【同济医科大学】优质课《医学微生物学》-第41章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全

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1、【同济医科大学】优质课全国特级教师江新欢博士教授《医学微生物学》第41章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全第一节消毒灭菌的常用术语灭菌:杀死物体上所有微生物的方法。消毒：杀死物体上或环境中的病原微生物的方法，并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物。消毒剂----用于消毒的药品。防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。清洁：通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数量的过程。无菌：无活菌存在。无菌操作：防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。第二节消毒灭菌的方法（一）热力灭菌法高温对细菌有明显的致死作用---蛋白质变性；核酸断裂。有干热灭菌和湿热灭菌两大类，在同一温度下

2、，后者比前者的效力大。湿热中菌体蛋白较易凝固。湿热的穿透力比干热大。湿热的蒸汽有潜热存在。物理消毒灭菌法干热灭菌干热的杀菌作用是通过脱水、干燥和大分子变性。1.焚烧法：直接点燃或在焚烧炉内焚烧。是一种彻底的灭菌方法。适用于废弃物品或动物尸体。2.烧灼法：直接用火焰灭菌。适用于接种环，试管口等的灭菌。3.干烤法：将物品置干烤箱内，加热至160~170℃，2h。适用于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品。4.红外线：利用电磁波的热效应灭菌。1~10m波长的热效应最强。适用于医疗器械的灭菌。湿热灭菌1.巴氏消毒法：用较低温度杀灭液体中的病原微生物或特定的微生物，而仍保

3、持物品中所需的不耐热成分不被破坏的消毒方法。61.1~62.8℃，30min;71.7℃,15~30s用于牛乳制品、酒类等的消毒。2.煮沸法:100℃水浴，30min。食具、刀剪等消毒。3.流动蒸气消毒法：100℃汽浴，30min。4.间歇蒸汽灭菌法：100℃汽浴，30min/次。5.高压蒸汽灭菌法：121.3℃汽浴（103.4kPa)，15~20min。培养基、生理盐水、手术敷料等耐高温、耐湿物品的灭菌。（二）辐射杀菌法紫外线杀菌波长200~300nm的紫外线有杀菌作用，其中以265~266nm最强。杀菌机制：形成TT,干扰DNA的复制与转录。杀菌作用特点：穿

4、透力弱，表面消毒。适用范围：手术室、传染病房、细菌实验室的空气消毒,或不耐热物品的表面消毒。电离辐射：高速电子、Ｘ射线、γ射线等。杀菌机制：产生游离基，破坏DNA。应用范围：一次性医用塑料制品；食品。微波：波长为1mm到1m左右的电磁波，可穿透玻璃、塑料薄膜与陶瓷等物质，不能穿透金属表面。检验室用品、非金属器械、无菌病室的食品用具、药杯及其它用品的消毒。（三）滤过除菌法用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌除去，以达到无菌的目的。抽气（四）干燥与低温抑菌法干燥可使菌体内的水分逸出，使细菌生命活动停止。低温可使细菌的新陈代谢减慢，影响细菌的生长。冷冻真空干燥法一、化

5、学消毒剂的杀菌机制促进菌体蛋白质变性或凝固。如酚类、醇类、重金属盐类、酸碱类、醛类等。干扰细菌的酶系统和代谢。如氧化剂、重金属盐类。损伤菌细胞膜，降低菌细胞的表面张力并增加其通透性，胞外液体内渗，致使细胞破裂。如酚类表面活性剂、脂溶剂等。化学消毒灭菌法二、消毒剂的主要种类酚类—石炭酸、来苏、洗必泰等醇类---乙醇（70~75%）、异丙醇。重金属盐类---硝酸银、汞氧化剂---过氧化氢、高锰酸钾、过氧乙酸、碘酒、漂白粉、次氯酸等。表面活性剂---新洁尔灭、、杜灭芬烷化剂---甲醛、还氧乙烷、戊二醛等。染料---龙胆紫酸碱类---醋酸第三节消毒灭菌的运用（一）

6、高危器械物品用时需进入无菌组织的物品。所有这些物品都应该灭菌。。（二）中危器械物品用时不进入无菌组织但接触黏膜的器械。采用消毒即可。（三）低危器械物品只接触未损伤皮肤但不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。一般用后清洗、消毒即可。（四）快速周转的医疗器械一、医疗器械物品的消毒灭菌（二）室内空气消毒灭菌1.物理消毒法①紫外线照射（1.5W/m3，1h）最常用；②滤过除菌：空气通过孔径小于0.2μm的高效过滤装置以除去细菌和带菌尘埃。2．化学消毒法包括化学消毒剂喷雾和熏蒸：①过氧乙酸喷雾、熏蒸；②过氧化氢喷雾；③二氧化氯溶液喷洒；④中草药点燃烟熏。（三）手和皮肤的消毒用

7、肥皂和流动水经常并正确洗手。病原微生物污染时应用消毒剂消毒。（四）黏膜的消毒过氧化氢，高锰酸钾（五）病人排泄物与分泌物的消毒灭菌次氯酸钙，漂白粉（六）病人污染物品的消毒流通蒸汽，过氧乙酸，漂白粉（七）饮水的消毒氯气（八）环境的消毒过氧乙酸第四节影响消毒灭菌效果的因素一、消毒剂的性质、浓度与作用时间二、微生物的种类与数量三、温度四、酸碱度五、有机物第五节病原微生物实验室生物安全生物安全（biosafety）是生物技术安全（safetyofbiotechnology）的简称。狭义地指现代生物技术的研究、开发、应用及转基因生物可能对生物多样性、生态环境和人类健康产生潜

8、在的危害。广义地指与生物