尿蛋白定性测定干法学法作业指导书

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1、尿蛋白定性测定干法学法作业指导书1.实验原理利用指示剂的蛋白质误差原理，蛋白质与指示剂的离子（漠甲酚蓝漠酚蓝二酯）相结合生成复合物引起指示剂的进一步电离，超过了尿液的缓冲能力，指示剂则发生颜色变化。颜色的深浅与蛋白质含量成正比。2.标本采集2.1标本采集前病人准备：以清晨第一次尿为宜，急诊患者可随时留取。2.2标本种类：新鲜尿液2.3标本要求：采集患者尿液标本时，盛尿液的容器必须清洁干燥，要求留取中段尿。3.标本储存：从排出到检测应在2小时内完成。如不能及时送检或分析，应置4°C下冷藏保存，但冷藏时间不得超过6小时。4.标本运输：室温运输。5.标本拒收标

2、准：细菌，经血，白带，精液，粪便污染标本不能作测定。2.试剂6.1试剂名称Combur—TestRM6.2试剂厂家德国Roche诊断试剂公司6.3包装规格：100Test/kit6.4试剂盒组成：试纸条:100条6.5试剂储存条件及有效期：试剂盒贮存于2-30°C条件下，可使用至试剂盒所标示有效期。7.仪器设备7.1仪器名称：罗氏尿液分析仪3.2仪器厂家：Roche7.3仪器型号：Miditror/JuniorII7.4仪器校准程序：在使用过程中，一般是两周校准一次，如超过此期限，仪器会提示“PleaseCalibrate”（请校准）。通过测定内部参比块

3、，环境温度和光学系统的改变都可被补偿。当条件改变很大时，比如参比块腐蚀或发光二极管的亮度变暗，仪器将打印出一个错误信息；校准条是有稳定特征的灰白色试条，这些校准条只能使用一次。校准前，应先清洁试纸托盘与运输臂。步骤为：在“READY—〈START〉”显示时，按〈Calibrate＞键，放上校准条。再按〈Calibrate＞键,校准条被送入机器内，屏幕显示“CaIibrating”（正在校准）,约一分钟后，标准结果将被打印出。“CalibratingO.K”，表示校准成功。8・操作步骤：7.1按＜START＞键9显示ilPrepareStrip”，此时试条

4、筒中拿出试条。2.2约4秒钟后，显示“DipStrip1n,同时绿灯闪烁，将试条浸入尿样中。6.3当显示"InsertStrip1,把试条放在试条托盘上，此时绿灯亮，若要人工输入颜色，按〈CoIor＞键,再按〈Set＞键，选择相近的颜色，最后按＜Enter＞键确认，同样也可人工输入浊度。6.4约20秒后，显示“DipStrip2n,然后重复以上过程。每一个测量完成后将自动打印出结果。9・结果判断：淡黄色（-），淡黄绿色（+/-），黄绿色（+）,绿色（++）,灰绿色（+++）,灰兰色（++++）10.质量控制：质控液的使用，低浓度质控液（蛋白质1.5g/L

5、）蛋白定性应为（++）；高浓度质控液（10g/L）蛋白定性为（++++）。伯.参考范围：阴性12.临床意义：分为功能性，体位性，病理性蛋白尿，后者见于肾炎，肾病综合症。13.操作性能：快速简便，特异性强，灵敏度高，重复性好。14.方法局限性14.1试带应干燥，避光保存，远离酸性和碱性物质。避免用（湿）手触摸试带的试剂垫部分，以防试带污染失效。14.2浑浊尿不影响比色，但尿液颜色异常（如血尿，血红蛋白尿，胆红素尿）将影响结果的观察。15.注意事项15.1干扰因素的控制与分析15.1.1PH：尿液偏碱时（PH>9）,干化学试带法可呈假阳性;尿液偏酸（PH〈3

6、）则会引起蛋白假阴性。因此，实验前需先将尿液PH调至5—6015.1.2药物：当患者应用大剂量青霉素钾盐，庆大霉素，磺胺，PAS,含碘照影剂时，可使化学试带法呈假阴性。15.1.3反应时间和标本量：试带法需要足够的反应时间和标本量，因此检测时要求试带充分浸湿，但不宜长时间浸泡。时间过短，标本不足，反应不完全使结果偏低；时间太长使试带上包埋的药物洗脱至尿中，也会导致结果偏低。15.2试带的差异不同厂家不同批号的试带显色有差异，故强调使用严格标准化的试带。15.当检验系统《仪器》不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统（仪器）不能工作时，可联系仪器厂家，进行

7、紧急修理，如一时不能修好，如别的实验室有同类仪器可到别的仪器上先测，如别的实验室无同类仪器，申请厂家送一台能正常工作的仪器代替。16.参考文献17.1叶应妩王毓三主编•全国临床检验操作规程•中华人民共和国卫生部医政司，1997,北京:12117.2刘成玉主编•临床检验基础实验指导•人民卫生出版社，2002,北京：95-96