见。云南省地处(https://www．rivm．nl/mpf/typingtool/enterovirus)，鉴定EVTM边境，毗邻老挝、缅甸和越南，HFMD长期居于省内传基因型别;一步法ＲT-PCＲ试剂盒AccessQuickＲT-PCＲ染病报告病种首位，昆明市HFMD发病数、平均重症System购自美国Promega公司。［3］4EV全基因序列扩增和测序采用一步法ＲT-PCＲ，分别数和死亡数均排在云南省首位。近年来中国多个选择各型别EV特异引物，扩增各基因型EVVP1区全基因城市呈现其他基因型EV逐渐替代CVA16和EV71序列。由于CVA16和CVA6标本数量较多，随机选取代表性［4］优势地位的特点。为了全面了解昆明市HFMD流［6，7］标本，参考文献引物进行VP1区全基因序列扩增;对行规律和病原学特征，本文对2021年昆明市HFMDEV71标本和用VP4/VP2结合区基因分型鉴定出各基因型发病监测数据、EV病原谱和基因特征进行了研究，为的标本，分别采用EV71、CVA4、CVA5、CVA9、CVA10等特异［7］昆明市HFMD病原学监测和防控以及动态掌握优势性引物进行VP1区全基因序列扩增。扩增试剂盒购自美和非优势基因型EV遗传进化规律提供科学依据。国Promega公司。所有PCＲ产物送上海生工生物技术有限公司完成测序。5EV基因序列同源性和系统进化分析测序结果使用材料与方法Lasergene17.3软件进行拼接整理，所获序列上传EV分型网站进行分型验证。从基因库(GenBank)中下载各地流行EV1资料来源和标本采集HFMD临床诊断标准严格执行参考株的核苷酸序列，依据VP1区基因常被用作区分EV型《手足口病诊疗指南(2018版)》，通过中国传染病报告信息［8］别和进化分析的标准，应用Mega5.0软件邻接法构建与本管理系统进行网络直报，从系统中获取2021年昆明市HFMD研究获得序列的系统进化树，建树可靠性通过1000自展值病例相关信息。由昆明市所辖14个县区(市，下同)疾病预防评估。使用DNASTAＲ软件分析获得序列与参考株序列之间控制中心(Centerfordiseasecontrolandprevention，CDC)2021的核苷酸相似性、氨基酸同源性、核苷酸和氨基酸的差异性。年每月对首次就诊的至少5例HFMD轻症病例和所有HFMD6HFMD病例流行特征分析采用IBMSPSS23.0软件对重症或死亡病例采集粪便、咽/肛拭子标本，及时送昆明市昆明市2021年HFMD病例的性别、年龄、地区等特征进行描CDC进行EV核酸提取和EV型别鉴定。标本的采集、运送和2述性流行病学分析，年龄别发病率趋势分析采用趋势χ检保存依据《手足口病预防控制指南(2009版)》的要求进行。验，检验水准α=0.05。在本研究中，主城区包括五华区、西2EV核酸提取标本前处理参照《手足口病实验室手册山区、盘龙区、官渡区和呈贡区，郊县包括安宁市、东川区、晋(2018版)》，取粪便标本约2g加入10mL磷酸盐缓冲液宁区、富民县、宜良县、石林县、嵩明县、禄劝县和寻甸县;春(PBS)、1g玻璃珠和1mL氯仿制成的混合溶液中，摇床振荡季、夏季、秋季、冬季分别指1－3月份、4－6月份、7－9月份、20min，以4000rpm离心20min，取上清200μL进行EV核酸10－12月份。提取。肛/咽拭子标本涡旋振荡后静置10min，取200μL进行7伦理审查本研究通过昆明市疾病预防控制中心生物医EV核酸提取。自动核酸提取仪(型号SSNP－2000A)和配套学研究伦理委员会审查批准(伦理评审编号10)。

2·66·CHINESEJOUＲNALOFVACCINESANDIMMUNIZATIONVol．29No．12023(22例，含死亡1例)、西山区(14例)、呈贡区结果(14例)和五华区(12例);男、女性发病数比为1.27(4926/3878)，报告发病率分别为113.43、93.55;1HFMD流行病学特征0－4岁、5－9岁、10－14岁、≥15岁报告发病率分别2021年昆明市共报告HFMD病例8804例，报为8724.75(7235例，82.18%)、1649.25(1392告发病率(/10万，下同)为103.72，其中重症92例，例，15.81%)、29.08(123例，1.40%)、9.35(54例，死亡1例;发病数从4月份开始缓慢上升，5－6月份2=78216.12，P＜0.001)，其中0岁、0.61%)(趋势χ达到高峰，11－12月出现次高峰;各县区报告发病率1岁、2岁、3岁、4岁报告发病率分别为648.19(467在53.28－192.33之间，主城区、郊县报告发病率分例，5.30%)、1862.79(2008例，22.81%)、1365.92别为524.10(5585例，63.44%)、965.68(3219例，(1445例，16.41%)、2673.03(1819例，20.66%)、36.56%)(图1)，其中重症/死亡病例集中在官渡区2174.79(1496例，16.99%)(图1)。图1昆明市2021年HFMD各月发病数、年龄别和地区别报告发病率2HFMD病例EV病原谱冬季(97株)，CVA6主要分布在石林县(18株)和春共采集HFMD病例标本852份(包括粪便标本季(69株)，EV71和CVA4均呈散在分布。821份、咽/肛拭子标本31份)，EV检测阳性5383EV序列的遗传进化分析份，阳性率为63.15%。在538株EV中，CVA16、3.1各基因型EV的遗传进化特征共获得164条CVA6、EV71、CVA4、CVA2、CVA10、埃可病毒18型EV序列，分属12个基因型，包含CVA6(74条)、CVA16(Echovirus18，E18)、CVA9、E30、CVA5、CVA12、(46条)、CVA4(16条)、CVA2(7条)、CVA10(6条)、E21、未分型EV分别占38.66%(208株)、30.86%EV71(4条)、E18(4条)、CVA9(2条)、E30(2条)、(166株)、2.97%(16株)、2.97%(16株)、1.30%(7CVA5(1条)、CVA12(1条)、E21(1条)，其中8个基因株)、1.12%(6株)、0.74%(4株)、0.37%(2株)、型属于A组EV，4个基因型属于B组EV;各基因型0.37%(2株)、0.19%(1株)、0.19%(1株)、0.19%EV序列与其原型株之间的核苷酸相似性、氨基酸同源(1株)、20.07%(108株)，其中包括1株EV71和性分别为74.40%－89.00%、90.80%－98.30%，与其原型E18混合感染;CVA16主要分布在安宁市(32株)和株序列相比，无核苷酸插入或缺失(表1、图2)。表12021年昆明市各基因型EV与原型株VP1区全基因序列核苷酸相似性和氨基酸同源性基因型序列数(条)VP1基因全长(bp)原型株核苷酸相似性(%)氨基酸同源性(%)CVA27885FleetwoodAY42176080.50－89.0095.90－98.30CVA416915HighPointAF08129583.80－85.2097.00－98.00CVA51885SwartzAF08129681.2095.20CVA674915GdulaAF08129781.30－86.1090.80－96.70CVA92906GriggsD0062779.60－80.7092.70－93.00CVA106894KowalikAF08130076.30－77.1091.60－92.60CVA121888Texas－12AF08130281.4094.60CVA1646891G－10U0587674.40－75.9090.90－92.20EV714891BrCrU2252180.20－81.0093.20－93.60E184861MetcalfAF08133177.20－77.9092.30－94.10E211885FarinaAF08133477.9094.60E302876BastianniAF08134081.5092.40

3中国疫苗和免疫2023年2月第29卷第1期·67·图22021年昆明市各基因型EV与原型株的VP1区全基因序列系统进化树3.24种优势基因型EV的遗传进化特征2021苷酸平均差异为12.50%;B1a亚型序列与2019年年昆明市CVA16、CVA6、EV71和CVA4与国内外其中国广东株(MW197397)和2017年越南株他参考株序列的系统进化树(图3)显示:(1)昆明(MW999272、MZ043537等)亲缘关系较近，与2017市CVA16属于B1型，其中B1a、B1b亚型分别占年泰国株(MH879032)处在同一进化分支，B1b亚型95.65%(44/46)、4.35%(2/46)，两种亚型之间的核序列210和47分别与广东省广州株(MT119428)和

4·68·CHINESEJOUＲNALOFVACCINESANDIMMUNIZATIONVol．29No．12023图32021年昆明市CVA16、CVA6、EV71和CVA4与其他参考株的VP1区全基因序列系统进化树

5中国疫苗和免疫2023年2月第29卷第1期·69·北京株(MT553212)亲缘关系较近。(2)昆明市HFMD防控工作。CVA6序列均处于D3基因亚型D3a分支，核苷酸相昆明市自2010年开始开展HFMD病例的EV似性、氨基酸同源性分别为89.40%－100%、89.10%－病原学监测，多年来EV71为HFMD的主要病［13］100%;分属ClusterⅠ、Ⅱ、Ⅲ三个小分支，分别占原。本研究发现，2021年昆明市HFMD病例的45.95%(34/74)、21.62%(16/74)、32.43%(24/EV病原谱发生了很大变化，以A组EV为主，其中74)，其中ClusterⅠ与2020年云南省曲靖市和文山CVA16居病原谱第一位，其他主要致病EV依次为市、北京市等地毒株亲缘关系较近，ClusterⅡ与上CVA6、CVA4和EV71。CVA16和CVA6感染所致海市、山东省、四川省等地毒株亲缘关系较近，HFMD病例数最多的地区为安宁市和石林县，皆为ClusterⅢ与2019年江西省南昌株亲缘关系较近。郊县，高峰期分别为冬季和春季，CVA4和EV71所ClusterⅠ与Ⅱ、Ⅲ之间的核苷酸序列平均差异分别致病例均呈散在分布，提示在非发病高峰季节要注为3.70%、4.90%，ClusterⅡ与Ⅲ之间的核苷酸序列意防范郊县CVA16、CVA6感染所致的HFMD暴发。平均差异为5.10%;三个小分支序列与2017年越南非CVA16/EV71的EV感染比例的增加与多个城市［14，15］株(LC438150)位于同一个大的进化分支，与其核苷研究结果相似，其中CVA6等EV是HFMD重［16］酸序列的平均差异为3.60%－9.10%。(3)昆明市症不可忽视的类型，提示应加大对非CVA16/EV71属于C4a分支，与2019年越南株EV71的EV感染的监测力度，同时继续开展对(MW139736)、2017年中国山东济南株CVA16感染的长期监测。(MH605015)和2017年中国广西株(MK838976)亲本研究遗传进化分析表明，昆明市2021年缘关系较近，核苷酸相似性、氨基酸同源性分别为HFMD病例的CVA16优势亚型为B1a亚型，极少量97.20%－97.50%、99.00%－99.70%;与泰国、柬埔属于B1b亚型，与近年来中国HFMD的CVA16优［17］寨C4a代表株处于同一个大的进化分支，核苷酸序势亚型为B1b的流行模式不同，并且昆明市列的平均差异为3.70%－5.90%。(4)昆明市CVA4CVA16的聚集性很强，与2019年中国广东株和属于C2亚型，核苷酸相似性、氨基酸同源性分别为2017年越南株亲缘关系密切，而该广东株可能由越［18］91.90%－100%、98.40%－100%，其中ClusterⅠ、Ⅱ南等东南亚国家输入，提示昆明市CVA16可能两个分支分别占81.25%(13/16)、18.75%(3/16)，与二者有共同的祖先毒株，或者可能来自越南输入，ClusterⅠ与中国云南省文山市、四川省广元市、辽昆明市HFMD疫情居高不下的原因可能是由于B1a宁省、香港特别行政区、贵州省、江苏省盐城市等地亚型的传播;昆明市CVA6属于D3a分支，CVA4属毒株亲缘关系较近，ClusterⅡ与中国四川省成都株于C2亚型，皆属于中国近年HFMD的优势流行基［19，20］和云南省曲靖株亲缘关系较近，两分支之间核苷酸因型，与中国南北方诸多城市流行株具有较紧序列的平均差异为7.10%。密的系统进化关系，均存在2－3个小进化分支，且具有优势小进化分支，提示可能存在多条传播链，优讨论势小的进化分支有持续传播的风险;昆明市EV71属于C4a分支，该分支是中国近年流行的优势基因［21］本研究显示，2021年昆明市HFMD发病季节呈型，与越南株、中国山东省济南株和广西株的亲夏季主高峰、冬季次高峰的双峰模式，而中国许多省缘关系密切，并且与泰国、柬埔寨等国家的C4a代［9］份以夏季为主高峰而秋季为次高峰，与四川省等表株处于同一个大的进化分支，核苷酸序列的平均［10，11］地的季节分布特征比较相似;昆明市HFMD流差异较小，提示昆明市EV71与东南亚EV71处于共行地区广泛，晋宁区、石林县、东川区等郊县地区的循环共进化状态，存在毗邻国家流行株输入昆明市HFMD发病率较高，而重症和死亡病例集中在官渡的风险。区、西山区、呈贡区、五华区等主城区，与以往监测结本研究同时检测到CVA2、CVA5和E18等其他［12］果相似，可能与主城区集中了优质医疗资源、收8种EV，为完善和掌握昆明市HFMD的EV病原谱治重症病例较多有关;男性HFMD发病率显著高于变化和分子流行病学规律积累了资料，也为科学有女性，5岁以下儿童为HFMD高危人群，尤其是1岁效防控HFMD和研发其他基因型EV疫苗提供了基儿童发病所占比例最大。因此，应重点针对夏季、5础数据。由于多种基因型EV同时流行可导致基因［22］岁以下儿童和郊县地区，合理配置资源，做好昆明市重组频繁发生，因此应持续加强HFMD的EV病

6·70·CHINESEJOUＲNALOFVACCINESANDIMMUNIZATIONVol．29No．12023原谱监测，根据病毒流行规律及时研判疫情形势。学和病原学特征分析［J］．中华疾病控制杂志，2017，21(10):1052-1056．但受技术手段所限，目前本研究未能对所有非［11］高海军，郑金鑫，莫筱瑾，等．2011－2019年甘孜藏族自治州EV71、CVA16和CVA6的EV进行基因分型鉴定，今手足口病流行病学及病原学特征分析［J］．中国病原生物学后需进一步提高分型鉴定和测序水平，更全面地了杂志，2021，16(3):261-265．解昆明市HFMD病例的EV病原谱。［12］刘艳艳，简千棋，马丽波，等．2013－2018年昆明市重症手足口病实验室监测结果分析［J］．现代预防医学，2020，47(2):参考文献:314-316+335．［1］丛山日，许丹菡，张名，等．2019年云南省昆明市2株柯萨［13］刘艳艳，李文龙，简千棋，等．2010－2016年昆明市肠道病毒奇病毒A4毒株全基因序列分析［J］．中国病毒病杂志，71型流行特征及VP1基因特征分析［J］．现代预防医学，2020，10(6):439-444．2018，45(16):3031-3035．［2］LINJY，SHIHSＲ．Cellandtissuetropismofenterovirus71and［14］吕静，魏希文，阴珊珊，等．2013－2018年泰安地区手足口病otherenterovirusesinfections［J］．JBiomedSci，2014，21(1):病原学构成及流行病学分析［J］．病毒学报，2020，36(6):18．1037-1042．［3］杨溪，姜黎黎，曹亿会，等．云南省2009－2019年手足口病［15］于伟，杜晓兰，张倩，等．2013－2018年辽宁省手足口病病原流行特征及病原学特征分析［J］．现代预防医学，2021，48学监测及其分子特征分析［J］．病毒学报，2020，36(1):26-(5):789-792．34．［4］李洋，张相萍，翟明强，等．2011－2015年安阳地区手足口病［16］刘艳艳，向以斌，李文龙，等．2014－2018年昆明市重症手足相关人肠道病毒B种病原组成及柯萨奇病毒B2、B5VP1基口病病原柯萨奇病毒A6型的流行与遗传变异特点［J］．中国因特征分析［J］．中华微生物学和免疫学杂志，2016，36病原生物学杂志，2021，16(9):1056-1059+1063．(6):435-441．［17］陈国清，李春香，王瑶，等．2016年盐城地区手足口病A组［5］ISHIKOH，SHIMADAY，YONAHAM，etal．Molecular肠道病毒VP1基因特征［J］．现代预防医学，2017，44(15):diagnosisofhumanenterovirusesbyphylogeny-based2839-2844．classificationbyuseoftheVP4sequence［J］．JInfectDis，［18］YIL，ZENGH，ZHENGH，etal．Molecularsurveillanceof2002，185(6):744-754．coxsackievirusA16insouthernChina，2008－2019［J］．Archives［6］OBEＲSTEMS，MAHEＲK，FLEMISTEＲMＲ，etal．ofVirology，2021，166(6):1653-1659．Comparisonofclassicandmolecularapproachesforthe［19］王冰，张春青，王萍，等．沈阳地区2013－2017年手足口病identificationofuntypeableenteroviruses［J］．JClinMicrobiol，肠道病毒柯萨奇A组6型的分子流行病学研究［J］．中华实2000，38(3):1170-1174．验和临床病毒学杂志，2018，32(4):362-366．［7］OBEＲSTEMS，MAHEＲK，WILLIAMSAJ，etal．Species-［20］JIT，GUOY，LVL，etal．EmergingrecombinationoftheC2sub-specificＲTPCＲamplificationofhumanenteroviruses:atoolforgenotypeofHFMD-associatedCV-A4ispersistentlyandextensivelyrapidspeciesidentificationofuncharacterizedenteroviruses［J］．JcirculatinginChina［J］．SciＲep，2019，9(1):13668．GenVirol，2006，87(Pt1):119-128．［21］ZHANGY，WANGJ，GUOW，etal．Emergenceand［8］LOTTJP．Atypicalhand-foot-and-mouthdiseaseassociatedwithtransmissionpathwaysofrapidlyevolvingevolutionarybranchC4acoxsackievirusA6infection［J］．JAmAcadDermatol，2013，69strainsofhumanenterovirus71inthecentralplainofChina［J］．(5):736-741．PLoSOne，2011，6(11):e27895．［9］王晓文，施勇，李健雄，等．江西省2009－2017年手足口病［22］杨倩，曾汉日，郑焕英，等．广东省2020年首次报道E基因流行病学特征及病原学研究［J］．病毒学报，2018，34(6):型柯萨奇病毒B组3型的鉴定及基因特征分析［J］．病毒学844-849．报，2022，38(1):57-63．［10］刘雅琼，袁伟，吕强．2009－2016年四川省手足口病流行病(收稿日期:2022-09-27)