消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全

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1、第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全Disinfection,sterilizationandbiosafetyofpathogenLab.1.5teachinghrs消毒与灭菌早在一百多年前，在巴斯德时代之前，人们把医院看成病人临终的场所，在他们进医院之前，几乎没有一个不是先向亲友作最后告别的。1860年，英国外科医生李斯特敢于接受巴斯德的新思想------病原菌是引起伤口化脓和各种传染病的罪魁祸首。提出“要制止伤口化脓，首先就要消灭一切可能进入伤口的各种病原菌”，创立了外科无菌技术。①为防止疾病的传播，对传染

2、病患者的排泄物和实验废弃的培养物亦须进行灭菌或消毒处理。②从预防感染出发，医务工作者必须建立“处处有菌”和无菌观念，严格执行无菌操作。消毒灭菌常用术语灭菌(sterilization)：杀灭物体上所有微生物的方法.包括病原微生物和非病原微生物,繁殖体和芽胞。消毒(disinfection)：杀死物体上或环境中的病原微生物的方法.并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物防腐(antisepsis)：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。清洁(cleaning)：通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数量的过程。无菌(aseps

3、is)：不存在活菌的意思，灭菌的结果。无菌操作:防止细菌进入人体或其它物品的操作技术.第一节消毒灭菌的方法一、物理消毒灭菌法（一）热力灭菌法（二）辐射radiation杀菌（三）滤过filtration除菌（四）干燥与低温抑菌法二、化学消毒灭菌法（一）热力灭菌法高温杀灭細菌干热灭菌法干热的杀菌作用通过脱水干燥和大分子变性而实现。一般细菌繁殖体在干燥状态下，80～100℃经1h即可被杀死；芽胞则需160～170℃经2h才会死亡。焚烧----最彻底的灭菌方法烧灼----直接用火焰灭菌方法干烤----加热160-180℃2

4、小时湿热灭菌法杀菌机制：在水分子存在的情况下更易于使菌体蛋白凝固，热力穿透性更强。较低的温度（62℃30分钟）杀灭致病菌高压蒸汽灭菌法最有效的灭菌方法121.3℃15~30分钟煮沸消毒法水煮100℃5分钟(繁殖体)~2小时(芽胞)流动蒸汽消毒法水蒸汽100℃15~30分钟(繁殖体)间歇灭菌法反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌巴氏消毒法湿热灭菌与干热灭菌的比较同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好1、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固2、湿热的穿透力比干热大3、湿热的蒸汽有潜热原因二、辐射radiation杀菌法波长240~280nm

5、的紫外线具有杀菌作用1，紫外线干扰DNA的复制与转录杀菌机理：紫外线穿透力较弱特点：空气消毒手术室、传染病房、细菌实验室不耐热物品的表面消毒应用范围：2，电离辐射包括高速电子、X射线和γ射线杀菌机理：产生游离基,破坏DNA。应用范围：一次性医用塑料制品的消毒食品的消毒不破坏其营养成分应用放射性同位素γ源或β射线加速器发生的高能量电子束进行灭菌。三、滤过filtration除菌法是利用物理阻留的方法除去液体或空气中的微生物，以达到无菌目的。滤菌器(filter):含有微细小孔<0.22微米,只允许液体或气体通过,而大于

6、孔径的细菌等颗粒不能通过适用范围血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌四、低温与干燥冷冻真空干燥(lyophilization)法：在低温状态下真空抽去水分.用途:保存菌种二、化学消毒灭菌法使用化学药物，来消灭手术人员手臂皮肤、病人手术区皮肤、某些器械物品的细菌，但通常只能达到相对无菌的效果，故亦称消毒。大多对人体组织有害,只能外用或环境消毒.据作用机制主要有以下几类：使菌体蛋白质变性或凝固todenatureandcoagulatebacterialproteins：酚类(石炭酸、来苏、洗必泰);醇类(70%-75%乙

7、醇);重金属盐类(红汞);烷化剂(甲醛)杀菌力强，但毒性大，有致癌性.干扰细菌的酶系统和代谢tointerfereenzymaticsystemandmetabolismofbacterium:氧化剂(过氧化氢、过氧乙酸、高锰酸钾);与细菌酶结合使之失去活性。对细菌繁殖体和芽胞,真菌,病毒都有杀灭作用。损伤菌细胞膜todamagecellmembraneofbacterium表面活性剂;增加菌细胞表面张力，并增加其通透性使细菌破裂。常用消毒剂种类类别作用机制常用种类酚类蛋白变性，细胞膜损伤石炭酸醇类蛋白变性乙醇氧化剂

8、氧化、蛋白沉淀高锰酸甲重金属盐氧化、蛋白酶变性红汞、硫柳汞氧化剂氧化、蛋白沉淀过氧乙酸、碘酒表面活性剂蛋白变性，细胞膜损伤新洁而灭染料干扰氧化、抑制繁殖龙胆紫第二节消毒灭菌的运用(一）高危器械物品:用时需进入无菌组织的物品。所有这些物品都应该灭菌。(二）中危器械物品:用时不进入无菌组织但接触黏膜的器械。采用消毒即可。(三）低危器械物品:只接触未