尿胆原定性测定干法学法作业指导书

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1、尿胆原定性测定干法学法作业指导书1.实验原理试带有两种,一种是以Ehrlich醛反应为基础的快速检验试带,另一种是利用尿胆原与重氮化合物的耦联反应,根据产生红色的深浅判断尿胆原含量。既可以定性,也可以定量。2.标本采集2.1标本采集前病人准备:以清晨第一次尿为宜,急诊患者可随时留取。2.2标本种类:新鲜尿液2.3标本要求:采集患者尿液标本时,盛尿液的容器必须清洁干燥,要求留取中段尿。3.标本储存:排出到检测应在2小时内完成。如不能及时送检或分析,应置4℃下冷藏保存,但冷藏时间不得超过6小时。4.标本运输:室温运输。5.

2、标本拒收标准:细菌,经血,白带,精液,粪便污染标本不能作测定。6.试剂6.1试剂名称:Combur10TestRM6.2试剂厂家:德国Roche诊断试剂公司6.3包装规格:100Test/kit6.4试剂盒组成:试纸条:100条6.5试剂储存条件及有效期:试剂盒贮存于2-30℃条件下,可使用至试剂盒所标示有效期。7.仪器设备7.1仪器名称:罗氏尿液分析仪7.2仪器厂家:Roche7.3仪器型号:MiditronRJuniorII7.4仪器校准程序:在使用过程中,一般是两周校准一次,如超过此期限,仪器会提示“Please

3、Calibrate”(请校准)。通过测定内部参比块,环境温度和光学系统的改变都可被补偿。当条件改变很大时,比如参比块腐蚀或发光二极管的亮度变暗,仪器将打印出一个错误信息;校准条是有稳定特征的灰白色试条,这些校准条只能使用一次。校准前,应先清洁试纸托盘与运输臂。步骤为:在“READY—”显示时,按键,放上校准条。再按键,校准条被送入机器内,屏幕显示“Calibrating”(正在校准),约一分钟后,标准结果将被打印出。“CalibratingO.K”,表示校准成功

4、。8.操作步骤:8.1按键,显示“PrepareStrip”,此时试条筒中拿出试条。8.2约4秒钟后,显示“DipStrip1”,同时绿灯闪烁,将试条浸入尿样中。8.3当显示“InsertStrip1”,把试条放在试条托盘上,此时绿灯亮,若要人工输入颜色,按键,再按键,选择相近的颜色,最后按键确认,同样也可人工输入浊度。8.4约20秒后,显示“DipStrip2”,然后重复以上过程。8.5每一个测量完成后将自动打印出结果。9.结果判断:不变色(0mg/L),浅棕色(0

5、.5mg/L),黄棕色(1.5mg/L),棕色(4.0mg/L),深桔色(>80mg/L)10.质量控制:质控尿液的应用:用人工质控尿液进行空内质控,低浓度质控液应为(-),高浓度质控液应为(+)。11.参考范围:阴性或弱阳性,1:20稀释后阴性12.临床意义:12.1正常人为弱阳性反应,尿液稀释20倍后多为阴性。12.2尿胆原阴性常见于完全阻塞性黄疸。12.3尿胆原增加常见于溶血性疾患及肝实质性病变如肝炎。13.操作性能:快速简便,特异性强,灵敏度高,重复性好。14.方法局限性14.1由于醛反应快速,应在规定时间内观

6、察结果.14.2卟胆原,内生性吲哚,黑色素原可造成假阳性。14.3阳性反应时稀释的方法同改良Ehrlich。14.4尿液要新鲜。15.注意事项:15.1阳性程度与饮水量有关,夜间和上午排泄较少,午餐后迅速增高。而且尿胆原的清除率与尿液PH有关,PH为5.0时,排泄率为2ml/min;而为8.0时,排泄率为25ml/min。测试前应嘱患者口服少量NaHCO3使尿液碱化,留取午餐后2-4时尿液做尿胆原定性。检测前再以乙酸调节PH至弱酸性。15.2若尿胆原定性阴性,可加做尿胆素定性试验予以验证,以免因标本久置造成假阴性。15

7、.3长期应用抗生素可抑制肠道菌群,严重腹泻也会影响胆红素转变为尿胆原,造成结果阴性。长期便秘使尿胆原过度吸收,定性时阳性程度增高,分析结果时应注意。16.当检验系统(仪器)不能工作时,所采取的补救措施:当检验系统(仪器)不能工作时,可联系仪器厂家,进行紧急修理,如一时不能修好,如别的实验室有同类仪器可到别的仪器上先测,如别的实验室无同类仪器,申请厂家送一台能正常工作的仪器代替。17.参考文献17.1王毓三主编.全国临床检验操作规程.中华人民共和国卫生部医政司,1997,北京:12917.2刘成玉主编.临床检验基础实验指

8、导.人民卫生出版社.2002,北京:109-110

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