厌氧性细菌

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第13章厌氧性细菌（anaerobicbacteria）

1概述必须在无氧环境下，才能生长繁殖根据能否形成芽胞，可分为厌氧芽胞梭菌属无芽胞厌氧菌1861年，巴斯德发现厌氧菌1863年，正式命名为厌氧菌厌氧菌培养技术的应用与完善

2外毒素厌氧芽胞梭菌属致病菌特定病症（G+，梭形）破伤风梭菌破伤风产气荚膜梭菌气性坏疽；食物中毒;坏死性肠炎肉毒梭菌食物中毒；婴儿肉毒病特定条件无芽胞厌氧菌正常菌群内源性化脓感染（G+/G-，球/杆形）

3第一节厌氧芽胞梭菌属(Clostridium)

4概述严格厌氧菌，革兰阳性芽胞比菌体粗，呈梭状，抵抗力强周鞭毛，无荚膜（除产气荚膜梭菌外）致病菌产生外毒素致病，病情严重防治：类毒素与抗毒素

5一、破伤风梭菌（C．tetani）破伤风（tetanus）的病原菌

6破伤风在公元前460年就有记载，但病原菌—破伤风梭菌直到1884年才被发现。污染创口？发芽痉挛?破伤风芽胞繁殖毒素脐带断端新生儿破伤风（脐风）发病特点为骨骼肌强直性痉挛、抽搐，可因窒息或呼吸衰竭死亡。

7生物学性状形态与染色菌体细长，芽胞正圆，位于菌体顶端，使细菌呈鼓槌状培养特性和生化反应血平板上，有β溶血羽毛状菌落

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9图118-24h,革兰染色图224-48h,革兰染色图348h后,革兰染色

10抵抗力芽胞抵抗力很强75~80℃10min仍保持活力在干燥的土壤和尘埃中可存活数年

11致病性与免疫性所致疾病-破伤风

12致病条件伤口需形成厌氧微环境伤口窄而深（如刺伤）,有泥土或异物污染大面积创伤、烧伤,坏死组织多,局部组织缺血有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染的伤口无侵袭力，仅在局部繁殖，其致病作用完全有赖于病菌所产生的外毒素

13致病因子对氧敏感的破伤风溶血毒素(tetanolysin)质粒编码的破伤风痉挛毒素(tetanospasmin)属神经毒(neurotoxin)，对脑干神经和脊髓前角细胞有高度亲合力。毒性极强(对人致死量<1µg),毒性极强，每毫克纯化的结晶可杀死2000万只小鼠。蛋白质，不耐热，具有免疫原性，经0.3%甲醛作用脱毒成为类毒素。

14破伤风痉挛毒素结构菌体：一条多肽释出菌体：轻链（A链）-S-S-重链（B链）B链：神经节苷脂结合的单位A链：毒性作用

15破伤风痉挛毒素作用机制破伤风杆菌繁殖分泌痉挛毒素运动神经终板吸收中枢神经与脊髓内抑制性中间神经元突触前体膜上GM1结合阻断甘氨酸能中间神经元γ-氨基丁酸能神经元甘氨酸γ-氨基丁酸骨骼肌痉挛创伤性感染(厌氧性伤口)神经纤维间隙扩散淋巴吸收血液释放导致

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20牙关紧闭苦笑面容

21角弓反张

22免疫性破伤风免疫属外毒素免疫，主要是抗毒素发挥中和作用（毒素与中枢神经组织结合非常牢固，一旦结合即非抗毒素所能中和）病后不会获得牢固免疫力获得有效抗毒素的途径是人工免疫

23微生物学检查法一般不进行涂片镜检和分离培养典型的症状和病史即可作出诊断

24防治原则一般性预防特异性预防特异性治疗

251、正确处理伤口(及时清创扩创;局部应用抗生素),防止创口厌氧微环境的形成2、无菌接生，消毒脐带断端。一般性预防

26免疫程序：3、4、5月3次2、7岁加强2次特殊情况1次紧急预防：注射破伤风抗毒素（TAT）(1500~3000单位)，同时注射类毒素联合免疫，效果更佳。特异性预防：注射破伤风类毒素,用于远期预防对军人、建筑工人及其他易受外伤的人群：破伤风类毒素儿童：白-百-破(DPT)3联疫苗

27特异性治疗对已发病者，应早期、足量使用10~20万单位TAT紧急治疗。注意：TAT皮肤试验！中药(五虎追风散,驱风汤)

282005年临床执业医师资格考试试题73.注射破伤风抗毒素（TAT）的目的是A.对易感人群进行预防接种B.对可疑或确诊的破伤风患者进行紧急预防或治疗C.杀灭伤口中繁殖的破伤风梭（杆）菌D.主要用于儿童的预防接种E.中和与神经细胞结合的毒素

29二、产气荚膜梭菌(C．perfringens)

30生物学性状两端平切粗大杆菌芽胞位于次极端，呈椭圆形，不大于菌体无鞭毛体内有明显的荚膜形态与染色

31培养特性生长迅速，代谢活跃，45℃生长最好血琼脂平板：双层溶血环内环完全溶血-θ毒素外环不完全溶血-α毒素蛋黄琼脂平板：Nagler反应牛奶培养基：“汹涌发酵”（stormyfermentation）

32双层溶血内层外层

33蛋黄琼脂平板菌落Nagler反应α抗毒素

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35分型分为5个毒素型A、B、C、D、E型A型----气性坏疽C、D型----食物中毒

36致病性致病物质外毒素

37产气荚膜梭菌主要和次要毒素及其分型

38致病物质α毒素以A型产生量最大引起血管通透性增加伴大量溶血、组织坏死、肝脏、心功能受损在气性坏疽的形成中起主要作用β、ε、ι毒素引起坏死损伤和血管通透性增加肠毒素

39所致疾病气性坏疽主要由A型产气荚膜梭菌引起致病条件与破伤风梭菌相同潜伏期短，发展迅速，病情险恶，死亡率高，以组织坏死，气肿和全身中毒为特征

40组织坏死、血管内皮损伤，通透性上升出血、水肿、局部坏死分解糖产气，压迫软组织、血管加重组织坏死（捻发音）分解组织，病变迅速扩散，引起全身中毒症状

41细菌多侵入臀部、大腿、肩胛等肌肉较厚部位

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43食物中毒食入被大量细菌污染的食物（多为肉类）肠毒素：整段肽链嵌入细胞膜破坏膜离子运输功能。临床表现：腹痛、腹胀、水样腹泻；可1-2天自愈。

44微生物学检查法直接涂片镜检深部创口取材涂片革兰阳性大杆菌白细胞少且不典型伴有其它杂菌早期诊断能避免病人最终截肢或死亡

45分离培养及动物实验接种血平板或庖肉培养基，镜检及生化反应鉴定动物实验如怀疑食物中毒，在发病后一日内，检出大于105病菌/克食品或106病菌/克粪便可确立诊断

46防治原则预防及时处理伤口，破坏和消除厌氧微环境预防性的使用抗生素治疗局部感染的处理抗生素（青霉素）气性坏疽多价抗毒素（α抗毒素）高压氧舱法

47三、肉毒梭菌（C．botulinum）

48生物学特性芽胞呈椭圆形，粗于菌体，位于次极端，使细胞呈汤匙状或网球拍状根据神经毒素的抗原性分A~G7个型，各型毒素只能被同型抗毒素中和对人类致病的主要是A、B型

49肉毒毒素：100℃1min破坏；耐酸pH3-6；耐胃肠消化酶的分解抵抗力繁殖体：80℃30min或100℃10min杀灭芽胞：100℃5-7h或湿热120℃20min或干热180℃15min杀灭

50致病性致病物质肉毒毒素剧毒（对人致死量为0.1µg)功能和致病机制与破伤风外毒素相似

51作用机制作用于外周神经肌肉接头处，抑制外周神经介质乙酰胆碱的释放，导致弛缓性麻痹前体分子存在，可稳定存在于外环境和胃肠道。复合物进入小肠后，在碱性情况下解离，被吸收进入血循环

52所致疾病食物中毒进食污染食物（多为罐头、肉制品、豆制品）发生食物中毒---食入毒素临床表现：少见胃肠道症状，主要为神经末梢麻痹（松驰型）乏力、头痛→眼肌麻痹：复视、斜视、眼睑下垂→咽部肌肉麻痹：吞咽、咀嚼困难、口齿不清→膈肌麻痹，呼吸困难→窒息死亡神志清楚病死率高

53最剧烈的毒素！！！恐怖分子选其制备生物武器！！！眼睑下垂

54婴儿肉毒病细菌进入肠道，被肉毒梭菌芽胞污染的蜂蜜等食品。繁殖，产生毒素而致病1岁以下，特别是6个月以内的婴儿居多，因其肠道中缺乏拮抗肉毒梭菌的正常菌群。症状与肉毒食物中毒类似，便闭、吸乳、啼哭无力。病死率不高（1%-2%）

55婴儿肉毒中毒

56BOTOX(botulinumtoxin)肉毒毒素的去皱作用

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59微生物学检查法标本食物中毒患者：食物婴儿肉毒病患者：粪便粪便、食物等标本可先80°C加热10分钟，再厌氧培养毒素检查

60防治原则加强食品卫生管理和监督，提高防范意识（低温保存食物，高温破坏毒素）鼓盖或胀袋肉制品，勿食用！！尽早根据症状作出诊断，迅速注射A、B、E三型多价抗毒素，同时加强护理和对症治疗

61本节复习要点概念:TAT思考题:1、有关破伤风的三个问题？2、分析婴儿肉毒中毒与新生儿破伤风临床表现不同的原因？3、肉毒梭菌引起的食物中毒与其它食物中毒有何不同？为什么？