消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全课件

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1、第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全1.消毒灭菌常用术语；2.消毒灭菌方法；3.消毒灭菌的应用；4.影响消毒灭菌效果的因素；5.病原微生物实验室生物安全。本章内容灭菌（sterilization）消毒（disinfection）防腐（antisepsis）清洁（cleaning）无菌（asepsis）抑菌（bacteriostasis）第一节消毒灭菌的常用术语灭菌（sterilization）杀灭物体上所有的微生物的方法。包括：病原微生物；非病原微生物；细菌的繁殖体和芽胞。消毒（disinfection）

2、杀死物体上病原微生物的方法，不一定杀死细菌芽胞和非病原微生物。消毒方法：化学消毒法；分类：预防性消毒；疫源性消毒；终末消毒；随时消毒。防腐（antisepsis）防止或抑制微生物生长的方法，微生物一般不死亡。试剂：防腐剂。用途：多用于食品的保存。清洁（cleaning）通过除去尘埃和一切污秽，从而减少微生物数量的过程。无菌（asepsis）不含活菌的意思，是灭菌的结果。无菌操作：防止微生物进入机体或污染物品的操作技术。抑菌（bacteriostasis）抑制体内体外细菌的繁殖的方法。试剂：抗生素。作用：抑制细菌

3、的生长。第二节消毒灭菌方法物理方法：热力；辐射；滤过；干燥；低温等。化学方法：化学试剂。一、物理消毒灭菌法（一）热力灭菌法多数细菌55~60℃30~60min死亡湿热80℃5~10min可杀死繁殖体和真菌1.干热灭菌法繁殖体80~100℃1h芽胞160~170℃2h（1）焚烧废弃物，动物尸体；（2）烧灼接种环，试管口；（3）干烤玻璃器皿，瓷器，玻璃注射器；（4）红外线食品，药品，医疗器械。2.湿热灭菌法（1）巴氏消毒法61.1~62.8℃30min71.7℃15~30s（2）煮沸法繁殖体：100℃5min芽胞：

4、100℃1~2h（3）流动蒸汽消毒法（4）间歇蒸汽灭菌法（5）高压蒸汽灭菌法121.3℃15~20min103.4kPa（1.05kg/cm2）湿热灭菌效果优于干热原因1.湿热中菌体蛋白易于凝固；2.湿热的穿透力强；3.湿热的蒸汽有潜热，可迅速提高被灭菌物品的温度。常用热力消毒灭菌器械立式灭菌器手提式灭菌器干烤箱（二）辐射杀菌法1.紫外线（UV）（非电离辐射法）（1）波长：265~266nm；（2）原理：干扰DNA的复制和转录；（3）特点：穿透力弱，应用范围窄。紫外线对人的影响1.UV-A：波长在315-400

5、nm，能使人的皮肤产生黑色素，使皮肤变黑。2.UV-B：波长在280-315nm的紫外线，UV-B能致癌，令皮肤起皱纹老化。3.UV-C：波长在200-280nm波段有杀菌、消毒效能。4.V-UV：波长在100-200nm能产生臭氧，而在空气中或溶解在水中的臭氧，能把微生物的细胞壁以氧化作用破坏，使微生物立刻死亡。常用紫外线杀菌设备紫外线车紫外线灯管2.电离辐射（1）β射线电子加速器产生；穿透性差；时间短，安全性好。（2）γ射线钴60产生；穿透性强，作用时间慢；安全措施要求高。（3）应用范围：一次性医用塑料制品

6、；食品；药品；生物制品等。3.微波（1）波长：1-1000mm；（2）特点：可穿透玻璃，陶瓷和薄塑料；（3）应用范围：食品；非金属器械；食品用具；餐具等。（三）滤过除菌法1.液体除菌滤菌器滤菌器原理常用滤菌器2.空气除菌三级生物洁净技术初级：泡沫海绵中效：无纺布高效或亚高效：超细玻璃滤纸（三）滤过除菌法空气过滤器层流实验室（四）干燥与低温抑菌法冷冻真空干燥法：在低温状态下真空抽去水分。二、化学消毒灭菌法（一）化学消毒剂作用机制：1.促进菌体蛋白变性或凝固；2.干扰细菌的酶系统和代谢；3.损伤细菌细胞膜。（二）化

7、学消毒剂的分类1.高效消毒剂可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物。（1）含氯消毒剂次氯酸钠，二氯异氰酸尿酸钠，漂白粉（氯化钙+次氯酸钙）；（2）过氧化物消毒剂过氧化氢，过氧乙酸，二氧化氯；（3）醛类消毒剂戊二醛，甲醛；（4）环氧乙烷杂环类化合物。2.中效消毒剂不能杀灭芽胞，能杀灭细菌繁殖体，真菌和大多数病毒。（1）含碘消毒剂碘酊，碘伏。（2）醇类消毒剂乙醇，异丙醇；3.低效消毒剂可杀灭多数细菌繁殖体，不能杀灭芽胞，结核分枝杆菌及某些抵抗力较强的真菌和病毒。（1）季铵盐类消毒剂苯扎溴铵（2）氯已定（洗必泰）（3）高

8、锰酸钾第三节消毒灭菌的运用1.高危器械物品需进入无菌组织的物品，所有这些物品都应该灭菌。2.中危器械物品用时不进入无菌组织但接触黏膜的器械，采用消毒即可。3.低危器械物品只接触未损伤皮肤但不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。一般用后清洗、消毒即可。4.快速周转的医疗器械一、医疗器械物品的消毒灭菌1.物理消毒法①紫外线照射（1.5W/m3，1h）最常用②滤过除菌：空气通过孔径小0.2μm的