实验四酶的特性实验

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1、.-说明:本实验由四个小实验组成,其中第一个实验〔酶的专一性〕必做,其他三个小实验选做〔至少做一个〕写实验报告时,可以只写需要做的实验容!实验四酶的特性实验一、实验目的酶是生物催化剂,生物体化学反响根本上都是在酶的催化下进展的。通过本实验了解酶催化的特异性、温度对酶活力的影响、PH对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响,对于进一步掌握代反响及其调控机理具有十分重要的意义。二、实验容本实验由酶的专一性实验、温度对酶活力的影响、PH对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响4个小实验组成。〔一〕酶的专一性1、实验原理本实验以唾液淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用为例,来说明酶的专一性。淀粉和蔗

2、糖无复原性,唾液淀粉酶水解淀粉生成有复原性二糖的麦芽糖,但不能催化蔗糖的水解。用班氏试剂检查糖的复原性。班氏试剂为碱性硫酸铜,能氧化具复原性的糖,生成砖红色沉淀氧化亚铜。2、材料、仪器与试剂(1)材料:新鲜配制的唾液及其稀释液(2)仪器:恒温水浴;沸水浴;试管及试管架;(3)试剂:2%蔗糖溶液;溶于0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液;班氏试剂。3、实验操作〔1〕稀释唾液的制备①唾液的获取用一次性杯取一定量的饮用水,漱口以清洁口腔,然后在嘴中含10-20ml饮用水,轻漱2min左右时间,即可获得唾液的原液,含唾液淀粉酶。②不同稀释度唾液的制备〔用大试管〕本实验需制备1:1、1:5、1:20

3、、1:50、1:200等五个不同浓度的稀释唾液。.可修编..-举例说明:1:5指的是稀释了5倍的唾液,制备方法为1份原液+4份蒸馏水。1:20指的是稀释了20倍的唾液,制备方法为1份1:5的稀释液+3分蒸馏水。〔2〕唾液淀粉酶最正确稀释度确实定〔严格按表1添加顺序做实验,用小试管做实验〕表1唾液淀粉酶稀释度确实定管号1〔1:1〕2〔1:5〕3〔1:20〕4〔1:50〕5〔1:200〕0.5%淀粉溶液〔滴〕44444稀释唾液〔ml〕1111137℃恒温水浴中保温5分钟班氏试剂〔ml〕11111沸水浴2~3分钟实验结果〔2〕淀粉酶的专一性表2淀粉酶专一性实验管号1234560.5%淀粉溶液〔

4、滴〕4-4-4-2%蔗糖溶液〔滴〕-4-4-4最正确稀释度唾液〔ml〕--11――煮沸过的最正确稀释度唾液〔ml〕----11蒸馏水〔ml〕11----37℃恒温水浴中保温5分钟班氏试剂〔ml〕111111沸水浴2~3分钟实验结果〔二〕温度对酶活力的影响1、实验原理.可修编..-酶的催化作用受温度的影响。在最适温度下,酶的反响速度最高。淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色,糊精按其分子的大小,遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不呈颜色,麦芽糖遇碘也不呈色,在不同温度下,淀粉被唾液淀粉酶水的程度可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。2、材料、仪器与试剂〔1〕材料:新鲜配制的唾液及其稀释

5、液〔2〕仪器:试管及试管架;恒温水浴;冰浴;沸水浴;〔3〕试剂:溶于0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液;KI-I2碘溶液;3、实验操作取4支枯燥的试管,编号后按下表参加试剂:表3温度对酶活力影响实验加样顺序管号1230.5%淀粉溶液〔ml〕1.51.51.5最正确稀释度唾液〔ml〕11 煮沸过的稀释唾液〔ml〕  1实验结果摇匀后,将1、3号试管放入37℃恒温水浴中,2号试管放入冰水中。10分钟后1、2、3管均取出〔将2号液体分两半〕,用KI-I2溶液来检验1、2、3号管淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录并解释结果。将2号管剩下的一半溶液放入37℃水浴中继续保温10分钟后,再用KI-I2液

6、实验,记录实验结果。〔三〕PH对酶活力的影响1、实验原理酶的活力受环境PH值的影响极为显著。不同酶的最适PH不同。本实验观察PH对唾液淀粉酶活性的影响。唾液淀粉酶的最适PH约为6.8。2、材料、仪器与试剂〔1〕材料:新配制的溶于0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液〔2〕仪器:试管及试管架;吸管;滴管;恒温水浴〔3〕试剂:PH为5.0、5.8、6.8、8.0的缓冲溶液;KI-I2碘溶液;PH试纸3、实验操作表4PH对酶活性的影响实验.可修编..-PH55.86.88.0缓冲液〔ml〕33330.5%淀粉溶液〔ml〕1111向第一个试管参加稀释唾液后,置于37℃的恒温水浴;等待1min后向第二

7、个试管参加稀释唾液,置于37℃的恒温水浴;依次类推!最正确稀释度的唾液〔ml〕1111检查淀粉水解程度待向第四只试管参加唾液2min后,每隔1分钟从第3管中取出1滴反响液于白瓷板上,加碘液检查反响进展情况,直至反响液变为淡棕黄色〔颜色有点淡即可〕。即可从第一只试管依次添加碘液,时间间隔也为1min。碘液(滴)1~21~21~21~2现象为了更好的理解表格容,下面对实验过程进展说明:各取缓冲液3ml,分别注入4支带有的试管,随后于各个

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