实验四酶地特性实验

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1、实用标准文案说明:本实验由四个小实验组成,其中第一个实验(酶的专一性)必做,其他三个小实验选做(至少做一个)写实验报告时,可以只写需要做的实验内容!实验四酶的特性实验一、实验目的酶是生物催化剂,生物体内化学反应基本上都是在酶的催化下进行的。通过本实验了解酶催化的特异性、温度对酶活力的影响、PH对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响,对于进一步掌握代谢反应及其调控机理具有十分重要的意义。二、实验内容本实验由酶的专一性实验、温度对酶活力的影响、PH对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响4个小实验组成。(一)酶的专一性1、

2、实验原理本实验以唾液淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用为例,来说明酶的专一性。淀粉和蔗糖无还原性,唾液淀粉酶水解淀粉生成有还原性二糖的麦芽糖,但不能催化蔗糖的水解。用班氏试剂检查糖的还原性。班氏试剂为碱性硫酸铜,能氧化具还原性的糖,生成砖红色沉淀氧化亚铜。2、材料、仪器与试剂(1)材料:新鲜配制的唾液及其稀释液(2)仪器:恒温水浴;沸水浴;试管及试管架;(3)试剂:2%蔗糖溶液;溶于0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液;班氏试剂。3、实验操作(1)稀释唾液的制备①唾液的获取用一次性杯取一定量的饮用水,漱口以清洁口腔,然后在嘴中含10-20m

3、l饮用水,轻漱2min左右时间,即可获得唾液的原液,内含唾液淀粉酶。②不同稀释度唾液的制备(用大试管)本实验需制备1:1、1:5、1:20、1:50、1:200等五个不同浓度的稀释唾液。精彩文档实用标准文案举例说明:1:5指的是稀释了5倍的唾液,制备方法为1份原液+4份蒸馏水。1:20指的是稀释了20倍的唾液,制备方法为1份1:5的稀释液+3分蒸馏水。(2)唾液淀粉酶最佳稀释度的确定(严格按表1添加顺序做实验,用小试管做实验)表1唾液淀粉酶稀释度的确定管号1(1:1)2(1:5)3(1:20)4(1:50)5(1:200)0.5

4、%淀粉溶液(滴)44444稀释唾液(ml)1111137℃恒温水浴中保温5分钟班氏试剂(ml)11111沸水浴2~3分钟实验结果(2)淀粉酶的专一性表2淀粉酶专一性实验管号1234560.5%淀粉溶液(滴)4-4-4-2%蔗糖溶液(滴)-4-4-4最佳稀释度唾液(ml)--11――煮沸过的最佳稀释度唾液(ml)----11蒸馏水(ml)11----37℃恒温水浴中保温5分钟班氏试剂(ml)111111沸水浴2~3分钟实验结果(二)温度对酶活力的影响1、实验原理精彩文档实用标准文案酶的催化作用受温度的影响。在最适温度下,酶的反应速

5、度最高。淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色,糊精按其分子的大小,遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不呈颜色,麦芽糖遇碘也不呈色,在不同温度下,淀粉被唾液淀粉酶水的程度可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。2、材料、仪器与试剂(1)材料:新鲜配制的唾液及其稀释液(2)仪器:试管及试管架;恒温水浴;冰浴;沸水浴;(3)试剂:溶于0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液;KI-I2碘溶液;3、实验操作取4支干燥的试管,编号后按下表加入试剂:表3温度对酶活力影响实验加样顺序管号1230.5%淀粉溶液(ml)1.51.51.5最佳稀释度唾

6、液(ml)11 煮沸过的稀释唾液(ml)  1实验结果摇匀后,将1、3号试管放入37℃恒温水浴中,2号试管放入冰水中。10分钟后1、2、3管均取出(将2号内液体分两半),用KI-I2溶液来检验1、2、3号管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录并解释结果。将2号管剩下的一半溶液放入37℃水浴中继续保温10分钟后,再用KI-I2液实验,记录实验结果。(三)PH对酶活力的影响1、实验原理酶的活力受环境PH值的影响极为显著。不同酶的最适PH不同。本实验观察PH对唾液淀粉酶活性的影响。唾液淀粉酶的最适PH约为6.8。2、材料、仪器与试剂(1

7、)材料:新配制的溶于0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液(2)仪器:试管及试管架;吸管;滴管;恒温水浴(3)试剂:PH为5.0、5.8、6.8、8.0的缓冲溶液;KI-I2碘溶液;PH试纸3、实验操作表4PH对酶活性的影响实验PH55.86.88.0精彩文档实用标准文案缓冲液(ml)33330.5%淀粉溶液(ml)1111向第一个试管加入稀释唾液后,置于37℃的恒温水浴;等待1min后向第二个试管加入稀释唾液,置于37℃的恒温水浴;依次类推!最佳稀释度的唾液(ml)1111检查淀粉水解程度待向第四只试管加入唾液2min后,每隔1分

8、钟从第3管中取出1滴反应液于白瓷板上,加碘液检查反应进行情况,直至反应液变为淡棕黄色(颜色有点淡即可)。即可从第一只试管依次添加碘液,时间间隔也为1min。碘液(滴)1~21~21~21~2现象为了更好的理解表格内容,下面对实验过程进行说明:各取缓冲液3ml,分

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