河北省致手足口病病原谱与病原基因特征分析

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1、'目录中文摘要⋯··⋯···⋯⋯···⋯⋯·····⋯⋯⋯···⋯⋯·····⋯···⋯·⋯⋯·1英文摘要⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·5英文缩写OOO⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··10研究论文河北省致手足口病病原谱及病原基因特征分析前言．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．·．．．·．···．·············．·．···········．····1。1刖吾“””一一”一””“””一””一”””””””””一””一””．．”””l材料与方法⋯⋯⋯··ooo·o··Ooeoo⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯··12结果BOO·······················OOO··························18附图·．·⋯····⋯⋯··OOOlO6OO·eoeo⋯·⋯⋯···⋯·⋯·OOO·23附表··oeoeoe·······oeoeoo····ooeoeo······00eoOeOO·····33讨论············OOO········ooQOgOeoeoo····ooo·OO6OO·43结论·····························eoeoeoeoo········ooeoo·····47参考

3、文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·．47综述手足口病研究进展·oeoeo⋯··eeoee⋯⋯⋯⋯·OeO0⋯⋯⋯⋯⋯51致谢⋯OOBDeOo⋯⋯⋯⋯⋯··eeoeoeoo⋯··eeoeo⋯⋯⋯⋯·oeoe·59个人简历⋯⋯⋯⋯⋯ooeoeo·oeoeo⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··60中文摘要河北省致手足口病病原谱及病原基因特征分析摘要目的：了解河北省手足口病(I-IFMD)不同病原的流行特征，明确其病原谱及主要病原的基因特征，为河北省手足口病的监测和预防控制工作提供科学依据。方法：1通过流行病学调查，采集HFMD临床诊断病例的粪便、肛拭子

4、、咽拭子、疱疹液和脑脊液标本。2针对肠道病毒(EV)5’端非编码区保守基因序列以及EVVPl至2A区基因序列设计EV通用引物和型特异性引物，通过RT-PCR扩增检测HFMD临床诊断病例的标本，并对病原进行分型。3将RT-PCR检测为EV阳性的HFMD实验室诊断病例标本接种RD细胞分离病毒；通过RT-PCR法对出现细胞病变(CPE)的标本进行毒株鉴定。4针对主要病原EV71和CAl6的VPl区全核苷酸序列设计引物，用RT-PCR扩增18株EV71、9株CAl6的VPl区，测定其序列，用DNASTAR软件进行核苷酸序列同源性分析并构建系统发生树，对河北

5、省EV71和CAl6分离株的基因亚型进行分析。结果：1采用RT-PCR法共检测HFMDI临床诊断病例1990份标本，1296份标本EV阳性，阳性率为65．13％，其中752份标本EV71阳性，阳性检出率为37．79％7452份CAl6阳性，阳性检出率为22．71％；1份EV71+CAl6阳性，阳性检出率为0．05％；91份其他EV阳性，阳性检出率为4．57％。病原构成结果显示，HFMD病原以EV71为主，占阳性病例的58．03％(752／1296)，次之是CAl6，占阳性病例的34．88％(452／1296)，其他EV占一定比例，占阳性病例的7．0

6、2％(91／1296)。随机抽取55份其他EV阳性标本(42份普通病例、13份重症病例)，进一步分析上述其他EV中病原的构成情况。经RT-PCR和测序进一步分型，除24份未定型外，共鉴定出31份，从构成情况看，CAl0占18．18％(10／55)，CA6占14．55％(8／55)，中文摘要31份，从构成情况看，CAl0占18．18％(10／55)，CA6占14．55％(8／55)，EC030占9．09％(5／55)，EC06、EC09各占3．64％(2／55)，CA5、CAl4、CB5、EC014各占1．82％(1／55)，未定型占43．64％(2

7、4／55)。结果提示，其他EV中病原构成复杂，涉及多种病毒，本次试验共检出9种，但主要以CAl0、CA6、EC030为主。2从不同地区的病原构成情况看，秦皇岛、邯郸、保定、邢台地区EV7l所占比例较高，分别为77．53％、76．18％、69．12％、65．98％；衡水、沧州地区CAl6所占比较高，分别为64．29％、51．28％；沧州地区其他EV所占比例相对较高，为33．33％。对55份其他EV阳性标本进一步分型显示，除廊坊、邢台、秦皇岛未分出型别外，其他地区均存在一种或一种以上的其他型别。沧州地区11份标本中，6份为CAl0阳性，1份为EC030

8、阳性；石家庄地区其他EV型别种类较多，13份标本中共检出7种其他型别，分别为CA5、CA6、CAl0、CAl4阳性各1份，