微生物学第03章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全ppt课件.ppt

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1、第五节抑制或杀灭微生物的理化因素1消毒灭菌的常用术语灭菌（sterilization）：杀灭物体上所有微生物的方法。包括细菌芽胞、病毒和霉菌在内的全部病原微生物和非病原微生物。消毒（disinfection）：杀死物体上或环境中的病原微生物、并不一定能杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。2防腐（antisepsis）：防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。清洁（cleaning）：是指通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数量的过程。无菌（asepsis）和无菌操作：无菌是无活菌的意思，多是灭菌的结果。防止细菌进入人体或其它物品的操作技术，称为无菌操作。3

2、消毒灭菌的方法物理消毒灭菌法化学消毒灭菌法热力、辐射、滤过、干燥和低温使用化学消毒剂4一、物理消毒灭菌法（一）热力灭菌法1.干热灭菌法杀菌机制：使菌体脱水干燥、大分子变性。杀菌条件：80~100℃1h可杀死繁殖体，160~170℃2h可杀死芽胞。5常用方法焚烧----最彻底的灭菌方法烧灼----直接用火焰灭菌方法干烤----加热160-170℃2h废弃物、尸体接种环、试管口玻璃器皿、瓷器62.湿热灭菌法杀菌机制：在水分子存在情况下更易于使菌体蛋白凝固，热力穿透性更强。常用方法巴氏消毒法煮沸消毒法流通蒸汽消毒法间歇蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法7巴氏消毒法概

3、念方法用途利用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物，保持物品中所需的不耐热成分不被破坏的消毒方法61.1～62.8℃，30min71.7，15～30s牛奶、酒类、饮料8煮沸消毒法原理灭菌条件应用范围利用一个大气压下，水的煮沸温度为100℃水煮100℃，5min(繁殖体)~2h(芽胞)耐热，不怕湿的物品。食具、刀剪、注射器（在水中加入2％的碳酸钠可防治金属器皿生锈）9流通蒸汽消毒法原理消毒条件常用的器具利用一个大气压下100℃的水蒸气进行消毒100℃，15～30min(繁殖体)Arnold消毒器；蒸笼10间歇蒸汽灭菌法原理方法用途利用反复多次的流动蒸

4、汽间歇加热流通蒸汽杀菌后，放在37℃孵箱过夜，次日再蒸一次，反复3次适用于一些不耐热的营养丰富的培养基11高压蒸汽灭菌法原理灭菌条件应用范围注意密闭的蒸汽锅，加热产生蒸汽，随着蒸汽压力的不断增加，温度也随之升高103.4kPa、121.3℃、15～30min耐高温、耐湿的物品（手术器械、敷料、培养基）排完冷空气;防治物品多，摆放拥挤;安全阀的使用12高压蒸汽灭菌锅13（二）辐射杀菌法1.紫外线杀菌波长：波长240～300nm的紫外线具有杀菌作用265～266nm杀菌能力最强。杀菌机制：使胸腺嘧啶形成二聚体，干扰DNA的复制与转录。特点：穿透力弱。用途

5、：空气、物品表面消毒。注意：紫外线对眼睛、皮肤有损伤作用14特点：穿透力强，不破坏营养。适用：塑料、食品、药品和生物制品消毒灭菌。3.微波使物品发热。2.电离辐射包括高速电子、X射线和γ射线杀菌机理：产生游离基，破坏DNA15（三）滤过除菌法原理用物理阻留的方法除去液体或空气中的细菌、真菌,以达到除菌目的。滤菌器含有微细小孔0.1～0.45微米,只允许液体或气体通过,而大于孔径的细菌等颗粒不能通过。用途血清、毒素、抗生素以及药液的除菌注意：病毒、支原体、某些L型细菌可以通过滤菌器161718滤器和层流室19（四）干燥与低温抑菌法不耐干燥的微生物。低温

6、一般不能杀死细菌。冷冻真空干燥法：在低温状态下真空抽去水分用途保存菌种20化学消毒灭菌法消毒剂的种类消毒剂的应用酚类、醇类、重金属盐类、氧化剂、表面活性剂人体体表、医疗器械、周围环境21（一）杀菌机制1.促进菌体蛋白质变性或凝固todenaturateandcoagulateproteinsofbacterialcell酚类--石碳酸、来苏、洗必泰等。醇类--70%～75%乙醇杀菌力最强。重金属盐类--红汞等。烷化剂--甲醛等，杀菌力强，但毒性大，有致癌性。222.干扰细菌的酶系统和代谢tointerfereenzymaticsystemandmet

7、abolismofbacterium氧化剂---过氧化氢、高锰酸钾等，与细菌的酶结合使之失去活性。过氧乙酸对细菌繁殖体和芽胞、真菌、病毒都有杀灭作用。233.损伤菌细胞膜todamagecellmembranceofbacterium表面活性剂、脂溶剂：增加菌细胞表面张力，并增加其通透性使细菌破裂。注意：大多对人体组织有害，只能外用或环境消毒。24种类使用浓度用途石炭酸3%-5%地面、器具表面、皮肤消毒乙醇70%-75%皮肤、体温计消毒高锰酸甲0.1%皮肤、尿道、蔬菜、水果消毒红汞2%皮肤、粘膜、小创伤消毒硫柳汞0.1%皮肤消毒、手术部位消毒过氧乙酸

8、0.2%-0.3%塑料、玻璃器材消毒碘酒2%-2.5%皮肤消毒新洁而灭0.05%-1%手术洗手、浸泡手术器械