荧光定量聚合酶链反应检测巨细胞病毒

《荧光定量聚合酶链反应检测巨细胞病毒》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、·P3·!"#$%&"’()#+,-"./(+01#023443.56734.869荧光定量聚合酶链反应检测巨细胞病毒Q8>及其临床应用阮和球符生苗庞海云徐文中图分类号@JJP=P3文献标识码Q文章编号944?R443I（3443）49R44P3R49人类巨细胞病毒（:;’5）在人群中感染率较高，是先天性感染T;@是直接检测病原体本身。在我们实验过程中发现新生儿或幼小中最常见的致畸致残的病毒。临床确诊比较困难。我们设计合成巨婴儿:;’5RD%’阴性，而/VRT;@阳性，这是由于新生儿和婴儿产细胞病毒（:;’5）荧光定量T;@

2、（/7160(U-($-(V1#$F"F#F"M(T;@.生抗体的能力较弱，而不能检出。所以/VRT;@方法更适用于婴幼/VRT;V）诊断试剂盒，以一完全闭管式的T;@和荧光杂交技术相结儿或免疫功能缺陷患者。在T;@RAZ阴性标本/VRT;@阳性有W例，平均考贝数为3=IY94I。结果说明/VRT;@比常规T;@更敏感，合所产生的实时检测定量T;@方法，检测了I49例产妇的血标本，当/VRT;@考贝数小于94I时，常规T;@为阴性。/VRT;@的反应产I3J例新生儿脐血标本和3NP例儿童血标本:;’5RQ8>的含量，同时与A

3、D,>方法和常规T;@进行比较，探讨该方法在巨细胞病毒物，经电泳和紫外线检测，能得到与常规T;@一样的结果，即都可见的临床诊断中的应用价值。33N+G的特异性扩增条带。I49例产妇:;’5RD%’阳性JN例，阳性率为9J=WX，/VRT;@目前巨细胞病毒的诊断多采用AD,>方法检测抗体，该方法快阳性NP例（9?=PX），平均拷贝数值（C7R9）为P=PIY94J；常规T;@（T;@速，有较好特异性，但单一方法检测存在某些局限性，它实际检测的电泳RAZ染色）阳性J9例（9I=PX）；I3J例新生儿脐血:;’5RD%’是人体对:

4、;’5的免疫反应状态，:;’5RD%’阴性，但不能排除阳性94例（I=4X），/VRT;@阳性IN例（94=4X），平均考贝数值（C7R9）:;’5的感染，而/VRT;@则能真实地反映了病毒的存在与复制的为I=PNY94J，T;@RAZ阳性34例（P=9X）；3NP例儿童血标本数值（C7R情况，可减少血清学所致的假阴性报告。/VRT;@方法检测更准确灵9）为J=N3Y94J，T;@RAZ阳性IP例（9J=4X）。结果显示，新生儿:;’5敏地反应:;’5感染数量和治疗恢复情况。/VRT;@可望作为抗体阴性的标本/VRT;@N例

5、阳性，儿童抗体阴性标本/VRT;@阳:;’5诊断和疗效观察的可靠指标。性94例，说明AD,>法检测抗体并非直接检测病原体（抗原），而作者单位：NS4I99海口，海南省人民医院:;<试纸条在:;<定量中的作用黄烟贵中图分类号@JJP=P3文献标识码Q文章编号944?R443I（3443）49R44P3R49在:;<的定量测定中经常会碰到一些高值标本，为了避免盲本:;<含量较高，选择N倍稀释可一次报告结果。目地选择稀释倍数测试浪费试剂和时间，我们可以借助:;<试纸条3=I#带出现较慢，甚至落后于+带，颜色浅于+带或者#带不出先测

6、其血清，根据阳性带和对照带颜色的比较来选择稀释倍数，从现，这样的标本不用稀释直接测其血清都能一次报告结果。而使高值标本尽快并尽可能准确地报告结果。I体会9材料和方法由于:;<在体内的变化速度快，高值和低值相差甚远。对于一9=9仪器>;,：9?4@,A化学免疫发光仪。该机:;<测定范围为些高值标本，盲目地选择稀释倍数，必定浪费试剂和时间。如果稀释（3B9444）CD1EC7。倍数偏大，引起测定结果的误差相对偏大，有的还会由于大倍数稀9=3试剂:;<定量试剂由上海康源设备有限公司提供，:;<释后:;<含量极微测不出，出现提示符O

7、OO，6M(0)"71F()，须降低稀试纸条为,10(,F0"GH’。释倍数再测定，若稀释倍数偏小，稀释后:;<含量仍大于仪器测定9=I方法:;<定性试纸条和:;<定量测定均按说明书操作。范围的上限，测定后出现提示符KKKL"%L.6M(00#$%(，必须试着增大9=J假定:;<定性试纸条测定时出现的阳性带为#带，对照带稀释倍数后重新测定下去。所以对一些临床诊断比较明确或高度怀为+带。疑的病人，如异位姓娠、流产、保胎、早妊以及复查等等，可在定量测3结果和判定定之前，先用:;<试纸条测其血清，然后根据#带与+带颜色的比:;<试

8、纸条插入血清后，随着血清的吸入渗透，出现如下结果较，选择相应的稀释倍数测试，而且试纸条相对于定量试剂要廉价与判定：得多，既节约了资金，又节省了时间，可以说是事半功倍。但对于一3=9#带立即出现，且先于+带，颜色比+带深，这样的标本:;<些诊断不明确的标本，还是先直接测其血清，如若出现提示符